성인 남성 마우스 transurethral 주입 절차

요약

Transurethral 점 도전 절차 이며 문학에서 잘 설명 되어 있다. 이 원고의 목적은 transurethral 방광 및/또는 성인 남성 생쥐에서 전립선으로 활성 물질과 액체의 intravesical 전달 카 테 터 삽입에 대 한 기술을 설명 하는 것입니다.

초록

Transurethral 점 방광 pathologies의 동물 모델을 유도 하거나 평가 방광에 로컬 활성 성분 (예를 들어, 약물, 화학 물질, 박테리아 및 바이러스)와 다른 솔루션을 제공 하 고 사용할 수 있는 intravesical 치료의 효과입니다. 더 낮은 요로 (LUT) pathologies의 설치류 모델 가장 여성 요도 통해 물질의 intravesical 기지의 용이성을 인해 여성 쥐에 유도 됩니다. 그러나, 여성 및 남성 LUT 사이 해 부 차이 남성 마우스에서 transurethral 점 간주 되었습니다 매우 어려운 절차 그리고 그것 이전 설명 하지는. 이 원고는 남성 마우스의 요도에 후속 삽입을 위한 폴 리 에틸렌 (PE) 관을 준비 하는 방법에 대 한 자세한 설명을 제공 합니다. 또한, 우리 PE 튜브 접종의 원하는 위치에 따라 사용할 수 이상적인 유형의 토론. 또한, 우리 포인트 포인트 요도에 부상을 방지 하 고 원하는 위치에는 솔루션의 제공을 보장 하는 성공적인 transurethral 문제에 대 한 동물을 준비 하는 방법을 설명 합니다. 절차는 축소는 포 피와 귀 두 요도 도관의 개통을 표시 하 여 시작 됩니다. 다음, 귀 두는 음와 PE 튜브 안정 무딘 분쇄 비 집게에 의해 파악 된다. PE 튜브 처음 동물의 시체를 병렬 요도 도관 삽입 후 각도 요도의 자연 곡률을 따라 그것을 책략을 카 테 터를 기울이기에 의해 조정 됩니다. 이 기술은 방광 pathologies의 유도 murine 모델 하는 데 사용 될 수 있습니다 또는 남성 쥐에서 intravesical 치료의 효과 평가.

서론

Transurethral 문제 접근은 이전 연구에서로 사용 방법 중 하나 방광 병 리^1,2,,34 의 설치류 모델을 만들 고 평가 하는 데 사용 될 수는 마우스에 로컬로 배달 된 치료의 효과입니다. 동물 모델은 인간의 병 리 정리 완전 수 없습니다, 비록 동물 연구에서 기본 메커니즘의 간 질 성 방광염/방광 통증 증후군, neurogenic 등 인간의 LUT 장애의 더 나은 이해 제공 방광염, 자가 면역 질환 방광염 및 전립선 염증⁵.

성인 남성 마우스에 수행 transurethral 주입 절차는 성인 여성 마우스⁶intravesical 점 보다 더 기술적으로 도전 합니다. 그것의 작은 직경 함께 남성 요도의 자연스럽 게 곡선된 해부학 어렵게 기술적으로 카 테 터의 transurethral 삽입을 수행 하. 따라서, 자세한 마우스 요로 감염⁶ 및 LUT 염증^....

프로토콜

동물, 방법 및 마 취, 수술 후 치료의 기간을 포함 하 여 모든 절차는 수 의사와 함께 논의 되었고 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)에 의해 승인 된 제휴 기관입니다. 이 원고에서 모든 절차 15 주 된 C57BL/6 남성 쥐 8 수행한 및 프로토콜 승인 콜로라도의 대학에 IACUC에 의해 동물 보호 지침을 따릅니다.

1. 튜브 준비

참고:는 inoculum을 주입 하는 바늘 폴 리 에틸렌 (PE) 관 ( 그림 1A) 또는 작은 계기에 연결 된 (< 24 G) angiocatheter 사용된 (수 있습니다 그림 1G)입니다. angiocatheter 사용 하 여 70% 에탄올 (EtOH) 살 균 이외의 아무런 준비가 필요합니다. inoculum 얻은/주입/입금 요로는 물질 이다.입니다. 이 박테리아, 바이러스, 또는 화학 물질을 포함 하는 솔루션을 수 있습니다. 이것은 연구 프로토콜 및 미리 준비. 예를 들어 연구 더 낮은 요로 대장균 감염의 효과 평가 하는 것을 목표로, 경우 연구원 준비 해야 합니다 inoculum 포함 하는 더 낮은 요로 주사....

결과

PE 50 튜브를 통해 파란 염료의 transurethral 점 각각 (그림 4A), 오 줌 방광 그리고 PE 10 SV와 AP (그림 4B)의 색에 튜브를 통해 염료의 주입 결과. 수행된 transurethral 주입 하면 신장에 inoculum의 인스턴트 역류 또는 하지 여부를 평가 하 고 신장 ureter 관찰 되었다 파란 염료 및 형광 염료 (그림 4A-B) 100 µ L의 주입에 의해 따라. PE 튜브와 두 개의 서로 다른 염료의 2 개의 다른 크기를 사용 하 여 주입 절차의 결과 ureters 또는 신장의 색.

토론

이 원고는 성인 남성 마우스 transurethral 주입 하는 방법을 자세하게에서 설명합니다. 차동 주 시드 지역 다른 직경의 PE 튜브를 사용 하 여 도달할 수 있습니다. PE-50 성공적으로 PE 10 AP와 SV (그림 3A-B)를 도달 하는 더 큰 직경 동안 방광 루멘을 도달 하기 위한 것이 좋습니다. PE 튜브 및 접종에 대 한 대상 장기의 크기의 선택, 이외에 얻은 inoculum의 볼륨 등 다른 요인 또한 역할 끝 위치와 솔루션의 배포에. 우리의 실험 입증 블루의 100 µ L의 그 transurethral 점 중 PE-10를 사용 하 여 염색 또는 PE 50 신장에 염료의 인스턴트 퇴조를 트리거하지 않습니다. 그러나, 신장에 소변의 역류 주입 후 기간 동안 발생할 수 있습니다 및 이전 성인 여성 쥐⁸에 표시 된 것 처럼 신장 감염 될 수 있습니다. 따라서, 신장의 조직학 평가 좋습니다 t.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
BD INTRAMEDIC 폴리에틸렌 튜빙 / PE 10	BD Medical	63019-004
BD INTRAMEDIC 폴리에틸렌 튜빙 / PE 50	BD Medical	63019-048
BD Insyte-N Autoguard / Angiocath	BD Medical	311411
에탄올 (EtOH)	Fisher Scientific	BP2818500
BD 바늘 전용 22 게이지 (G) 1 인치	Becton Dickson
BD 바늘만 27 게이지 (G) 1/2 인치	Becton Dickson	305129
루어 스터브, 22 G X 0.5 인치 / 블런트 니들	Instech	LS22
루어 스텁, 27 G X 0.5 인치 / 블런트 니들	인스텍	LS27
6" 길이 x 2" 너비 x 1" 두께, 알루미늄 산화물 숫돌 / 오일 스톤	Norton	40204034
수술용 윤활제 멸균 정균 Folilpac	Surgilube	281020543
Isoflurane	Fluriso	13985-528-60
SomnoSuite 저유량 마취 시스템	Kent Scientific	SS-01
해부 겸자, 곡선	vwr	82027-392
BD 1ml 주사기	BD 의료	309626
인도 잉크 솔루션., PBS 완충액 0.2%	Alfa Aesar	J61007
8~12주 된 수컷 C57B/6 Mice	Jackson Lab	#000664

205155형