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방법 논문

포털-고혈압 증후군 Cirrhotic 쥐에서의 침입 Hemodynamic 특성화

14.7K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/57261

⸱

2018년 8월 1일

 ,  ,  ,  ,  , 

이 논문에서

요약

여기는 등 포털 압력, splanchnic 혈액 흐름, 조직의 hemodynamics 포털 고혈압 증후군 쥐에 성격을 나타내기 위하여 hemodynamic 매개 변수의 침략 적인 측정을 위한 상세한 프로토콜에 설명 합니다.

초록

이것은 침략 hemodynamic 측정 cirrhotic 쥐 포털 고혈압 증후군의 특성을 설명 하는 상세한 프로토콜 이다. 문맥 고혈압 (PHT) 때문에 간 경 변은 간 질환 환자에서 가장 심각한 합병증에 대 한 책임. 포털 고혈압 증후군의 전체 그림 증가 intrahepatic 혈관 저항 (IHVR), hyperdynamic 순환, 및 증가 splanchnic 혈액 흐름 증가 포털 압력 (PP)에 의해 특징입니다. 진보적인 splanchnic 동맥 혈관 확장 그리고 증가 심장 출력 높은 심 박수 (HR) 하지만 낮은 동맥 압력 포털 고혈압 증후군 특징.

새로운 치료는 현재 개발 되 고 PP 감소 하는 목표 중 대상 IHVR에 의해 또는 splanchnic 혈액 흐름을 증가-조직의 hemodynamics에 부작용이 발생할 수 있습니다. 따라서, 정 맥, splanchnic, 포털 및 조직의 hemodynamic 매개 변수의 상세한 특성화에 필요한 PP, 포털 정 맥 혈 (PVBF), mesenteric 동맥 혈, 평균 동맥 압력 (지도), 그리고 HR의 측정을 포함 하 여 전 임상 PHT에 대 한 새로운 치료의 효능 평가. 우리의 비디오 문서 cirrhotic 쥐에서 침략 hemodynamic 측정을 수행 하기 위한 체계적인 프로토콜 리더를 제공 합니다. 특히, 포털 정 맥의 측정 및 대 퇴 동맥 및 ileocolic 정 맥을 통해 포털 정 맥 도관 법 설명 및 splanchnic 혈액 혈관 도플러 초음파 주위 흐름 프로브를 통해 흐름. PHT의 다른 쥐 모델의 대표적인 결과 표시 됩니다.

서론

PHT variceal 출혈과 복수1등 간 경 변 환자에서 심각한 합병증을 일으킬 수 있는 포털 정 맥 시스템에 병리학으로 증가 한 혈압으로 정의 됩니다. 사전 키 모 (예를 들어, 포털 정 맥 혈전 증)와 후 키 모 (예를 들어, 버드-Chiari 증후군) PHT 드물다, 간 경 변 증으로 인해 intrahepatic PHT PHT2의 가장 일반적인 원인을 나타냅니다.

간 경 변 증, PP는 주로 높은 IHVR3의 결과로 증가 했다. 고급 단계에서 PHT 증가 심장 출력 인해 증가 PVBF에 의해 악화 됩니다 및 조직의 splanchnic 혈관 저항 감소-포털 고혈압 증후군4정의. 옴의 법칙 (ΔP = Q * R) IHVR 및 혈액 흐름 PP5비례입니다 의미. 환자에서 PP의 직접 측정은 위험 하 고 정기적으로 수행; 대신, 간 정 맥 압력 기온 변화도 (HVPG) PP6,7을 간접적으로 측정 ....

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프로토콜

여기에 설명 된 모든 메서드는 비엔나의 의학 대학 및 오스트리아 정부 과학, 연구 및 경제 (BMWFW)의 윤리 위원회에 의해 승인 되었습니다. 상황 실에서 무 균 조건에서 수행 또는 이와 유사한 절차 되어야 합니다 hemodynamic 측정 대표 외과 개입 때문에 작업 영역을 청소. 일반적으로, 메 마른 조건에서 일 하는 것이 좋습니다. 흡입 마 취를 사용 하 여 때 작업 안전에 대 한 수술 방의 적절 한 환기를 고려 하십시오. 40-50 분의 시간 기간/동물 모든 hemodynamic 판독이이 프로토콜에는 경우에 고려 되어야 하는.

1. 미리 수술 준비

  1. 켜고 전자 멀티 채널 레코더 제조업체의 지시에 따라 압력 변환기를 포함 하 여 교정.
  2. 초음파 흐름 프로브 (1 mm와 2 mm) 브리지 앰프에 연결 합니다.
  3. 체온, 조직 또는 거 즈 압축 보습에 대 한 37 ° C에가 열 멸 균 생리 식 염 수 솔루션의 저수지를 준비 합니다.
  4. 무게 조정 마 취와의 몸 무게에 따라 hemodynamic 매개 변수를 제공 하는 동물 몸 무게를 기록 합니다.
  5. 흡입 마 취에 대 한 모든 장비를 준비 합니다.
    참고: 흡입 마 취 및 필요한 장비 인 경우 사이트에 또는 가능....

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결과

동물 모델 및 간 질환의 심각도 따라 PHT 정도와 포털 고혈압 증후군의 엄격은 다른 (그림 7).

BDL 모델 cholestasis 인해 담 즙 경 변 증을 발생합니다. 따라서, PP 시간 이상과 hyperdynamic 증가 순환 개발, HR의 증가 감소의 지도 의해 보이는 것과 같이. Cirrhotic 동물, SMABF, PVBF 및 IHVR 또한 증가 concordantly 좋고 hemodynamic 변경 (그림 7A-F)에.

대조적으로, PPVL prehepatic, 비 cirrhot.......

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토론

PP 포털 고혈압 증후군의 평가 대 한 주요 결과 매개 변수 이며 기본 경 변 증의 심각도 반영 합니다. 매트릭스 증 착 (즉, 섬유 증)와 (로 인해 간장 표현의 vasoconstrictors 증가 및 vasodilators 응답을 감소) 정현파 vasoconstriction 증가 IHVR 발생할. PP와 만성 간 질환에 미치는 영향의 중요성은 여러 전 임상11,12,,1314 및 임상 연구15,16, 에 표시 되었습니다. 17 , 18. 따라서 cirrho.......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

우리 우리의 연구 프로젝트 중 수 의사, 간호사, 그리고 동물 계에는 센터의 생물 의학 연구의 지속적인 지원에 대 한 감사합니다. 저자는이 프로토콜의 모든 검토자의 중요 한 입력을 인정합니다. 연구의 일부는 오스트리아 사회 위장 및 간장 학과 (ÖGGH) ps의 "젊은 과학 상"와 "스코다 수상"는 오스트리아 사회의 내과 TR에 의해 투자 되었다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Instruments
LabChart 7 Pro softwareADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -Software
ML870 PowerLab 8/30ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -Electronic multichannel recorder
MLT0380/DADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -압력 변환기(x2: 포털 압력 및 동맥압용)
ML112 쿼드 브리지 증폭기ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -Bridge amplifier
TS420Transonic Systems Inc., Ithaca, NY,USA -유량계 모듈
Biological Research 기구 7025UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italy -Ventilator
Vapor 2000Drä ger 의학 AG & 주식회사 KG, Lü beck, Germany -Isofluran Vaporizer
Perivascular probes (rat) for Transonic systems (superior mesenteric artery)Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA#MA1PRB초음파 유량 프로브 (1mm)
Transonic SystemsInc., Ithaca, NY, USA초음파 유량 프로브 ( 2mm)
1차 & 깨끗한 피부 절개 2차 - -Mayo 가위[x2]
Metzenbaum 가위 - - -
큐티클 가위 - - - - ;-
예: Adson Brown 조직 겸자-nbsp;-조직 집게
고정밀 45° 각도 넓은 포인트 집게 [x2] - - ;-
Hemostat [x4] - -
e.g. Mikulicz 복막 클램프 - -<em>곡선 클램프
예: Dieffenbach 클램프 - -마이크로 클램프
예: 끝이 평평한 마이크로 주걱, 너비 4mm, -nbsp;- -마이크로 금속 주걱
삽관 시 경구강 봉합용 -nbsp;-바늘 홀더
메스 그립> - ;-
selfmade - -삽관 데스크
blut, 유연하고 동맥 캐뉼라 및 venflow에 적합한 직경 - -무딘 강선
수정 동맥선 20G FlowstichBecton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK#682245Arterial line
Heating pad - - -
직장 온도 프로브 ;- -nbsp;-
식염수 히터 - - - -
후두경 (특이적 동물 크기의 경우, 예: 쥐) - - -
흡입 마취용 인덕션 박스 - - -
Scale(mg 측정 가능) - - - -
이발 - - -
Name Company 카탈로그 번호Comments
Consumables
eg. modified BD Venflon Pro Safety 14GABecton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Sweden#393230말초 정맥 카테터(14G)
미세 보어 폴리에틸렌 튜브, ID 0.58mm, OD 0.96mm, Portex,SmithsMedical International Ltd., Kent, UK#800/100/200카테터 튜브(PE-50)
예: Omnifix-F SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany#9161406V주사기 1mL
예: Injekt SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany#4606051VSyringe 5mL
e. Injekt SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany#4606205VSyringe 20mL
e. BD Microlance 3, 18G - 1 1/2"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#304622Cannula (18G)
e. BD Microlance 3, 23G - 1"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#300800Cannula (23G)
e. BD Microlance 3, 30G - 1/2"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#304000Cannula (30G)
e.g. Leukoplast SBSN medical GmbH, Hamburg,  독일#47619-00접착 테이프
예: Gazin RK Mullkompressen (18x8cm)Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria#10972Gauze compress (small)
e.g. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm)Lohmann & Rauscher, 비엔나, 오스트리아#10961거즈 압축 (대)
Silk 꼰 검정, USP 4/0, EP 1.5SMI AG, St. Vith, 벨기에#2021-04Suture (Silk 4/0, EP 1.5)
e.g. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 PrimeJohnson & Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Germany#EH7552Transbuccal suture
e.e. Cottonbuds (2.2mm, 15cm)Paul Hartmann AG, Heidenheim, Germany#967936Cotton buds
e.g. Vue UltrasoundgelOptimum Medical Limited, UK#1157Ultrasound gel
e.g. Glubran 2Gem srl, Viareggio, Italy#G-NB2-50조직 접착제
예: 수술용 메스 칼 Nr. 10 - 탄소강Swann-Morton, England, B.S.#202메스 나이프
헤파린, 5000 i.E./mL (Natriumheparin)Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mü rztal, Austria -Heparin
FloraneAesica Queenborough Ltd., Queenborough, UK -Isoflurane
OeloVital (5g)Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria -Eye gel
KetasolaniMedica GmbH, Senden-Bö sensell, 독일 -Ketamine
>RompunBayer Austria Ges.m.b.H., Vienna, Austria -Xylazine
Xylocain 10% PumpsprayAstraZeneca Ö sterreich GmbH, 오스트리아 비엔나 -리도카인 펌프 스프레이
DipidolorJansen-Cilag Pharma GmbH, 오스트리아 비엔나 -Piritramide
NaCl 0.9% Fresenius, 1LFresenius Kabi Austira GmbH, 오스트리아 그라츠#13LIP132생리식염수
#MA2PSB삽관 &&&&

참고문헌

  1. Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).
  2. Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H.

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