대동맥 반지 공동 문화 분석 결과: Mesenchymal Stromal 세포에 생체 외에서 의 신생 잠재력을 평가 하는 편리한 도구

Farwah Iqbal; Yarden S. Gratch; Peter Szaraz; Clifford L. Librach

doi:10.3791/56083

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방법 논문

대동맥 반지 공동 문화 분석 결과: Mesenchymal Stromal 세포에 생체 외에서 의 신생 잠재력을 평가 하는 편리한 도구

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DOI:

10.3791/56083

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2017년 9월 18일

Farwah Iqbal¹^,² , Yarden S. Gratch¹ , Peter Szaraz¹^,² , Clifford L. Librach¹^,²^,³^,⁴^,⁵

¹Create Fertility Centre, ²Department of Physiology, University of Toronto, ³Department of Obstetrics and Gynecology, University of Toronto, ⁴Department of Medical Sciences, University of Toronto, ⁵Department of Obstetrics and Gynecology, Women's College Hospital

이 논문에서

요약

여기, 선물이 대동맥 반지 분석 결과의 새로운 응용 프로그램 prelabelled 중간 엽 세포는 쥐 대동맥 파생 내 피 네트워크와 공동 경작. 이 새로운 메서드 Mesenchymal Stromal 세포 (MSCs) 유도 및 내 피 네트워크와 통합의 시각화, 네트워크 속성의 정량화 및 MSC immunophenotypes 고 진 식의 평가 수 있습니다.

초록

신생은 복잡 하 고, 높은 규제 프로세스를 제공 하 고 적절 한 조직 관류를 유지에 대 한 책임. 지나치게 풍부한 혈관 개발은 암 및 염증 성 질환 관련 된 부족 한 맥 관 구조 유지 보수 및 병 적인 기형 심한 허 혈 성 질환에서 발생할 수 있습니다. 프로-신생 치료의 유망한 형태 신생 셀 소스, 새로 개발 하는 맥 관 구조에 대 한 규제 요인으로 물리적 지원을 제공할 수 있는의 사용 이다.

Mesenchymal Stromal 세포 (MSCs)를 감지 하 여 허 혈 성 또는 염증 조직에 집 혈관 재생 paracrine 효과 및 그들의 능력에 대 한 광범위 하 게 조사 후보자 이다. 특히, 처음 3 달 동안 인간 탯 줄 혈관 주위 세포 (FTM HUCPVCs)는 그들의 pericyte 같은 속성, 높은 증식 및 multilineage 잠재력, 면역 권한 속성, 및 강력한 paracrine 매우 유망한 후보 프로 파일입니다. 효과적으로 평가 하 고 잠재적으로 신생 재생 세포, 그것은 그들에 신뢰할 수 있는 및 "번역" 전 임상 분석 실험 테스트는 필수 이다. 대동맥 반지 분석 결과 비보 전 신생 모델입니다 관 내 피 구조의 쉬운 정량화를 허용, 액세서리 지원 세포와 세포 외 기질 (ECM) 호스트에서 염증 구성 요소를 제외 하며는 빠르고 저렴 한 설정. 이것은 (예를 들어, 각 막 분석 결과, Matrigel 플러그 분석 결과); vivo에서 모델에 비해 유리 대동맥 반지 분석 결과 관리 셀을 추적 하 고 이종 면역 거부를 피하고 있는 동안 세포 상호 작용을 관찰할 수 있습니다.

선물이 개발 쥐 대동맥 내 피 네트워크 공동 문화에서 인간의 MSCs를 포함 하는 대동맥 반지 분석 결과의 새로운 응용 프로그램에 대 한 프로토콜. 이 분석 결과 관 형성 및 물리적 pericyte 같은 상호 작용을 통해 개발에 MSC 기여와 신생의 사이트를 적극적으로 마이그레이션하기 위한 그리고 그들의 능력을 수행 하 고 중재를 평가 하기 위한 그들의 힘의 분석에 대 한 허용 ECM 처리입니다. 이 프로토콜은 MSC 표현 형 유전자 표현 공동 문화에 따라 변화에 추가 정보를 제공 합니다.

서론

신생의 복잡 한 프로세스 향상 하 고 기존 맥 관 구조¹에서 새로운 선박 개발을 추진 하 여 조직 관류를 유지 합니다. 프로-신생 및 안티-신생 요인에 의해 단단히 규제, 공정한 과정 이다. 어떤 결핍이이 시스템에 부족 한 선박 유지 보수 또는 성장, 심근 질환, 뇌졸중, 신경 장애 등 심각한 허 혈 성 질환을 일으키는 발생할 수 있습니다. 그러나, 과장 된 혈관 개발 조건 암, 염증 성 질환²를 포함 하 여 특징입니다.

유리한 조직 재생을 달성 하기 위해 신생을 제어 하는 것을 목표로 하는 치료를 개발 하는 것은 중요입니다. 광범위 한 전 임상 및 임상 조사에도 불구 하 고 신생 프로 신생 요인과 microRNAs를 사용 하 여 자극 하려고 원하는 결과³^,^,⁴⁵달성 못했다. 일시적 효과 대 한 가능한 이유: 신생 단백질 및 핵 산의 한정 된 수의 제한 된 장 수 대상 성장 요인⁶^,⁷. 수....