신체 구성 및 높은 지방 연 준 쥐에서 대사 배우면 분석

요약

이 프로토콜 신체 조성 분석기와 신체 구성 및 쥐에서 대사 매개 변수 특성을 대사 동물 모니터링 시스템의 사용을 설명 합니다. 고 지방 먹이로 유도 된 비만 모델은 이러한 기술의 응용 프로그램에 대 한 예제로 사용 됩니다.

초록

신체 구성 (지방 또는 마른 질량)에 변경, 전신 산소 소비, 에너지 소비, 고 기판 사용률, 같은 대사 매개 변수 및 동작 음식 섭취, 신체 활동 등 중요 한 정보를 제공할 수에 대해서 질병의 기본 메커니즘입니다. 신체 구성 및 대사 비만 그 이후의 sequelae의 개발의 중요성을 감안할 때, 그것은 전 임상 연구에서 이러한 매개 변수 중 정확 하 게 측정을 만들 필요가 있다. 지난 몇 십년 동안 기술의 진보는 비-침략 적이 고 경도 방식 설치류 모델에서 이러한 측정을 파생 수 만들었습니다. 따라서,이 대사 측정 입증 된 유용 유전자 조작 (예 녹아웃 또는 유전자 변형 쥐, 바이러스 노크 다운 또는 유전자의 overexpression), 실험적인 약물/화합물 검사 및 식이, 응답을 평가할 때 행동 또는 신체적 활동의 개입 여기, 우리는 신체 구성 및 모니터링 시스템 차 먹이 고 지방 다이어트 먹이 쥐에서 동물을 사용 하 여 신진 대사 매개 변수를 측정 하는 데 사용 하는 프로토콜을 설명 합니다.

서론

물질 대사 정상적인 세포, 기관, 그리고 전체-바디 생리학의 많은 측면을 뒷받침. 따라서, 다양 한 병 리의 설정, 신진 대사를 변경 기본 조건에 직접 기여할 수 있습니다 또는 병 리의 부작용으로 부정적인 영향을 받을 수 있습니다. 전통적으로, 대사 연구와 에너지 균형으로 연구 되어 집중 했다 비만 및 관련 사전 당뇨병, 인슐린 저항 등의 분야에 포도 당 옹 졸, 심혈 관 질환 및 당뇨병. 이 연구는 전세계 조건 및 개인, 사회의 확대 보급을 주어진 보증 하 고 경제적 비용 이러한 조건이. 이와 같이, 예방 전략과 대상 비만에 새로운 치료제의 개발은 세계 각국의 연구 실험실에서 지속적인 목표 및 전 임상 마우스 모델은 이러한 연구에 대 한 무 겁 게 의존.

마우스 무게 체중 증가 또는 손실의 신뢰할 수 있는 평가 제공, 전체 신체 구성 (체 지방 량, 근육 량, 무료 물 뿐 아니라 털과 발톱 같은 다른 구성 요소)을 구성 하는 다양 한 구성 요소 분석을 제공 하지 않습니다. 마우스는 죽은 일단 연구의 완료에 지방 패드의 무게 다른 지방 저장소의 정확한 측정을 제공 하지만 한 번 지점에 대 한 데이터를 제공할 수 있습니다. 결과적으로, 그것은 종종 여러 동료, 동물 숫자가 크게 증가, 시간, 시간과 비용 이상 비만 개발 조사를 등록 하는 데 필....

프로토콜

설명 하는 모든 실험 알프레드 의료 연구 교육 관할 동물 윤리 위원회 (AMREP AEC)에 의해 승인 및 마우스 국민 건강 및 의료 연구 위원회 (NHMRC)에 호주 지침의 인도적인 치료 제공 동물 실험입니다. 동물 들이 그들의 규정된 식이 요법과 물 광고 libitum 관리와 12 h 라이트와 12 h-어두운 주기 온도 제어 환경 (~ 21-22 ° C)에 보관 되어. 7 주 오래 된 남성 마우스 (C57Bl/6J 배경에) 중 일반 정상적인 차 다이어트 지 루 했다 (에너지 콘텐츠 14.3 MJ/kg, 탄수화물, 지방 5%, 19% 단백질;에서 kJ의 76%의 구성 재료의 표 참조) 또는 고 지방 먹이 그룹에 대 한 높은 지방 다이어트 (HFD) ( 에너지 콘텐츠 19 MJ/kg, 탄수화물, 지방 43%, 21%의 단백질, 전문 피드 kJ의 36%로 구성 된) 3 주 동안. 몸 무게 및 신체 조성 측정 EchoMRI 기계를 사용 하 여 되었다 주간 동안 변화 모니터링 분석 다이어트의 3 주 후에 조개에 자리를 했다.

1. 신체 조성 분석기 절차

참고: 최적의 기능을 EchoMRI 4-에서-1이이 프로토콜에 사용 되는 공기 온도 안정 하 고 변동 하....

결과

그림 3 에서 본 결과 EchoMRI를 통해 측정 된 고 지방 먹이 시 신체 구성 매개 변수에서 전형적인 변화를 표시 합니다. 초기에 어떤 매개 변수 측정 (그림 3A-F)에 차이가 없었다. 그러나, 단지 1 주일 후 먹이 높은 지방, 체중, 지방 질량, 및 지방 대량 비율 HFD 그룹 (그림 3A,B,D)에서 크게 증가 했다. 이러한 조치에 대 한 두 그룹 간의 차이의 크기 3 주 식이 개입 증가를 계속 했다. 근육 량, 무료 물, 그리고 총 함량 (그림 3C,E,F) 시간 언제 든 지 그룹 사이 다 하지 않.......

토론

중요 한 단계

여기에 설명 된 프로토콜 신체 조성 분석기 및 대사 동물 모니터링 시스템을 사용 하 여 마우스에 다양 한 대사 매개 변수 및 측정 신체 구성 하는 방법의 예를 제공 합니다. 두 기술에 대 한 그것은 되도록 컴퓨터 최적화, 작업 하는이 위해 연구원 신체 조성 분석기에 대 한 시스템 테스트를 수행 하 고는 대사에 대 한 알려진된 가스 구성에 보정 필수적입니다 매우 중요 하다 장비 사용 하기 동물 모니터링 시스템 전에. 이렇게 하면 결과 및 기계와 잠재적인 문제를 감지 하는 기회의 더 일관성.

데이터 대사 동물 모니터링 실험에 대 한 정규화 방법 또한 기술에서 얻은 결과의 유효성을 보장 하기 극히 중요 하다. VO₂ 는 여러 가지 다른 방법으로 보고 될 수 있는 대표적인 결과 (그림 4A-E

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
4 in 1 시스템	EchoMRI	4 in 1 시스템	전신 조성 분석기
카놀라유 테스트 샘플(비용)	EchoMRI	마우스 전용(고양이 번호 회사에 문의)
동물 표본 홀더	EchoMRI	103-E56100R
구분자	EchoMRI	600-E56100D
12 챔버 시스템	콜럼버스 인스트루먼트	맞춤형	대사 케이지 시스템; 제어 프로그램 포함
Drierite	Fisher Scientific	238988	CLAMS 소모품
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