Intraganglionic 주입에 대 한 요 추 느 루트 신경 절 (DRG)에 대 한 액세스를 제공 하는 돼지에서 laminotomy 하는 방법을 설명 합니다. 사출 진행 intraoperatively 그리고 조직학 수술 후 21 일까지 확인 모니터링 합니다. 이 프로토콜 DRG 주입 관련 된 미래의 전 임상 연구 사용 될 수 있습니다.
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이 논문에서
요약
초록
지 루트 신경 절 (DRG)는 머리 아래 모든 기본 감각 신경 세포를 포함 하는 해부학 잘 정의 된 구조. 이 사실은 만성 통증을 치료 하기 위한 새로운 치료제의 주입을 위해 DRG 매력적인 목표 합니다. 작은 동물 모델에서 laminectomy 각 DRG를 둘러싼 척추 뼈의 외과 제거를 포함 하기 때문에 DRG 주입을 용이 하 게 사용 되었습니다. 큰 동물 종, 즉, 돼지에에서 요 추 DRG의 intraganglionic 주입에 대 한 기술을 설명합니다. Laminotomy는 DRG 표준 신경외과, 악기, 기술과 재료를 사용 하 여 직접 액세스할 수 있도록 수행 됩니다. Laminectomy 통해 더 광범위 한 뼈 제거와 비교, 우리가 충분 한 DRG 액세스를 달성 하는 동안 척추 해부학을 보존 하기 위해 laminotomy를 구현 합니다. DRG 주입의 자가 진행 비 독성 염료를 사용 하 여 모니터링 됩니다. 수술 당일 21 안락사, 다음 주입의 성공 조직학의 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) intraganglionic 배포에 대 한에 의해 결정 됩니다. 우리는 프로토콜을 설명 하는 생물학으로 비활성 솔루션을 주입. 이 방법 적용된 미래에 전 임상 연구 대상 DRG 치료 솔루션을 수 있습니다. 우리의 방법론은 큰 동물성 종에 intraganglionic 작은 동물 패러다임의 translatability를 테스트 용이 해야. 또한,이 프로토콜은 그 돼지에서 DRG 주입의 전 임상 연구를 계획에 대 한 핵심 자원으로 봉사 할지도 모른다.
서론
지 루트 신경 절 (DRG)은 척추 칼럼을 따라 위치한, 신경 해부학 개별 컬렉션. 각 DRG 특정 신체 영역에서 인코딩 및 주변 자극 중앙 신경 시스템 (CNS)를 릴레이 하는 기본 감각 뉴런을 포함 합니다. 예를 들어, 관절염의 통증에는 통증 수용 체는 관절에 대 한 위치 인식 유해 자극 때 시작 됩니다. 이 과정은 불린다 nociception. 유해 자극의 장기 인식 만성 통증 1이끌어 낸다.
만성 통증 한 목표 intraganglionic 주입 3등 DRG, 진통제의 대상된 배달에 대 한 유용한 방법을 개발 하는 전 임상 연구 2 의 빈번한 주제 이다. 그러나, DRG는 범위 내에서 보 니 척추 foramina 4의 거주 때문에 접근 하기 어려운. 몇몇 그룹은 성공적으로 설치류 5,6,7,8,,910에서 척추 수술을 통해이 장애물을 극복 했다.
클리닉, laminectomy 일반적인 척추 작업이 며 그로 인하여 척추 운하 11unroofing 척추 lamina의 외과 제거를 가리킵니다. 그러나 DRG에 대 한 직접 액세스를 감당할 수술 기법의 설치류 5,12에 성공 했다,, 번역 관련 구조의 크기에 비현실적인 고려 차이 그 영향을 어떻게 있을 수 있습니다. 약 동학 또는 기술적 타당성 13,14. 예를 들어 한 연구 T10 3.0, 7.0, 그리고 쥐, 돼지, 및 인간, 각각 158.2 m m에 가로 척수 직경 결정. 따라서, 큰 동물 신경 구조의 더 나은 대략 인간의 차원 모델.
돼지, Raore 그 외 여러 intraspinal 주사 16자 궁 경부 척수에 대 한 액세스를 다단계 laminectomy를 사용. 절차 잘 용납 되었다 고 단계 나 임상 실험 대 등 수술 결과 문서화 17을 했다. 이 결과 기술적 타당성 및 인간에서 안전의 예측으로 큰 전 임상 동물 모델의 지속적인된 사용을 권장합니다.
날짜 하려면, 아무 상세한 방법론 외과 접근 및 큰 동물 종에서 DRG의 주입에 대 한 존재 합니다. 이 변환 간격을 좁히는, 우리 보고 DRG 노출 및 돼지에 laminotomy 통해 주입에 대 한 프로토콜. 표준 신경외과, 악기, 기술과 재료를 사용 했다 하 고 메서드가 현대 외과 연습을 모방 하도록 설계 되었습니다. 우리 intraganglionic 주입 허리 DRG에 대 한 용액을 사용 하 여 설명 하 고 수술 하루 21 조직학 통해 배달 확인.
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프로토콜
여기에서 설명한 모든 방법을 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 메이 요 클리닉에 의해 승인.
1. 경직의 필수 구성 요소 및 재현성
- 디자인의 사후 보장, 좋은 연구실 관행 항상에 있으며 어떤 동물 이전 IACUC (또는 유사한 위원회)에 의해 내부 승인을의 국가 기준에 따라 실험에 참여.
참고:이 프로토콜은 임상 충실 한 접근을 유지 하도록 설계 되었습니다. 따라서, 재료, 악기와 관련 된 기술 설명 패션 인 간에 있는 임상 기준에 동일 합니다. 예를 들어, 엄격한 무 균 기법을 따라 하 고 만료 된 재료는 사용 하지 마십시오. - 실험 설정에이 방법론의 재현성을 지원 하기 위해 내부 표준 운영 절차를 개발 하 고 돼지 품종, 체중, 성별, 그리고 별도 동료 사이 나이에 변화에 대 한 제어.
참고:이 프로토콜의 디자인 무게 38-53 kg. 돼지의 사용에 근거 했다
2. 수술 동물 관리
- 절차에 앞서 1 일 5mg/kg에서 주어진 예방 근육 (IM) ceftiofur, 관리.
- 빠른 고체 음식 동물 및 미용 치료, 즉 기름 목욕, 절차 이전 12 h에서 동물을 제한.
- 메신저 tiletamine 및 zolazepam, 5 mg/kg, 그리고 IM xylazine, 2 mg/kg.에서 Telazol으로 주어를 사용 하 여 프로시저의 1 시간 이내 뽑기 일반 마 취
- 일단 유도, 관리 피하 (SC), 지속적인 buprenorphine 릴리스 (SR), 0.18 mg/kg.에서 주어진
- 귀 정 맥 카 테 터를 배치 하 고 급속 한 순서 배치 endotracheal 튜브 삽 관 법 수행.
- 펄스 속도도 모니터링 기능 산소와 심장 박동 모니터를 혀에 심장 박동 연결.
- 경향이 위치에 동물 놓고 전기 클리퍼를 사용 하 여 등을 통해 피부를 클립 합니다. 머리 중간 코로나 평면에 중간 화살 비행기에서 고 경도를 견 갑 골 쪽이 성 례의 정점에서 연장 대형, 양자 영역 클립. 접착 테이프를 사용 하 여 머리와 부동성 피부 제거.
- 스크럽 클리핑된 영역 최대 3 번 따뜻한 물과 비누로 하 고 보풀 수건을 사용 하 여 피부 건조.
- 마크 양자 해부학 적 랜드마크 수술 마킹 펜을 사용 하 여. 마지막 늑 골, 장 골 볏, spinous 프로세스, 및 가로 프로세스 표시.
참고: 마지막 늑 골, 장 골 볏, 및 가로 프로세스를 표시 하 여 요 추 척추는 경계선의 우량한, 열 등 한, 및 측면 경계를 따라 각각. 이 프로토콜은 액세스 및 관심의 모든 허리 DRG의 주입 가이드 설계 되었습니다. 참고로, 우수한 장 골 볏 정렬 L3 또는 L4 척추 수준. - 요원 스위트 전송에 대 한 따뜻한 담요와 동물 커버.
3. 신 제품군에 위치
- 부드럽게 리프트와 위치는 경향이 동물 수정된 큰 자비 롭 동물에 슬링 패딩된 복 조리개와.
참고: 복 부 조리개 수 있습니다 복 부의 압력에서 감소에 대 한 척추의 인간의 수술 하는 동안 사용 된 윌슨 프레임 비슷합니다. 차례 차례로,이 자가 척추 혈관에서 출혈 감소 합니다. 슬링은 다리 주변 신경 충돌에서 동물을 보호 하는 패딩된 구멍을 통해 자유롭게 걸 수 있기 때문에 유리 하다. 그러나, 때문에 슬링 프레임 금속, 그것 해야 합니다 수 채워집니다 전기 합선 및 실수로 동물 화상을 방지 하기 위해 절연. 담요 롤 동물의 크기에 따라 편안한 자세에서 머리와 목의 위치에 배치 될 수 있습니다. - 유지 전신 1-3%를 사용 하 여 효과를 적정 (IH) isoflurane 흡입. 안과 연 고와 눈을 축 축 하 게 하 고 부드럽게 그들 닥 쳐 테이프.
- 중요 한 기호 문서 온도, 혈압, 심장 박동, 및 산소 모니터링 장소 라인. 환기 capnography 모니터링할.
- 왼쪽 이나 오른쪽 견 갑 골 위에 접착제, 일회용 electrosurgical 분산 전극 배치.
- 관리 따뜻하게 Lactated 벨 ' 귀 정 맥 카 테 터를 통해 유지 보수 체액으로 s. 5-10 mL/kg의 비율로 체액을 제공/h.
- 흉부 및 자 궁 경부 지역 위에 강제 공기 데우는 장치를 놓고 마지막 갈비뼈를 포함 하지 마십시오.
4. 살 균 준비의 요원에 대 한 필드 왼쪽 양면 사출
참고:이 시점에서 엄격한 살 균 방식 진행.
- ' s 지시. 가이드 바늘 나중 메 마른 패션에 배치 될 수 있도록 antisepsis 표시 가로 프로세스 과거 중간 코로나 비행기 쪽으로 확장 하 여 계획 된 주입의 옆에 응용 프로그램을 lateralize.
- 표시 요 추 spinous 프로세스에 따라 중간 이상 되는 계획 된 절 개 사이트를 대략적으로 직사각형 패션에 일회용 외과 수건 장소.
- 적용 항균 접착제 incise 요원 수건을 통해 드러 워 진 그리고 피부. 장소에 커튼을 클램프와 요원 필드 휘장 가장자리 확장.
- 보안 요원 필드와 모니터링 기술자 사이 슬링의 머리에서 기둥에 수직 드 레이프. 흡입 및 무 균 커튼을 클램핑 함으로써 요원 분야 내 electrosurgery
- 보안 라인. 살 균 필드 튜브 및 와이어의 무료 끝 통과.
5. 피부 절 개 및 Subperiosteal 해 부
- 중간 선 따라 허리 spinous 프로세스를 만져 하 고 3 연속 척추 수준 식별.
- #15 메스를 사용 하 여 절 개 드 레이프 spinous 프로세스에 직접 후부를 통해 8-12 cm 중간 화살 절 개를 엽니다. Hemostasis 거 즈 tamponade monopolar electrosurgery를 사용 하 여 유지.
참고: 관리는 하지에서 벗어나고 정중 선 절 개가 paraspinal 근육에서 출혈을 제한 하기 때문에 앞쪽 방향에서 고급은 취해야 한다. 정기적인 촉진 spinous 프로세스에 대 한 발전을 촉진 한다. Weitlaner, Meyerding, 또는 Gelpi 브래킷으로 자체 유지 수 있습니다 배치 되며 위치 해 부를 촉진 하는 데 필요한. 흡입은 가시성을 유지 하는 데 사용 됩니다. - 피하 조직 및 지방 thoracolumbar 근 막에 도달할 때까지 monopolar electrosurgery를 사용 하 여 해 부. 만져 thoracolumbar 근 막 깊이 spinous 프로세스와 spinous 프로세스 사이 supraspinous 인 대 확장을 노출 하는 중간에 따라 근 막 잘라.
참고: thoracolumbar 근 막 조직, aponeurotic 칼 집으로는 간접, 중간 방향 측면에서 interweaves 결합 조직 입자로 식별 됩니다. 이 시점에서, 절 개 3 spinous 프로세스 해 부 분야의 센터 내 맞춤 centermost spinous 프로세스와 완벽 하 게 볼 수 있습니다 수 있도록 우수한 또는 열 등 한 방향으로 길게 할 수 있습니다. - #15 블레이드를 사용 하 여 각 spinous 프로세스에 후부 supraspinous 인 대를 통해 2 m m 깊은 parasagittal 절 개 배치. Spinous 프로세스의 후부 표면의 왼쪽된 3 분의 1에 따라 각 절 개 배치.
- 부드럽게 각 inc 따라 각 수준에서 supraspinous 인 대 출시5 mm 자유로움 엘리베이터를 사용 하 여 ision.
- Subperiosteal 비행기를 식별 하 고 각 spinous 프로세스의 측면 표면 따라 그 비행기 내에서 해 부.
- Subperiosteal 해 부를 수행 부드러운 되도록 병렬 방식에서 각 spinous 과정, 심지어 해 부 이루어집니다.
- Monopolar electrosurgery subperiosteal 해 부와 함께에서 사용 하 여 interspinous 공간 따라 paraspinal 근육 첨부 파일 incise.
- 각 수준에서 lamina를 식별 하 고 계속 옆으로 3 노출된 척추를 연결 하는 2 zygapophyseal 관절의 측면 경계에 도달 하는 파스 라는 관절 사이의 lamina의 측면 가장자리를 도달 하는 subperiosteal 해 부 interarticularis.
참고: 동위 interarticularis 어떤 점에서 DRG 있는 척추 구멍의 후부 테두리입니다. 때때로, 작은 정 맥은 lamina의 후부 표면에 있는 구멍에서 발생 합니다. 이러한 정 맥 subperiosteal 해 부 동안에 파열 하는 경향이 있다. Hemostasis 바이 폴라 electrosurgery 및 뼈 왁 스는 구멍에 적용의 조합을 사용 하 여 쉽게 이루어집니다.
6. 단일 레벨 Laminotomy
- centermost lamina 사이 고 2 zygapophyseal 관절 내측으로 laminotomy의 대상 식별.
- 추적의 열 등 한 가장자리, 꼬리 zygapophyseal 공동의 연속 열 등 관절 프로세스에 그냥 중간 지점에 lamina.
- 를 사용 하 여 5 mm 자유로움 엘리베이터 또는 퀴 렛 lamina 및 중앙 운하의 caudalmost 가장자리 사이의 전환 만져.
참고:은 주의 하지 강제로 palpating 악기 앞쪽이 듀 럴 색 및 척수 연락처 것입니다. 유의 하십시오 돼지에서 척수 척추 요 추 18 과거 확장. 촉진을 촉진 하기 위하여이 지역 overlying 추가 부드러운 조직을 제거 하는 척추 디스크 rongeur를 사용할 수 있습니다. - 사용은 2 mm 최대-무, 45도 Kerrison rongeur piece-wise 패션에 뼈를 추출. 그냥 꼬리는 작은 꽃 자루의 꼬리 표면 수준에 위에 spinous 프로세스의 기지에 따라 뼈를 제거 하 고 옆으로 밖으로 그것의 전체 넓이에.
- 사용 각도 뼈 rongeurs 뼈 제거 지원. 두고는 laminotomy 크게 완료 될 때까지 자리에 lamina에 연결 된 열 등 한 관절 과정.
- 는 열 등 한 관절 프로세스를 자유롭게 이동 하 고 연결 된 zygapophyseal 공동 캡슐에 의해서만 확인 합니다. #11 또는 #15 블레이드를 사용 하 여 캡슐 incise.
- Piece-wise 패션에 열 등 한 관절 프로세스를 제거 하지만 인접 한 뛰어난 관절 프로세스를 그대로.
참고:는 laminotomy 완료 hemostasis 바이 폴라 electrosurgery 함께 수행 됩니다. Monopolar electrosurgery 신경 구조의 근접 때문에 사용 되지 않습니다. 본 왁 스 노출 된 뼈에서 출혈의 사이트에 따라 놓일 수 있다 고 흡수 젤라틴 스폰지 부드러운 조직 근처 hemostasis를 가져오기 위해 사용할 수 있습니다. Cottonoid 심지 묽 및 해 부에서 혈액에 유용한 도구입니다.
7. DRG의 해 부
- 피난 piece-wise 패션에 경 막 외 지방 표면에서 깊은 medially 시작 하 여 옆으로 진행. 6-10 프랑스 프레이 저 흡입 팁 양극 겸 자 및 흡입을 사용 하 여 부드러운 절 개 하 여 지방을 제거.
참고: 확대 확대 또는 해 현미경의 사용은 안전 하 게 철수 경 막 외 지방 하 고 세심 한 hemostasis 바이 폴라 electrosurgery를 사용 하 여 경 막 외 정 맥 총의 달성 하는 데 필요한 세부 수준을 제공 하는 데 도움이. - 는 Superoinferior 방향, 피부 절 개의 축에 평행으로 실행 하는 중간 선 따라 듀 럴 색을 식별 합니다. 듀 럴 색 경 막 신경 루트 소매를 볼 수 있습니다 때까지 듀 럴 색 따라 경 막 외 지방 제거.
- 추적 듀 럴 소매 옆 및 inferiorly 경 막 외 지방 피난 하 여 확대는 DRG 주위를 볼 때까지.
참고: 그것의 타원형 모양 및 노란색 오렌지 색상에 대 한 DRG를 식별 합니다. 중간 허리 척추에는 DRG는 일반적으로 4-6 m m 크기, 측면 방향으로 중간에 긴 위치에 직접 열 등 또는 2-3 mm의 각 작은 꽃 자루에 중간. 무딘, 직각 신경 후크는 작은 꽃 자루를 만져 부드럽게 하는 데 사용할 수 있습니다.
인접 한 척추 신경 볼 때까지 - 측면, DRG, 과거 경 막 외 지방을 대피.
참고: durotomy 발생 하면, 그것을 복구 간단한 실행 stich의 6-0 나일론 봉합 및 부드러운 마이크로 바늘 드라이버를 사용 하 여 방수 마감.
8. DRG의 주입
- 22 게이지 척수 바늘을 사용 하 여 32-게이지 대류 향상 된 배달 (CED) 바늘의 궤적을 안내 하. 피부와 paraspinal 근육 통해 22 게이지 가이드 바늘 찔린.
참고: CED 바늘은 조직, 일컬어 대량 흐름, 압력 기온 변화도 19 , 20 때문에 유체 대류를 달성 하도록 설계 되었습니다. - 목표는 DRG의 경도 축에 근접 하 고 해 부 분야의 측면 paraspinal 벽에서 신흥 바늘 팁에서 궤적을 따라 가이드 바늘.
- 벌금 바늘 루멘은 DRG의 중심에 정렬 될 때까지 바늘 경로 조정.
참고: 가이드 바늘 결코가 수는 DRG 문의. - 멸 균 주사기로 살 균 injectate을 작성 하 고 메 마른 주입 튜브에 주사기를 연결.
- 는 CED 바늘에 튜브를 장악 하 고 손 살 균 필드 주사기. 프로그래밍 가능한 주사기 펌프에 주사기를 연결.
참고: 튜브 5 피트의 길이 불 임 및 이동성 유지 되도록 준비 된다. 또한, 그것은 파라마운트 중요성 없음 기포 솔루션으로 도입 될. - 식 CED 바늘 팁에서 볼 때까지 injectate 사전.
- 는 가이드 바늘 루멘 내의 CED 바늘을 배치 하 고 가이드 바늘 팁에서 나온다 때까지 천천히 CED 바늘을 사전. DRG 바늘 맞춤 동안 구멍이 되지 확인 하십시오.
- 미세 조정 CED 팁의 최종 위치를 결정 하는 탄도의 긴 축 따라 가이드 바늘 위치.
- 바늘 및 CED 바늘 깊이 가이드 CED 바늘의 맞춤 달성 되 면 함께 연동 바늘 허브를 사용 하 여 가이드를 확보.
- 모든 사출 장치 연결 완전히 가이드 바늘, CED 바늘을 포함 하 여 보호 되 고 injectate와 연결 된 튜브 로드 확인.
- 대략적인 CED 바늘 팁와 DRG에 긴 축 따라 가이드 바늘 사전.
- CED 바늘 팁 DRG 펑크.
- 는 DRG의 3 차원 중심으로 CED 바늘 팁을 submerse.
참고:는 DRG는 가변 크기와 모양의 3 차원 구조, DRG 노출은 DRG의 진정한 중심에서 CED 바늘 팁을 정확 하 게 두기 위하여 완료 되어야 합니다. 진정한 DRG 센터는 그것의 3 개의 해 부 축의 교차점, 즉, 후부에 앞쪽 측면에 중간, 그리고 열 등 한 축에 우수한. - CED 졸업된 속도 볼륨의 3 단계를 사용 하 여 injectate의 제공 100 μ.
- 2 제공 4 μ μ/첫 번째 단계에 대 한 민. 두 번째 단계에 대 한 4 μ/분 8 μ를 제공 합니다. 세 번째이자 마지막 단계에 대 한 8 μ/분에 제공 하는 88 μ.
참고: 수 단계 사이 및 압력 평형 수 있도록 마지막 단계 후 3 분 일시 중지. - 최종 주입 단계와 부드럽고, 부드러운 모션에서 긴 축 따라 3 분 일시 중지 후 주입 기구 철회.
참고: 삽입 된 솔루션을 무색, 착 색된 염료 0.1% 무게/injectate 배포 12의 시각적 평가에 도움이 볼륨의 농도에서 솔루션에 포함 되어 있습니다. 또한, 중요 한 염료 4 ', 연구 설계 injectate 배포 5의 더 평가가 필요한 경우 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 0.25 μ g/μ의 농도에서 솔루션에 포함 된는.
9. 폐쇄
- 동원 및 플러시 파편, 즉 뼈 파편의 사이트 폐쇄 전에 외과 사이트에 따뜻한 식 염 수 관개의 적용 3 라운드. 흡입을 사용 하 여 식 염 수와 파편.
참고: 세심 한 hemostasis 관개 명확 때 지켜진다. Hemostatic 에이전트 (젤라틴 스폰지)와 cottonoid이이 시간에 제거 됩니다. 모든 자료와 악기 폐쇄 이전 절 개 사이트에서 삭제 하는 확인 하십시오. - 폐쇄에 대 한 3 계층 기법 사용.
- 0 봉합 사를 사용 하 여 간단 하 고, 중단, 사용 방식에서 thoracolumbar 근 막 봉합. Stich 모든 5-8 m m 방수 폐쇄를 달성 하기 위해 배치.
- 봉합 스티치와 함께 간단 하 고, 중단, 반전 패션에 2-0 봉합 사를 사용 하 여 피하 조직 배치 모든 5-에-8mm 적절 한 강도 달성 하기 위해.
- 실행 간단한, 0 봉합 사를 사용 하 여 피부를 닫거나 중단 패션.
- 바늘 카운터를 사용 하 여 아무 sharps 집결을 위해
- 관개 식 염 수와 피부, 건조 한 피부, 고 접착성 붕대 스트립 절 개 수직 배치.
- 장소 거 즈 붕대 위에 제거 하 고 항균 최종 접착제를 연결 incise 드 레이프.
10. 수술 동물 관리
- Extubate, 따뜻한 담요, 커버 하 고 복구 동물 수송.
- 수술 모니터링 및 생존 수술에서 회복 기관 표준 운영 절차에 따라. 최소한, 관찰 동물 마다 15 분 의식, 시간당 전체 마 취 회복, 달성 될 때까지 두 번 매일의 반환까지 그 후.
- 관리 IM 또는 구두 carprofen 4 mg/kg, 일단 수술 날 0에 시작 하는 5 일 동안 매일에 주어진 제공 수술 후 통증 관리. 수술 날 2에 0.18 mg/kg에서 주어진 SC buprenorphine SR, 관리.
- 수술 날 4에 5 mg/kg에서 주어진 메신저 ceftiofur를 함으로써 수술 antisepsis 관리.
- 수술 후 5-7 일에 붕대를 제거합니다. 일반적으로 수술 후 10-14 일에 완료 되 면 상처 치유는 봉합을 제거.
- 연구 끝점에 도달 하면 기관 표준 운영 절차에 따라 동물을 고통 없이 안락사.
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결과
Injectate의 더 평가
DRG injectate의 성공적인 납품 DAPI 확산의 조직학 평가 의해 결정 됩니다. 기법 바늘 팁은 DRG의 3 차원 중심에 위치 한다. 따라서, 배달 DAPI 바늘 끝에 조직학 단면도에서 둘 다 (중앙 DRG 섹션) 근처 고 먼 (주변 DRG 섹션) 얼룩의 정도 평가 하 여 결정 됩니다. 그림 1A 및 그림 1B 한 DRG의 성공적인 주입을 나타냅니다. DAPI 얼룩 모두 중앙과 주변 DRG 실질 통해 균등 하 게 분산 되었다. 따라서, 성공적인 DRG 주입 DAPI 3 차원 DRG 아키텍처에 걸쳐 얼룩의 확산 확산에 의해 그림입니다. 최적의 주입 일관성 얼룩 그림 이다. 예를 들어, 최소한의 얼룩 (그림 1C) 또는 외부 변죽만 DRG 실질 (그림 1D
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토론
우리는 DRG 통해 laminotomy 및 건강 한 큰 동물성 종에 있는 intraganglionic 주입 수술 노출 하는 방법을 설명 하고자 특히, 돼지. 설치류, 유사한 방법 자세한 12 되어 있으며 기존의 pharmacologic 요원 8,10 및 바이러스 성 벡터 6,7,,912 DRG를 제공 하는 데 사용. 위의 작은 동물 연구에서 결과 유망 하 고 우리의 프로토콜 돼지에 이러한 사전 결과 번역 하는 다른 사람에 대 한 방법을 포장 됩니다 바랍니다. 건강 하 고 병에 걸린 동물에 위의 연구, 전 임상 연구에서 작은 동물의 유틸리티를...
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공개 사항
없음; 저자는이 연구에 관련 된 충돌의 관심 있다.
감사의 글
연구 지원 Schulze 가족 재단 (A.S.B.)에 의해 수행 되었다.
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재료
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| 애플리케이터가 있는 Duraprep 솔루션, 26mL(0.7% 요오드 포바크릴렉스, 74% 이소프로필 알코올) | 3M | 8630 | - |
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| 무딘 직각 신경 후크 | Medline | MDS4005220 | - |
| 나일론 봉합사, 6-0 | Ethicon | 697G-Castroviejo | |
| 부드러운 마이크로 바늘 홀더 | Medline | MDG2428614-22 | |
| 게이지 Quinke 포인트 척추 바늘 | Halyard Health | 18397-32 | |
| 게이지 CED 바늘 잠금 Luer 허브 | 의견 보기 | n/a | 에서와 같이: Pleticha, J., Maus, T.P., Christner, J.A., Marsh, M.P., Lee, K.H., Hooten, W.M., Beutler, A.S. Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans. 기술 노트. J 신경외과. 121(4), 851-8 (2014년). |
| 폴리에틸렌 튜브, 5 | Scientific Commodities | BB31695-PE/05-Monoject | |
| 주사기, 3mL | Kendall | SY15352-NanoJet | |
| 주사기 펌프 | Chemyx | 10050-DAPI | |
| Sigma-Aldrich | D9542-Fast | ||
| Green FCF | Sigma-Aldrich | F7252 | - |
| 전구 관개 주사기 | Medline | ||
| Adson 집게 | Medline | ||
| MDS1000212-Vicryl 봉합사, 0 | Ethicon | J603H-Vicryl | |
| 봉합사, 2-0 | Ethicon | J317H | - |
| 니들 카운터 | Medline | ||
| NC20FBRGS-Steri-스트립 스킨 클로저, 1/2x4 인치 | 3M | R1547 | - |
참고문헌
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