Aedes aegypti 모기 Wolbachia 감염 arboviruses의 전송을 억제 하는 자연적인 인구에 발표 되는. 우리 실험실 적응 및 선택 최소화 하기 위해 예방 조치를 복용 실험 및 필드 릴리스, 후면 Ae aegypti Wolbachia 감염 실험실에서 하는 방법을 설명 합니다.
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이 논문에서
요약
초록
실험적 감염 Wolbachia aedes aegypti 모기는 뎅기열, chikungunya, Zika 등 arboviruses의 확산을 제어 하는 프로그램에서 활용 되고있다. Wolbachia-감염 된 모기 호환 되지 않는 matings 통해 인구 크기를 줄이거나 또는 바이러스 전송 내 화물은 모기와 인구 변환 필드에 나올 수 있습니다. 성공할이 전략에 대 한 실험실에서 필드에 출시 모기 네이티브 모기와 경쟁 해야 합니다. 그러나, 실험실에서 모기를 유지 될 수 있습니다 근 친, 유전적 부동 및 실험실 적응 분야에서 자신의 체력을 줄일 수 있으며 실험의 결과 혼동 수 있습니다. 테스트 하려면 배포에 대 한 다른 Wolbachia 감염의 적합성 분야에서 그것은 여러 세대에 걸쳐 제어 된 실험실 환경에서 모기를 유지 하는 데 필요한. 우리 모두 Wolbachia적합 실험실에서 Ae aegypti 모기를 유지 하기 위한 간단한 프로토콜 설명-감염 및 야생-타입 모기. 방법 실험실 적응을 최소화 하 고 필드 모기에 실험의 관련성을 높이기 위해 outcrossing 구현. 또한, 식민지는 오픈 필드 자료에 대 한 자신의 적합성을 극대화 하기 위해 최적의 조건에서 유지 됩니다.
서론
Aedes aegypti 모기는 뎅기열, Zika chikungunya1를 포함 하 여 세계에서 가장 중요 한 arboviruses의 일부를 전송 합니다. 이러한 바이러스 Ae aegypti 열 대 지방에 널리 분포2,,34를 확장 하는 계속 되 고 세계 보건에 대 한 증가 위협 되 고 있다. 여성 애 aegypti 우선적으로 인간의 피5 에 피드 하 고 따라서 인구는 가장 조밀한 도시 지역에서 특히 인 간에 게 가까운 근접에서 사는 경향이. 인간과이 가까운 협회를 통해 그들은 또한 타이어, 냄비, 하 수구 및 물 탱크6,7을 포함 하 여 인공 서식 지에서 번 식에 적응 했습니다. Ae aegypti 또한 쉽게 어디 그들은 유지 될 수 있는 어떤 특별 한 필요 조건 없이 Aedes 속8, 다른 종족과 달리 필....
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프로토콜
멜버른 인간의 윤리 위원회의 대학에 의해 승인 되었다 혈액 인간 주제에 모기의 먹이 (승인 #: 0723847). 제공 하는 모든 자원 봉사자 정보 서 면된 동의.
1. 애벌레 양육
참고: 모기는 26 ± 0.5 ° C 및 50-70% 상대 습도,이 식민지 유지 관리 프로토콜에 대 한 12시 12분 h (빛: 다크) photoperiod와에서 개최 됩니다. 이러한 조건을 평균 기후 조건, 호주 및 최적의 열 범위 Ae aegypti 생존과 개발44,,4546대와 비슷합니다. 높은 온도 Wolbachia 감염 모기 식민지에서의 손실 될 수 있습니다 고 피할된47이어야 한다. 우리는 근 친 결혼;을 최소화 하기 위해 인구 당 적어도 500 개인 유지 더 작은 크기의 식민지 유지 피트 니스 결과 [로스 외 미 발표] 가질 수 있습니다. 이러한 조건과 가정 적절 한 영양에서 평균 세대 시간은 ( 표 1참조)는 28 일 ....
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결과
그림 4 에서는 Ae aegypti 애벌레의 개발에 차선의 영양의 효과 보여 줍니다. 때 컨테이너 애벌레 하루 당 식품의 0.25 밀리 그램 제공 됩니다 또는, 개발 시간 증가 둘 다 남성과 여성, 하 고 음식의 0.5 mg와 용기에 보다 적게 동기 제공 됩니다. 적절 한 음식 애벌레의 개발 기간을 통해 제공 되지 않은 경우 유지 관리 일정에 부정적인 영향을 미칠 수이. 느린 개발 개인에 대 한 선택 되 고의 위험에 노출 되어, 혈액 공급이 지연 될 수 있습니다, 그리고 복제 발생 하기 전에 성인 사망률의 위험이 있다.
그림 5 에서는 다양 한 영양 정권 아래 reared Ae aegypti 성인의 날개 길이 (바디 크기의 견.......
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토론
여기에 제시 된 Wolbachia의 유지 보수에 대 한 프로토콜에 따라-감염 된 Ae aegypti 일관성 있는 품질의 건강 한 모기 실험에 대 한 생산 및 필드 자료 열을 확인 해야. (참조57참조) 모기의 대량 양의 생산 우선 순위를 지정 하는 다른 프로토콜, 달리 방법 모두 세대 편안한 양육 조건, 구현 하 여 고에서 자신의 체력을 극대화에 집중 근 친, 선택 및 실험실 적응을 최소화 하 여 세대. 이 프로토콜도 Ae aegypti Wolbachia 감염을 위해 특별히 설계 되었습니다 그러나 Ae aegypti의 모든 종류에 적합 해야 한다. 그러나, 그것은 인구 억제57,58를 달성 하기 위해 높은 숫자를 필요로 하는 살 균 또는 호환 되지 않는 곤충 자료에 필요한 수 있는 (순서 주 당 수백만).......
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공개 사항
저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.
감사의 글
우리는 Heng 린 응, 크리스 패튼, Petrina 존슨 및 우리의 식민지 유지 관리 방법의 개발에 그들의 공헌에 대 한 클레어 Doig 및 원고를 개선 하는 데 도움이 그들의 제안에 대 한 3 명의 익명 검토자 인정 합니다. 우리의 연구 국민 건강에서 아에 프로그램 그랜트와 장학금에 의해 지원 됩니다 그리고 의료 연구 위원회 및 번역 Wellcome 트러스트에서 부여. 파 한 호주 정부 연구 훈련 프로그램 장학금의 받는 사람입니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
2321<>><> 참조하십시오
Monash University에서 제공하는 균주에 대한 정보는 Walker 및 기타를 참조하십시오Monash University에서 제공하는 균주<에 대한 정보는 Xi 및 기타 를 사용할 수 있습니다유충을 기르는 데 사용되는.털 성체 모기에 설탕 공급원으로 제공되는을 사용할 수 , 란 기판으로 제공되는이어야 합니다
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 야생 유형 Aedes aegypti | 호주 퀸즐랜드의 현장 위치에서 수집, 자세한 내용은 Yeap 및 기타 참조39 참조 | ||
| w Mel-infected Aedes aegypti | Monash University 제공. | ||
| w<> AlbB에 감염된 Aedes aegypti | . | ||
| MelPop 감염 Aedes aegypti | . McMeniman 및 기타를 참조하십시오22 균주 | ||
| 인스턴트 건조 효모 | Lowan | 은 알 부화를 자극합니다. 일반 식료품점에서 찾을 수 있습니다. 다른 브랜드는 5L | |
| 플라스틱 욕조 | 사분면 | Q110950 | 유충을 부화시키고 기르는 데 사용됩니다. 다른 제품으로는 |
| 생선 사료 (Tetramin Tropical Tablets)Tetra | 16152 | . 웹 주소: https://www.amazon.com/Tetra-16152-TetraMin-Tropical-10-93-Ounce/dp/B00025Z6SE | |
| 플라스틱 용기 | . 500mL 이상의 모든 플라스틱 용기는 적합해야 합니다 | ||
| 유리 피펫 | 용기 간에 유충과 번데기를 옮기는 데 사용됩니다. 웹 주소: https://www.aliexpress.com/item/10Pcs-Durable-Long-Glass-Experiment-Medical-Pipette-Dropper-Transfer-Pipette-Lab-Supplies-With-Red-Rubber-Cap/32704471109.html?spm=2114.40010308.4.2.py4Kez | ||
| Clicker counter | RS Pro | 710-5212 | 유충, 번데기 및 알을 세는 데 사용됩니다. 웹 주소: http://au.rs-online.com/web/p/products/7105212/?grossPrice=Y |
| Rearing trays | Gratnells | 유충을 기르는 데 사용됩니다. 웹 주소: http://www.gratnells.com | |
| 나일론 메쉬 | 유충과 번데기를 담수 용기로 옮기는 데 사용됩니다. 다른 브랜드를 사용할 수 있습니다. 웹 주소: | ||
| https://www.spotlightstores.com/fabrics-yarn/specialty-apparel-fabrics/nettings-tulles/nylon-netting/p/BP80046941001-white Cages | BugDorm | DP1000 | 성충 모기가 서식합니다. 대체 제품을 사용할 수 있습니다. 웹 주소 : http://bugdorm.megaview.com.tw/bugdorm-1-insect-rearing-cage-30x30x30-cm-pack-of-one-p-29.html |
| 35 mL 플라스틱 컵 | Huhtamaki | AA272225 | 성인 모기에게 물이나 자당을 제공하는 데 사용됩니다. 다른 브랜드는 |
| 35 mL 플라스틱 컵 뚜껑 | Huhtamaki | GB030005 | 성인 모기에게 자당을 제공하는 데 사용됩니다. 다른 브랜드를 사용할 수 있습니다 |
| 솜 | Cutisoft | 71841-13 | 촉촉한 솜털은 성인에게 물 공급원으로 제공됩니다. 다른 브랜드는 |
| 백설탕 | 있습니다. 일반 식료품 점에서 발견 | ||
| : Rope | M Recht Accessories | C323C / W | 성인에게 자당 용액을 제공하는 데 사용됩니다. 다른 브랜드를 사용할 수 있습니다. 웹 주소: https://mrecht.com.au/haberdashery/braids-cords-and-tapes/cords/plaited-cord/cotton/ |
| 플라스틱 컵(대) | 산란 용기로 사용됩니다. 100mL의 물을 담을 수 있는 모든 플라스틱 컵은 산 | ||
| 적절한 사포 | Norton Master Painters | CE015962 | . 대체 제품을 사용할 수 있지만 비교적 무취이기 때문에 이 브랜드를 사용합니다. 계란과의 대비를 위해 더 밝은 색상이 사용됩니다. 웹 주소: https://www.bolt.com.au/115mm-36m-master-painters-bulk-roll-p80-medium-p-9396.html |
| 여과지 | Whatman | 1001-150 | 대체 산란 기판으로 사용됩니다. 다른 브랜드의 사용Z560979 |
| 수 있습니다 라텍스 장갑 | SemperGuard | 혈액 | 수유 할 때 손에 모기에 물리는 것을 방지합니다. 다른 브랜드를 사용할 수 있습니다. 웹 주소: http://www.sempermed.com/en/products/detail/semperguardR_latex_puderfrei_innercoated/ |
참고문헌
- Mayer, S. V., Tesh, R. B., Vasilakis, N. The emergence of arthropod-borne viral diseases: A global prospective on dengue, chikungunya and zika fevers. Acta Trop. 166, 155-163 (2017).
- Campbell, L. P., et al.
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