방법 논문

신생 전염병 병원체 제거를위한 손씻기의 효능을 시험하는 방법

DOI:

10.3791/55604

⸱

2017년 6월 7일

 , 
1Department of Civil and Environmental Engineering, Tufts University

이 논문에서

요약

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감염성 질병 전파를 예방하기 위해 손씻기가 널리 권장됩니다. 그러나 어떤 손씻기 방법이 전염병 병원균을 제거하는데 가장 효과적인지에 대한 증거는 거의 없다. 우리는 미생물 제거시 손씻기 방법의 효능을 평가하는 방법을 개발했습니다.

초록

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감염성 질병 전파를 예방하기 위해 손씻기가 널리 권장됩니다. 그러나 일반적으로 손씻기 방법의 효능에 대한 비교 가능한 증거는 거의 없다. 또한 손씻기 방법을 비교하여 감염성 병원체를 제거하는데 가장 효과적인 방법을 결정하는 증거는 거의 없다. 전염병 발생시 사용할 수있는 손씻기에 대한 다양한 접근법에 대한 증거를 제공하기위한 연구가 필요합니다. 여기에는 손에서 미생물을 제거 할 때의 손씻기 방법의 효과와 헹굼 수의 지속성을 평가하는 실험실 방법이 설명되어 있습니다. 자원 봉사자의 손에 시험 생물을 먼저 넣고 손으로 씻는 방법으로 씻어 낸다. 일반적으로 대리 미생물은 질병으로부터 사람 피험자를 보호하기 위해 사용됩니다. 세척 후 자원 봉사자의 손에 남아있는 생물의 수는 변형 된 "장갑 주스"방법을 사용하여 시험합니다 : 손은 elu미생물을 부유시키고 멤브레인 여과 (박테리아) 또는 플라크 분석 (바이러스 / 박테리오파지)에 의한 분석에 사용할 수 있도록 스크러빙됩니다. 손씻기에서 생성 된 헹굼 수는 분석을 위해 직접 수집됩니다. 손씻기의 효능은 손씻기 후에 채취 한 시료와 손씻기가없는 시료의 대수 감소 값을 비교하여 계량화합니다. 헹굼 물 지속성은 다양한 손 씻기 방법에서 씻어 낸 물 시료를 물로 손씻기 후에 수집 한 시료와 비교하여 계량화됩니다. 이 방법은 인간 자원 봉사자의 안전을 지키기 위해 대리 조직을 사용할 필요가 있기 때문에 제한적이지만 체외 연구에서 복제하기 어려운 손씻기의 양상을 파악하고 손씻기 효과 및 헹굼에서 감염 생물의 지속성에 대한 연구 틈을 메운다 물.

서론

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손씻기는 설사 및 호흡기 질환을 포함하여 대변 또는 구강 경로로 전염되는 질병의 확산을 막기 위해 널리 권장됩니다 1 . 놀랍게도 비누와 물 (HWWS)로 손을 닦기, 알코올 기반 손 소독제 (ABHS)로 손에서 생물을 제거하는 것과 같은 손씻기 방법의 효능에 대한 비교 가능한 증거는 거의 없다. 초기 연구에 따르면 손씻기 방법과 달리 손씻기의 기계적 작용이 대부분의 유기물 제거에 영향을 줄 수 있습니다. 또한 손씻기 방법이 가장 효과적인 비교 증거는 거의 없습니다. 비공식 문헌 검토에서 비누와 손 소독제의 효능을 유기체 제거에 비교 한 14 개의 연구가 확인되었다. 이 연구들 중 5 명은 ABHS가 더 효과적이라는 것을 발견했습니다 4 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , <....

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프로토콜

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윤리 성명서 : 여기에 기술 된 연구 (에볼라의 대용 물로서 Phi6와 E. coli )는 터프 스 메디컬 센터 (Tufts Medical Center)와 터프 츠 대학교 보건 과학 캠퍼스 (Tufts University Health Sciences Campus)의 기관 검토위원회 (# 12018)의 승인을 받았습니다. 하버드 대학교 (Harvard University)는 Tufts Institutional Review Board (Tufts 기관 검토위원회)에 검토를 양도했습니다.

참고 :이 프로토콜을 시작하기 전에 두 단계를 완료해야합니다. 첫째, 인간 대상에서 안전하게 사용할 수있는 연구 대상 병원체의 바이오 안전성 레벨 1 (BSL-1) 대리인 또는 비 감염성 버전을 확인하고 선정해야합니다 30 . 생물체가 인간 지원자의 맨손에 접종하는 데 사용되므로 BSL-1 대리 병원균 또는 비 감염 병원체가이 프로토콜에 필요합니다. 둘째, 지원자를 모집하거나 실험을 시작하기 전에 지역 인권위원회의 승인을 얻어야한다. 이 프로토콜의 많은 측면은 th를 충족하도록 조정될 수 있습니다.관심있는 연구 질문의 구체적인 요구.

1. 적격 인물을 모....

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결과

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여기에서 프로토콜 ( 그림 1 )은 18 명의 자원 봉사자와 함께 완료되었으며 각각은 E.coli 와 Phi6를 사용하여 테스트되었습니다. 토양 부하가 있거나없는 대장균 과 토양 부하가있는 Phi6 ( 그림 2 및 그림 3 )과의 손 세척 결과간에 유의 한 차이가 발견되었습니다. 토양 부하가없는 대장균의 경우, HTH, NaDCC 및 안정화 된 NaOCl을 사용한 손씻기는 모두 물로 손을 씻는 것보다 훨씬 더 큰 로그 감소를 가져왔다 (F (6,102) = 2.72, p = 0.034). 토양 부하로, HTH는 물 만, HWWS 및 ABHS (F (6,102) = 3.94, p <0.001)보다 대장균의 대폭 감소를 가져왔다. 토양 부하가없는.......

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토론

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여기에 설명된 방법은 통제된 실험실 환경에서 손 씻기 효능을 테스트하기 위한 접근 방식을 제공합니다. 이 방법은 인간 지원자와 대리, 비감염성 유기체의 사용을 강조합니다. 이 방법을 사용하여 1) 손 씻기 방법의 효능과 2) 헹굼수에서 유기체의 지속성의 차이를 입증할 수 있었습니다. 이 프로토콜을 제시하는 목적은 전염병과 관련된 광범위한 대리 유기체 및 손 씻기 방법을 테스트하는 데 적용할 수 있는 일반적인 프레임워크를 제공하는 것입니다.

이 방법을 사용하는 동안 두 가지 주요 데이터 품질 권장 사항이 중요한 것으로 언급되었습니다. 첫째, 접종제는 테스트 라운드 전반에 걸쳐 가능한 한 유사하게 손실을 최소화하는 방식으로 적용되어야 합니다. 이는 통계적으로 유의미한 결과를 얻을 수 있도록 충분한 접종액이 손에 적용되도록 하기 위한 것입니다. 둘째, 이전 연구에서 첫 번째 세척과 후속 세척 사이에 상당한 차이가 있을 가능성이 있지만 클렌징 라운드29<.......

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공개 사항

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저자는 경쟁적인 금전적 이해 관계가 없다고 선언합니다.

감사의 글

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이 작업은 미국 국제 재난 지원 센터 (AID-OFDA-A-15-00026)에 의해 지원되었습니다. 말린 울프 (Marlene Wolfe)는 국립 과학 재단 (National Science Foundation)의 후원을 받았습니다 (부여 0966093).

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
비누 바: DoveWhite Beauty Bar 비누
알코올 기반 손 소독제PurellAdvanced Instant Hand Sanitizer with 70% Ethyl Alcohol
HTH PowderAcros Organics300340010
NaDCC PowderMedentechKlorsept granules
NaOCl SolutionAcros organics419550010
전기 염소처리기 AquaChlor
요오드 메트릭 적정기Hach1690001
소 혈청 알부민MP BiomedicalsNC0117242
TryptoneFisherBP1421-100
소 뮤신EMD Milipore49-964-3500MG
0.22 µ m 필터EMD MiliporeGVWP04700
NaClFisherBP358-1
피부 pH 프로브Hanna InstrumentsH199181
대형 Whirlpak 샘플 백NascoB01447WA
소형 Whirlpak 샘플 백NascoB01323WA
깔때기 병Thermo Scientific3120850001병 뚜껑에 적절한 크기의 구멍을 뚫어 적절한 유속으로 물을 분배하는 깔때기를 만들 수 있습니다.
에탄올ThermoScientific615090010물과 혼합하여 70% 에탄올
스프레이 병QorpakPLC06934
E. coliATCC25922
LB BrothFisher BioReagentsBP1426-2
LB 한천Fisher BioReagentsBP1425-500
멸균 루프글로브 사이언티픽22-170-204
Phi6HER102
영양 육수BD DifcoBD 247110
GeneQuant 100 분광 광도계GeneralElectric 28-9182-04
티오황산나트륨피셔 케미컬S445-3
멤브레인 필터(47mm, 0.45 &마이크로; m)EMD MilliporeHAWP04700
m-ColiBlue24 육수 매체EMD MilliporeM00PMCB24
페트리 접시 패드 포함(47mm)Fisherbrand09-720-500
진공 매니폴드Thermo Scientific/Nalgene09-752-5
필터 깔때기Thermo Scientific/Nalgene09-747
Pseudomonas syringaeHER1102
Phosphate Buffered SalineThermo Scientific10010031Solution은 기본 레시피에 따라 원료 화합물에서 혼합할 수도 있습니다

참고문헌

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  1. Kampf, G., Kramer, A. Epidemiologic Background of Hand Hygiene and Evaluation of the Most Important Agents for Scrubs and Rubs. Clin Microbiol Rev. 17 (4), 863-893 (2004).
  2. Miller, T., Patrick, D., Ormrod, D. Hand decontamination: influence of common variables on hand-wa....

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