미토 콘 드 리아 캘리포니아2 + 보존 용량 분석 결과 및 캘리포니아2 +-미토 콘 드 리아 붓기 분석 결과 발생

Wei Li; Chen Zhang; Xiulian Sun

doi:10.3791/56236

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방법 논문

미토 콘 드 리아 캘리포니아^{2 +} 보존 용량 분석 결과 및 캘리포니아^{2 +}-미토 콘 드 리아 붓기 분석 결과 발생

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DOI:

10.3791/56236

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2018년 5월 1일

Wei Li¹^,² , Chen Zhang¹ , Xiulian Sun³

¹Department of Neurology, Qilu Hospital of Shandong University, ²Department of Neurology, Qingdao Municipal Hospital, ³Brain Research Institute, Qilu Hospital of Shandong University

이 논문에서

요약

이 프로토콜 Ca^{2 +} 보존 용량 및 캘리포니아^{2 +}검사 하는 방법을 설명 하는 것을 목표로-트리거 SH-SY5Y의 고립 된 미토 콘 드리 아의 붓기 미토 콘 드리 아 세포 단계.

초록

산화 인 산화에 의해 ATP의 생산은 미토 콘 드리 아의 주 기능은 이다. 더 높은 진핵생물의 미토 콘 드리 아도 참여할 cytosolic 캘리포니아^{2 +}버퍼링, 그리고 미토 콘 드리 아에서 ATP 생산 intramitochondrial 무료 캘리포니아^{2 +} 농도 의해 중재 될 수 있다. 캘리포니아^{2 +} 보존 용량 미토 콘 드 리아 매트릭스에 칼슘을 유지 하는 미토 콘 드리 아의 기능으로 간주 될 수 있습니다. 축적 된 세포내 캘리포니아^{2 +} 리드 안 미토 콘 드리 아 막의 침투성을 미토 콘 드리 아 침투성 전환 기 공 (mPTP)는 분자와 분자의 유출에는 리드 무게 1.5 kDa의 개통 되 나. 캘리포니아^{2 +}-트리거 미토 콘 드리 아 붓기 mPTP 개방을 나타내는 데 사용 됩니다. 여기, 우리가 설명 하는 Ca^{2 +} 보존 용량 및 캘리포니아^{2 +}검사를 두 분석-고립 된 미토 콘 드리 아에서 미토 콘 드리 아 붓기를 트리거. 특정 양의 캘리포니아^{2 +} 추가 후 모든 단계는 하루에 완료 고 microplate 리더에 의해 기록 될 수 있습니다. 따라서,이 두 가지 간단 하 고 효과적인 분석 평가 Ca^{2 +}채택 될 수-미토 콘 드 리아 기능 관련.

서론

미토 콘 드리 아 ATP 산화 인 산화에 의해 포유류 세포에서 사용의 거의 95%를 생산 주요 세포 기관 이다. 그것은 그의 캘리포니아^{2 +} 미토 콘 드리 아에 의해 분리 된 micromolar 집중, ADP와 무기 인산 염의 존재를 사용할 수 있는 합성 ATP¹ADP phosphorylate 보고. Cytosolic 캘리포니아^{2 +}의 농도 임계값 이상 되 면 미토 콘 드리 아 수 이해 캘리포니아^{2 +} 급속 하 게 경과 하 고 그것은 천천히. 따라서, 작동 미토 콘 드리 아 수 유입 증가 cytosolic 캘리포니아^{2 +}. 없는 산화 인 산화에 참여 하는 미토 콘 드 리아 Ca^{2 +} 또한 cytosolic 칼슘 신호에 참여 및 미토 콘 드리 아 내에는 mPTP의 개방을 유도 하 여 미토 콘 드 리아 apoptotic 메커니즘을 활성화 막². 그것은 널리 인정 되었습니다 세포내 캘리포니아^{2 +} 의 비정상적인 상승 mPTP³여 미토 콘 드리 아 대규모 붓기를 일으킬 수 있다. 따라서,이 프로토콜 미토 콘 드 리아 캘리포니아^{2 +} 보....