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방법 논문

조직 및 혈액 샘플링 절차의 표준화에 의해 닫힌된 가슴 돼지 심근 경색 모델의 개선

11K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/56856

⸱

2018년 3월 12일

 ,  ,  ,  , 
1Department for Biomedical Research, University of Bern, 2Graduate School for Cellular and Biomedical Sciences, University of Bern, 3Institute of Chemical Sciences and Engineering, Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

이 논문에서

요약

여기 심근 국 소 빈 혈 또는 reperfusion 상해의 병 태 생리학의 이해에 변환 값을 증가 하기 위하여 급성 심근 경색의 설립된 돼지 모델의 샘플링 절차를 표준화 프로토콜 설명 그리고 새로운 약 후보자를 테스트 합니다.

초록

심근 국 소 빈 혈 reperfusion (I / R) 심근 경색 후 괴 면적의 거의 절반에 기여 하는 부상. 날짜 심근을 방지 하거나 감소 승인 된 약은 I / R 상해. 연구와 심근의 병 태 생리 메커니즘의 이해 I / R 상해 성공적인 치료를 개발 하는 필수적 이다. 큰 동물 실험 변환 방법에서 중요 한 단계는. 급성 심근 경색의 돼지 모델 설립 되었고 자신과 다른 사람에 의해 설명. 우리는 더 세부 사항에 미래 실험에 사용 하기 위해 샘플링 기법에 집중 하 여 모델의 가치를 향상 목적. 또한, 우리는 최종 결과의 품질에 영향을 미칠 수 있는 작지만 중요 한 단계를 강조. 심근의 임상 상황을 모방 하기 위해 I / R 상해, 경 피 적인 관상 동맥 내정간섭 (PCI) 카 테 터는 왼쪽된 앞쪽 내림차순 관상 동맥 (젊은이)의 마 취 돼지에 삽입 되었습니다. ° ° °는 괴 사 성 뿐만 아니라이 모델 모방 급성 심근 경색 및 PCI 치료에서 영역을 정확 하 게 결정의 가능성을 가진 인간 위험-가능한 허 혈 성 조직. 여기 모델은 FXIIa의 bicyclic 펩타이드 억제제의 효과 조사 하기 위해 사용 되었다. 모델은 또한 심근 경색의 나중 효과 공부 하 긴 reperfusion 시간 수 있도록 수정할 수 있습니다.

서론

허 혈 성 심장 질환, 특히 급성 심근 경색 (MI), 선진국 1에서 죽음의 주요 원인입니다. 오늘, 미의 표준 치료 경 피 적인 관상 동맥 내정간섭 (PCI), 풍선 카 테 터 치료 이다. 급성 미 PCI 치료 후 환자의 예 후 및 삶의 질에 영향을 미치는 중요 한 요소 중 하나는 경색 크기입니다. 크기의 감소는 환자 생존 및 예 지 2에 큰 영향을 가질 수 있습니다. 심근 국 소 빈 혈 또는 reperfusion (I / R) 부상 그래서 심장 혈관 연구의 주요 목표 중 하나를 방지 하거나 감소 심근 경색 크기에 큰 영향 있다 내가 / R 상해 3. 나의 정확한 메커니즘 / R 상해 조사 4의 밑에 아직도 있다. 플라즈마 폭포와 내 피 세포의 활성화는 나의 / R 상해 5. 응고 체계의 활성화는 명확 하 게 관련 된 6,7입니다. 최근, 응고 캐스케이드의 접촉 단계 활성화에 관여 한 초기 업스트림 펩타이드로 FXII의 역할은 FXII에 표시 되었습니다 나 대뇌의 쥐 모델 노크 / R 부상 8. 돼지 모델에서 이러한 결과의 유효성 검사 임상 번역으로 중요 한 단계는 이다. 따라서, 우리는 테스트 소설 bicyclic (80 kDa protease) FXIIa 억제제 심근의 맥락에서 I / R 상해 파일럿 연구에서.

심각한 MI와 PCI 치료의 임상 상황을 모방, 동물 모델은 우리의 이해의 심근의 이상 난 개선 필수 / R 상해 및 새로운 치료 옵션을 테스트 하기. 돼지에 대 한 좋은 동물 모델 대표 임상 심근 I / R 상해. 이건만 있기 때문에 그들의 마음 매우 해부학 및 관상 동맥 순환, 인간의 마음에 유사 하지만 그들은 또한 유사한 병 태 생리 응답 심근 국 소 빈 혈과 reperfusion 9,10을 보여줍니다. 쥐와 쥐 같은 다른 모델 하지 이러한 기준을 충족 하 고 반면 개 인간 에 비해 많은 더 많은 부수적인 관상 동맥 혈관 등 인간의 마음 11,12를 비교할 때 상당한 차이 보여 13.

돼지 급성 심근 경색 모델 널리 이용 되는 심장 혈관 연구에서 심근 허 혈 성 심장 질환 등 조사 I / R 상해 14,15,,1617. 후자는 sternotomy를 최소화 하는 것 때문에 염증 반응 관련 염증 성 상태 또는 thoracotomy 오픈-가슴 수술에 사용 되는 필수적 이다. 닫힌된 가슴 모델 임상 C 팔 혈관 설정을 사용 하 여이 문제를 극복 한다. 또한, 가장 중요 한 포인트 중 하나는 우리의 프로토콜은 위험, AAR에 허 혈 성 (지역)와 비-허 혈 성 좌 심 실 (위험, ANR에 영역) 영역 간의 정확한 구별 경색 크기 (괴 사 성 허 혈 성 조직, 니트) 수은 정확 하 게 결정 될. 이 문서에 대 한 우리의 목표는 심근는 돼지의 재현 방법론을 명확 하 게 정의 하는 나 / R 부상 모델, 특히 심근 조직 샘플링, I의 분자 메커니즘의 더 정확한 분석에 대 한 수에 관하여 / R 상해와 새로운 약물 치료의 효과의 명확 하 게 그림.

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프로토콜

1입니다. 동물:

모든 동물 스위스 국가 법률의 지침에 따라 치료 했다. 연구는 구획 베른의 로컬 동물 실험 위원회에 의해 승인 되었다 (권한이 없습니다. 25/16 수).

남녀의 큰 흰 돼지를 사용 하 여 (~ 30 ± 5 k g). 두 그룹으로 동물을 맹목적으로 나누어 한 그룹 FXIIa의 bicyclic (80 kDa 효소) 억제제 또는 선택과 다른 비활성 컨트롤의 치료.

2. 수술 (그림 1)

  1. 마 취와 동물의 준비:
    1. 12 h에 대 한 동물 실험을 시작 하기 전에 빠른.
    2. 전 의료를 베 풀 20 mg/kg 케 타 민 및 2 mg/kg Xylazine 10 mL 주사기를 사용 하 여 목에 근육 주사를 통해 동물. 동물의 무게와 섹스를 기록 합니다.
    3. 0.5 mg/kg Midazolam와 0.05 mg/kg Atropin 귀의 정 맥으로 주입 하 여 마 취를 유도. Endotracheal 튜브 동물 넣어야
    4. 기계 환기는 인공 호흡기를 사용 하 여 마 취를 유지 (O2/air 1:3, Sevorane 1.5%), 7-8 m m 기도 튜브와 필터. 6-10 mL/kg를 해 볼륨을 35% 영감된 산소 (FiO2)의 일부를 조정 합니다.
    5. 마 취의 깊이 모터 또는 자율 응답 코 곤란의 부재로 적절 한 평가. 종을 반사 및 턱 톤은 또한 지속적으로 편안한 턱 색조와 종을 반사의 부재를 대상으로 하는 것을 감시 되었다. 코어 온도 지속적으로 모니터링 하 고 수동 온난화 (격리 담요와 따뜻한 병)와 normothermia (38-38.5 ° C)의 유지 보수 보장 했다.
    6. 무료, 이전 설명한 Koudstaal와 그의 동료 1 단계 단계 3-3-318, 양쪽에 경 동맥 해 부 고 7 층 칼 집과 cannulate. 왼쪽된 경 정 맥 정 맥 혈액 샘플링에 대 한 7 층 칼 집과 cannulate
    7. 250 µ g/h는 주입 펌프를 사용 하 여 지속적인 정 맥 주입으로 뒤 중앙 정 맥 라인을 통해 250 µ g 펜타닐 진통제의 큰 알 약 복용량을 관리 합니다. 체온, 심장 박동과 리듬 3 리드 심전도 (ECG), 전체 실험 동안 동맥 및 중앙 정 맥 압력을 모니터링 합니다.
    8. 정 맥 라인에서 다음 기준선 혈액 샘플을 철회 표준 혈액 컬렉션 튜브를 사용 하 여: 5 mL citrated 플라즈마와 각각 튜브에 2.9 mL EDTA 플라스마. 4 ° c.에 15 분 동안 2000 x g에서 즉시 원심 2.9 mL 혈액 혈 청 관으로 고 위에서 설명한 대로 centrifuging 전에 실 온에서 30 분 동안 응고를 허용.
    9. 플라스마 또는 혈 청 500 µ L로 aliquot 200 µ L 튜브 고 추가 분석에 대 한-80 ° C에서 모든 샘플을 저장 합니다.
    10. 특별 한 혈액 가스 분석 (BGA) 주사기 BGA 제조 업체의 지침에 따라 BGA 기계를 사용 하 여 측정을 사용 하 여 간선에서 혈액의 0.5 mL를 철수.
    11. 표준 2 mL 주사기를 사용 하 여 정 맥에서 혈액의 0.5 mL를 철회 하 고 즉시 30g 바늘을 사용 하 여 ACT 카트리지로 전송. 제조업체의 지침에 따라 응고 시간을 측정 행위 기계로 채워진된 카트리지를 삽입 합니다. 시간 포인트 그림 2 를 참조 하십시오.
    12. 2 mL 주사기를 사용 하 여 정 맥 라인으로 5000 IU unfractionated 헤 파 린을 관리 하 고 미 실험을 시작 하기 전에 20 분 동안 안정화 동물 허용.
    13. 2.1.11 듯이 모니터 모든 30-45 분 행동. 법 < 180 s 경우 2500 IU unfractionated 헤 파 린을 정 맥 주사.
  2. 심근 경색 실험
    1. 표준 C 팔 fluoroscopy 장비를 사용 하 여 (관상 동맥 혈관 프로그램, 각도 0 °, 두 번째, ~ 70 초당 12 프레임 kV) 또는 전용된 제품은 시스템 또는 관상 동맥 내정간섭을 수행 하려면.
    2. (5 층, 120 c m) 압력 카 테 터를 삽입 하려면 왼쪽된 경 동맥에 이전 배치 칼 집 통해 fluoroscopic 가이드를 사용 합니다. 좌 심 실에 사전. 왼쪽된 심 실 압력 기록 수집 시스템에 압력 카 테 터를 연결 합니다. 수집 시스템은 지속적으로 계산 하 고 개발 하는 심장 박동을 기록 필요 압력, dP/dt 최대 (좌 심 실 수축)와 dP/dt 최소 (좌 심 실 이완) 전체 실험 기간 동안. 10 분에 대 한 초기 계획 값을 기록 합니다.
    3. 6F (100 cm, EB3.75) 삽입 오른쪽 경 동맥으로 이전 배치 칼 집 통해 인도 카 테 테 르. X 선 지도 왼쪽된 앞쪽 내림차순 관상 동맥 (젊은이) 도달 왼쪽된 관상 동맥에 진출. 유도 카 테 터를 통해 20 mL 주사기를 사용 하 여 초기 관상동맥 혈관을 수행 하는 대조 매체 주입.
      참고: 대조 매체 주입 수동 압력에 의해 수행 됐다 하지만 전용된 파워 인젝터 시스템 뿐만 아니라 사용 될 수 있습니다.
    4. 경 피 적인 관상 동맥 내정간섭 (PCI) 카 테 테 르의 적절 한 크기 선택 x 선 모니터에 젊은이의 크기를 평가 합니다. 15-25 m m 2와 3.5 m m 젊은이 크기에 따라 직경의 길이와 PCI 풍선을 사용 합니다. 조립 PCI 카 테 터와 관상 동맥 guidewire (F 014/J, 175 cm). 대조 매체와 pre-filled 인플레이션 장치와 PCI 카 테 터를 연결 합니다.
      참고: 젊은이 직경은 통치자를 사용 하 여 보정된 모니터에 직접 측정 될 수 있다 고 PCI 풍선의 크기에 따라 선택 다음.
    5. 인도 카 테 테 르의 루멘에 2.2.4에서 조립된 시스템을 삽입 합니다. 젊은이의 두 번째 대각선 지점 넘어 도달할 때까지 젊은이에 있는 guidewire를 사전.
    6. 그것에 대 한 젊은이의 중간에 도달할 때까지 PCI 카 테 터를 fluoroscopic 가이드를 사용 합니다. 일반적으로 좌 심 실 (LV)의 AAR의 유사한 비율이 있기 위하여 첫 번째 대각선 지점 (그림 3) 때로는 후 두 번째 후 coronaries, 해부학에 따라 젊은이 차단 사이트를 선택 합니다.
      참고: 차단 사이트의 대각선의 길이에 따라서 각 분기를 통해 혈액에 의해 제공 되는 조직의 지역 따라 달라 집니다. 오래, 경우 분기 첫 번째 대각선 지점 차단 사이트 직후이 될 것입니다. 짧은 첫 번째 대각선 지점 경우 차단 두 번째 대각선 후 수행 됩니다.
    7. guidewire를 제거 하 고 PCI 카 테 터의 풍선을 부 풀 려 1 h. 점차적으로 증가 FiO2 허 혈의 15 그리고 40 분 사이 50-60%에 대 한 심근 허 혈을 유발 하는 7-10 바 인플레이션 장치에 압력을 증가. 6-10 mL/kg에서 해 볼륨을 유지.
      참고:이 절차 extrasystoles의 발생 하는 심 fibrillations의 주파수를 감소 하십시오.
    8. 기록 장소에 허 혈; 시작 직후 PCI 테의 풍선의 혈관 촬영을 인도 카 테 테 르 통해 대조 매체 주입 하는 동안 5-10 s 비디오 시퀀스 PCI 테의 풍선에 원심 젊은이의 완전 한 폐색을 확인 허 혈의 10 분 후 반복 합니다.
    9. 밀접 하 게 즉시 감지 하 고 치료 (2.2.10) 동물 모니터링 심장 부정맥. Extrasystoles는 일반적으로 발생 하 고 주파수에서 증가 (> 분 당 3) 심근 허 혈의 유도 후 20, 40 분 사이. 이 경우, 부드럽게 바로 뺨 아래 양쪽에 목 마사지. 대부분의 경우에서이 다시 일반적인 경 동맥에 있는 vagal 신경 baroreceptors의 자극에 의해 아마 일반 하트 비트 설정에 충분할 것 이다.
    10. 심장 부정맥 심 동으로 진행을 하는 경우는 외부, 복 형 제 세 동기를 사용 하 여 다시 부 비 동 리듬을 설정 하려면. 5-10 가슴 압축 산소를 혈액은 coronaries 채워 고 다음 150 J (30 kg 동물)에 대 한 충격 충격을 적용 하기 전에 즉시 제 세 동기 패드를 사용 하 여 적용 됩니다.
    11. 필요한 경우 반복 하 고 175 J 3rd 충격 후에 에너지의 증가. 더 무거운 동물에 대 한 높은 에너지 설정을 사용 합니다.
    12. 허 혈 시간 끝나기 전에 5 분 2.1.8-2.1.13에서 언급 한 혈액 샘플링을 반복 합니다. 시험 물질을 주입 (중 bicyclic FXIIa 억제제 또는 제어 4 mg/kg, 이렇게이 맹목적으로) 중앙 정 맥 라인 플러시 라인 20 mL 염 분을 통해 정 맥.
    13. (설명 했 듯이 2.1.8에 2.1.9) 한 플라즈마 시트르산 샘플을 철회 2.2.12에 물질을 주입 후 4 분.
    14. 젊은이 폐색을 확인 다음 PCI 테의 풍선 폐 인도 카 테 테 르에서이 카 테이 터를 제거 하는 혈관 촬영 (2.2.3)을 수행 합니다. 심근 허 혈의 흔적 직전 5 분 이상 한 ECG에 의해 표시 되었다 때마다 디플레이션과 PCI 카 테 터, 10 분 후, 풍선의 제거 후 즉시 폐색 사이트에 원심 젊은이의 관류 혈관 촬영으로 확인 젊은이의 오 하 클 다시 루
    15. 2 시간에 대 한 허 혈 성 심근의 reperfusion 허용. Reperfusion (2.1.8 및 2.1.9)의 10, 30, 60, 115 분 플라스마와 혈 청 샘플을 가져가 라. 60, 115 분 (2.1.10) 모니터 BGA.
    16. 허 혈에 대 한 사용으로 정확 하 게 동일한 위치로 guidewire 함께 PCI 카 테 터를 다시 넣습니다. 앞으로 PCI 카 테 터의 풍선을 부 풀 려 고 젊은이 폐색 혈관 (2.2.3) 촬영 합니다. 좌 심 실에서 압력 카 테 터를 제거 하 고 녹음을 중지.
    17. 주사 100 mL 2% 에반스 블루 인산에 중심 정 맥 라인에 식 염 수 (PBS, pH 7.4) 버퍼링. 약 30 s 후, 전체 동물 블루 때 주사 40 mL 20 %KCl 동물 안락사를. 죽음은 ECG 신호 및 펄스 파의 부재에 의해 확인 되었다.

3. 샘플링 기법

  1. 추출, 해 부 및 심장 (그림 4)
    1. 마음을 노출 sternotomy를 수행 합니다. 앞에서 설명한 Koudstaal 및 동료, 단계 8-2 8-318프로토콜을 따릅니다. 잘라 오픈 심 낭 종양, 이전 pericarditis에서 줄기 수 있습니다 추가 평가에서 동물을 제외 하 고는 검사 하는 동안.
    2. 폐 고 PCI 인도 카 테 테 르 제거. 추가 분석을 위해 심장 삭제하시오 베 나 정 맥을 잘라 고 혈액 흡입 펌프를 사용 하 여 다음 신체와 마음을 연결 하는 모든 큰 배를 잘라 제거 합니다.
    3. 실 온 식 염 수와 심장을 내부와 밖으로 헹 구 십시오. 온 마음을 무게.
    4. 30-40 분 이내 심장의 승 모 판, 날카로운 칼을 사용 하 여 긴 축에 수직인 Chordae tendinae 를 꼭대기에서 약 3-5 mm의 조각으로 잘라.
    5. 항상 복 부 면이 컷된 샘플 (그림 5)의 방향을 유지 하기 위해 동일한 방향에서 마음을 배치에 주의 해야 합니다.
    6. 디지털 싱글 렌즈 리 플렉스 카메라를 사용 하 여 심장의 조각 사진.
    7. 컷 멀리 오른쪽 심 실 (필요 하지 않습니다으로 삭제). 왼쪽된 심 실 조각 사진와 좌 심 실의 총 무게에 대 한 모든 조각 무게.
    8. 에반스 블루 긍정적인 하 고 모든 섹션에 에반스 블루 부정적인 조직 구분. 메스를 사용 하 여 비-허 혈 성 조직 (에반스 블루 긍정적인)에서 허 혈 성 (에반스 블루 부정적인)을 조각 해 부.
    9. 먼저 에반스 블루 부정적인 섹션 (위험, AAR에 허 혈 성 지역) 분석. 그들 모두의 무게와 모든 플라스틱 용기에 넣어.
    10. (심장 크기)에 따라 100-150 mL triphenyl tetrazolium 염화 솔루션 (TTC, 16 g Dextran, 분자량 48000-90000, 200 mL PBS, 갓 준비 2 세대)와 완전히 조각 커버 심장 조각 솔루션 안에 자유롭게 이동할 수 있다 그래야. 컨테이너를 커버 하 고 부드럽게 흔들어 동안 37 ° C에서 20 분 동안 품 어.
    11. 이 분 보육 시간 무게 에반스 블루 동안 긍정적인 조각 (위험, ANR에 지역), 포함 하는 조직-테크에 대 한 샘플을 채취 (부상에서 가장 말 초 부분 선택) 추가 분석을 위해-80 ° C에서 저장. 나머지 4% 포름알데히드 솔루션에 전송 하 고 조직학 단면도 위한 실내 온도에 저장 합니다.
    12. TTC 솔루션에서는 AAR의 조각을 제거 합니다. 빨간 얼룩진된 조직 가능한 허 혈 성 조직 (VIT) 이며 비 얼룩진 조직 괴 사 성 허 혈 성 조직 (니트)는. 2 작은 조각 (2-3 m m의 블록)에서 잘라 두 니트와 VIT, 조직-테크에 그들을 포함 하 고 추가 분석을 위해-80 ° C에서 저장. 이러한 샘플에는 동일한 무게가 있어야 합니다.
    13. 스티로폼 용기에 그들을 고정 하 고 증기 두건에서 실 온에서 24 h에 대 한 4% 포름알데히드 솔루션과 완전히 덮고 하 여 조각 (AAR는에서 파생 된 모든 분할 영역)의 나머지를 해결. 조각 플랫 다음 단계에서 사진 설명서에 대 한 있어야 합니다.
    14. 다음 날 사진 고해상도 카메라는 동일한 확대/축소 설정 및 조직 (동일한 확대)에서 거리와 함께 조각의 양쪽. 모든 사진에 자동 눈금 막대를 추가 합니다. 모든 바 같은 길이 필요 합니다.
      참고: 고해상도 카메라는 자동으로 각 사진에 눈금 막대를 추가 하는 소프트웨어에 연결 되어야 합니다.
  2. AAR 및 경색 크기의 계산
    1. 좌 심 실의 AAR % = (g에서 AAR의 무게 / 무게 g에서 좌 심 실의) * 100.
    2. ImageJ 소프트웨어를 사용 하 여 AAR 니트 (각 조각의 양쪽 모두)는 사진에 따라의 총 면적을 계산.
    3. 각 도구에서 직선을 사용 하 여 눈금 막대 길이 선택 하 여 눈금 막대를 조정 합니다. 분석 메뉴에서 선택 > 설정 규모 알려진된 거리 눈금 막대의 단위를 삽입 하 고. 그래서 같은 규모는 모든 사진에 적용 됩니다 "글로벌"을 선택 하십시오.
    4. AAR 계산 무료 손을 선택 도구를 사용 하 여 조직의 전체 면적을 표시 합니다. 수는 조직 및 지방 조직 (그림 6-C) 측면 (높이)를 포함 하지 않도록 주의 하십시오.
    5. "지역" 및 분석에서 "레이블 표시"를 선택 하 여 측정을 설정 > 설정 측정 메뉴. 분석에서 표면적 측정 > 측정.
    6. 3.2.5 측정 니트 (마크 비 얼룩진 조직) 단계를 반복 합니다. 참고: 알 계산에서 지방 조직 (그림 6-D)를 포함 하지 마십시오. 조직의 다른 쪽에 있는 단계를 반복 합니다.
    7. 평균 AAR 및 니트 직물의 각 조각을 위해 계산 합니다.
    8. 3.2.7에서 가져온 값을 사용 하 여 니트 AAR:% 니트 AAR의 계산 = (Σ 평균 면적 니트의 cm2/ Σ는 cm2AAR의 표면적 평균) * 100.
    9. 두 개의 다른 조사 위의 방법을 반복 해야 합니다. 차이의 허용 한계 < 10%입니다.
  3. 허 혈 마커
    1. EDTA 플라스마 견본, 이전 심장 분의 수준을 측정 하-80 ° C (2.1.9)에 저장 된를 사용 하 여-단일-플렉스 Luminex 형 분석 결과 사용 하 여 이전 설명한 19.

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결과

1 동물 FXIIa 억제제 또는 제어 펩 티 드의 기술적 오류 (시험 물질의 추가 하기 전에 허 혈 시간 동안 혈압의 급강하) 관리 전에 성급 하 게 사망 했다. 한 동물 때문에 국 소 빈 혈 또는 reperfusion 상해 없음 왼쪽된 앞쪽 하강 동맥 (젊은이)의 비정상적인 해부학 때문에 관찰 되었다 FXIIa 억제제 그룹에서 제외 했다. 정점를 포함 하 여 좌 심 실의 큰 부분 이었다이 동물에 곡절 동맥에 의해 끼얹는다. 최종 분석에 포함 하는 동물 들이 n = bicyclic FXIIa 펩 티 드 억제 물 그룹에서 2 (27.5 ±의 무게를 의미 2.5 k g)와 n = 3는 비활성 bicyclic 제어 펩 티 드를 받고 (29 ±의 무게를 의미 0.8 k g).

X 선 영상 이미징/돼지 심장의 관상 동맥 혈관 압력 카 테 터의 위치를 시각화 하 고 젊은이 ...

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토론

심근 I / R 상해는 급성 심근 경색3후 환자의 예 후에 직접 번역 최종 경색 크기에 큰 영향. 심근의 이상 이해 I / R 상해 감소 하거나 그것을 방지 하는 첫 단계입니다. 심근 I / R 상해 폐색된 혈관의 reperfusion 후 직접 발생 하는 심각한 상태입니다. I / R 상해 타고 난 면역 반응의 활성화 고 세포 손상을 reperfusion와 주변 조직20의 사이트에서 발생 합니다. 최근 연구 결과 뇌의 쥐 모델에서 신경 결과에 개선 보여 I / R 상해 FXIIa 억제제8로 치료 하면. 그러나, 현재 파일럿 연구에서 우리가 발견 bicyclic FXIIa 억제제의 영향을 주지 않습니다에 심근 I / R 상해. 사용된 FXIIa 억제제 소설 이며 돼지에서의 약 동학 아직 알려져 있지 않습니다. 따라서, 효과의 관찰된 부족은 부적절 한 주입 또는 응용 프로그램에 의해 원인일 수 있습니다. ...

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공개 사항

저자는 충돌의 관심을 선언합니다.

감사의 글

저자는 FXIIa 억제제 및 해당 제어를 제공 하기 위한 교수 기독교 Heinis를 인정 하 고 싶습니다. 우리는 또한 기꺼이 Olgica Beslac, 박사 다니엘 Mettler 및 실험적인 수술 단위, 생물 의학 연구, 기술 지원에 대 한 베른 대학에 대 한 부서에서에서 케이 Nettelbeck를 인정합니다. 셀 린 느 Guillod와 진단, Interventional 및 소아 방사선과, 베른 대학 병원에 대 한 부서에서 마 티아 스 Rausch Inselspital x 선 장비 및 기술 지원 제공. 이 프로젝트는 스위스 국립 과학 재단, 프로젝트 no. 320030_156193에 의해 투자 되었다. 우리 또한 커뮤니케이션 및 마케팅, 베른 대학 병원, 비디오 녹화 우리의 실험에 대 한 Inselspital에서 씨 Reto Haenni를 감사 하 고 싶습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
ABL 90 Flex, 혈액 가스 분석기복사계-혈액 가스 분석(BGA)
ACT Plus메드트로닉활성화 응고 시간
아트로핀 Sintetica-AtropinumSulfas, 0,5mg/ml
밸런스(20-500 Kg)NAGATA 스케일, TiwanHTB/HTR대체 제품 사용 가능
밸런스(21-4200 g)Mettler toledo, 스위스MS4002SDR대체 제품을 사용할 수
채혈 튜브 : EDTA, 구연산염 및 혈청S-Monovette, Nuembrecht, Germany05.1167.001,
05.1071.001
및
05.1557.001 각각		대체 제품을 사용할 수 있습니다
BV Pulsera mobile C-armPhilips-Alternative제품을 사용할 수 있습니다
CentrifugeLabcare, UKALC PK120R대체 제품을 사용할 수
제세동기 Lifepak 12Medtronic-Alternative제품을 사용할 수 있습니다
Leuconostoc mesenteroidesSigma-Aldrich, GermanyD3759Average M.wt 48000-90000
디지털 일안 리플렉스 카메라Sony, ThailandDSLR-A500/A550대체 제품을 사용할 수 있습니다
해부 겸자대체 제품을 사용할 수 있습니다 EMPIRA
RX PCI 확장 카테터Cordis, Johnson & Johnson, USA85R15300S직경 3mm, 길이 15mm, 대체 제품 사용 가능
EMPIRA RX PCI 확장 카테터Cordis, Johnson& Johnson, USA85R15350S직경 3.5mm, 길이 15mm, 대체 제품 사용 가능
Evans BlueSigma-Aldrich, GermanyE2129Toxic
Fabius GS 프리미엄 호흡기Drä 게르, Lü beck,Germany-Anesthesia work station, 대체 제품 사용 가능
FentanylInselspital2500mcg/50ml
포름알데히드병리학 연구소, 베른 대학교SI148701대체 제품 사용 가능
FXIIa 억제제EPFL의 Christian Heinis 교수 실험실에서 제공Novel bicyclic peptide
, 관상동맥 가이드와이어Biotronik, 독일125497대체 제품을 사용할 수 있습니다
Guidance catheterBoston Scientific, Florida, USA34356-066F (100 cm, EB3.75). 대체 제품을 사용할 수 있습니다
Heparin SodiumDrossapharm, Basel,Switzerland-Liquemin, 25000 U.I./5 ml
고급 전기 수술BOWA, 독일ARC 400혈액 흡입용 전기 소스. 대체 제품을 사용할 수 있습니다
Hydro-Guardmini 호흡 필터Intersurgical, Lithuania1745000필터
이미지 JNational Institute of Health, USA1.47v대체 제품을 사용할 수 있습니다
인플레이션 장치, Atrion QL2530Atrion 의료 제품, 앨라배마, 미국96402대체 제품을 사용할 수 있습니다
IntelliVue MP 70Philips, Boeblingen, 독일-모니터 (ECG, 심박수, 혈액 검사 및 체온). 대체 제품 사용 가능:
KClSintetica SA-염화칼륨 15%
, 케타민베토퀴놀-나르케탄, 1ml/100mg
LR-ACTMedtronic402-01ACT 특수 주사기,
Midazolam, Roche-Dormicum, 5mg/ml
단극 메스대체 제품 사용 가능
바늘 홀더대체 제품을 사용할 수 있습니다
고해상도 카메라, PathStand 매크로 이미징 스탠드 GrossingSpotimaging, 미국1080 p HD 해상도. 대체 제품을 사용할 수 있습니다
PBS사내 준비-대체 제품을 사용할 수 있습니다
말초 정맥 캐뉼라, 18G대체 제품을 사용할 수 있습니다
PowerLab 4/35 데이터 수집 시스템Adinstruments, Spechbach,
Heidolph, Germany544-41200-00Shaker. 대안은
R ü을 사용할 수 있습니다. schelit-Super Safety Clear TubeTeleflex, Dublin, Irland112480Air way tubing, alternative products can use
Safe Pico Aspirator SyringesRadiometer956-622BGA special syringes
SalineSintetica Bioren-NaCl0,9%. 대체 제품을 사용할 수 있습니다
: Sevorane 1.5 %AbbVieAG-Sevorane 250ml 100 %
SheathCordis, Johnson & Johnson, USA504-607 AAVANTI + / 7 F, 대체 제품은
우주 주입 펌프B.Braun Medical AG, Germany-펜타닐 주입을 위해 사용할 수 있습니다. 대체 제품 사용 가능
SPR-350 (Millar catheter)Adinstruments, Texas, USA840-8166MIKRO-TIP, 5F, 120 cm
Sternotomy saw대체 제품 사용 가능
SuturesETHICON, Johnson& 존슨, 미국Y3110HMonocryl 3-0 SH-1 Plus. 대체 제품을 사용할 수 있습니다
주사기 (20, 10 및 5 mL)CODAN, Baar, Switzerland62.7602,
62.6616,
62.5607
각각		근육 내 또는 중심 정맥 라인에 직접 마취 물질을 주입하는 데 사용됩니다. 또한 헤파린 또는 FXIIa 또는 해당 대조군을 주입합니다. 대체 제품을 사용할 수 있습니다.
흉부 스프레더를 사용할 수 있습니다. 대체 제품을 사용할 수 있습니다
Tissue-tekSAKURA, 네덜란드4583O.C.T. 화합물
혈관 집게 대체제품을 사용할 수 있습니다
Xenetix 300 대조 매체Guerbet, Zü 리치, 스위스-로비트리돌, 300mg 요오드화물/ml
자일라진베토퀴놀-자일라판, 20mg/1mL
2,3,5-트리페닐테트라졸륨 코라이드시그마-알드리치, 오스트리아T8877
500 μ L tubes (eppendorf)Trefflab, Switzerland96.08185.9.03대체 제품 사용 가능
있습니다 있습니다 의 Dextran ISPI-Fentanyl Galeo , , , , , , , Germany-Rotamax120T . .

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