Method Article

Bioindication 영 민물 진주 홍합에 현장 노출 방법을 사용 하 여에 대 한 스트림 환경 적합성의 테스트

DOI:

10.3791/57446

September 5th, 2018

In This Article

Summary

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

제자리에서 bioindications 위태롭게 한 홍합 종 대는 환경 적합성의 결정을 사용합니다. Oligotrophic 강 서식 지에 장에 민물 진주 홍합의 청소년 노출에 따라 두 가지 방법을 설명 합니다. 두 방법 모두 오픈 워터 및 hyporheic 물 환경에 대 한 변형에 구현 됩니다.

Abstract

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

민물 홍합에 대 한 서식 지 적합성의 지식은이 멸종 그룹의 보존에 중요 한 단계 이다. 우리는 이상의 oligotrophic 강 catchments 내 청소년 노출 테스트 현장에서 수행 하기 위한 프로토콜을 설명 1 개월 및 3 개월 기간. 두 가지 방법 (두 수정)에 청소년 성장 및 생존 율을 평가 하 되 게 됩니다. 마다 그 혜택으로 제한과 방법 및 수정 위치 bioindication에 대 한 가치 다. 모래 케이지 방법은 개인의 큰 세트와 함께 하지만 일부 개인의 측정 그리고 결과 대량에서 평가 됩니다. 메쉬 케이지 방법에서 개인 유지와 별도로, 측정 하지만 낮은 개별 번호 평가. 오픈 워터 노출 수정은 상대적으로 쉽게 적용; 청소년 성장 사이트의 잠재력 및 고도 물 독성 테스트에 대 한 효과적일 수 있습니다. 내 침대 노출 수정 부하가 필요 하지만 자연 청소년 환경 조건에 가깝다 고 지 자체의 현실 적합성을 보고 더 나은. 다른 한편으로, 더 많은 복제의 높은 hyporheic 환경 변화 때문이 수정에 필요 합니다.

Introduction

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

그들의 상태의 후속 평가 함께 현장에서 실험 생물의 노출 종에 대 한 환경 품질 및 사이트 적합성 (특히)에 대 한 정보를 얻으려면 하나의 가능한 방법입니다. 동물, 이내 그런 bioindication는 주로 제한 된 제한 된 공간에서 살 수 있는 작은 무척 추 동물에 대 한 적용 됩니다. Bivalves (이매패류)의 젊은 단계는 한 같은 적당 한 유기 체 그룹1.

가족 Unionidae bivalves 수생 생태계2의 매우 중요 한 구성 요소입니다. 그러나, 이러한 종은 종종 비판적으로 멸종, 스트림 및 강에 특히. 그들 중 일부는 '우산 종'의 보존은 전체 스트림 소 생활권의 보존에 밀접 한 및 포괄적인 접근3필요로로 특징 이다. 이 동물의 홍합 애벌레 호스트6으로 물고기 인구에 있는 변화에 물 화학4,5 에서 많은 환경 구성 요소와 관련 된 라이프 사이클 있다. 홍합 청소년 홍합 라이프 사이클의 중요 한 단계, 수시로 대표 하기 때문에이 단계에서 그들의 개발에 대 한 사이트 적합성은 한 지역에서 성공적인 종 인구 개발에 대 한 중요 합니다.

민물 진주 홍합 (FWPM, Margaritifera margaritifera; Unionida, 이매패류) 비판적으로 멸종 위기에 놓인 쌍 각 조개 oligotrophic 유럽 스트림에서 발생 이다. 그들의 숫자는 20 동안 크게 추락발생 지역에서 세기 . 그것은 그 중앙 유럽 인구의 대다수에 종 복제에 현재 감소는 주로 기인한 매우 낮은 그들의 생활의 처음 몇 년 동안 청소년의 0 생존에 보인다. 그것은 가정 청소년 FWPMs는 얕은 hyporheic 영역7의 조건과 그들의 다양성은 여전히 하지 잘 설명 여러 해 동안 살. 또한, 생활의 그들의 2 학년까지는 청소년만가지고 약 1 m m의 치수 그래서 그들은 매우 자연 조건8에서 앙금의 큰 볼륨에서 찾기 어렵다. 따라서, 실험 포로 청소년은 그들의 생태학의 연구 필요 합니다.

체코 액션 플랜 민물 진주 홍합9, 내 청소년의 수천이 있다 반 자연 번 식 프로그램에서 매년 마다 일어나는. 그럼에도 불구 하 고, 거기에는 지역 및 서식 지는 이러한 청소년에 의해 성공적인 인구 지원 또는 최종 종 재 소개에 대 한 적합 한 질문이 이다. Bioindications 현장에서 답을 찾는 방법을 제시.

노출 장에 청소년 홍합의 일관성 없는 생존 율 bioindicators10청소년 홍합의 적합성을 의심 하는 일부 이전 작품에서 관찰 되었다 사실에도 불구 하 고 여러 최근 연구 결과 확인은 수 질 테스트11,,1213청소년 노출 방법의 응용 성. 또한, 그것은 여러 가지 요인 재고 기원14 및 애벌레 조건15의 지속 효과 등이 특정 연구의 결과 해석할 때 고려해 야 할 입증 되었습니다.

질문 시험된 지역에 있는 실험적인 청소년을 설치 하는 방법과 가장 효과적으로 그들의 상태를 평가 하는 방법의 발생. 청소년 FWPMs 노출 방법 현장에서 의 첫 번째 엄격한 응용 프로그램 Buddensiek16에 의해 출판 되었다. 청소년 FWPM 개인 스트림, 무료 흐르는 물에 노출 시트 장에 보관 했다 그리고 그들의 생존 및 성장 노출의 몇 주 후 계량 했다. 접근 반 인공 번 식 방법으로 원래 개발 되었다 하지만 저자는 또한 서식 지 요구 사항 및 수 질 평가 대 한 그것의 적용을 강조 했다. FWPM 청소년 생존은 자연스럽 게 매우 개월/년, 동물의 단지 아주 작은 수의 규모에 낮은 생존, 생존 율 몇 주16의 규모에 환경 영향의 좋은 표시 될 수 있습니다. 연구의 년간 노출 방법 개발 보류 실험 청소년 홍합에 스트림 서식 지 더 고 평가 하는 그들의 성장 및 생존 율; 모래 상자17, 홍합 사일로 upwelling 원리18및 다양 한 다른 노출 (껌과 동료에 의해 요약) 감 금 소11에 따라 포함 됩니다. 청소년 얕은 hyporheic 영역7에서 자연스럽 게 발생, 때문에 스트림 하단 내 실험 장치의 응용 프로그램 매우 바람직합니다.

우리의 문서에서 설명 하는 FWPMs에 대 한 두 개의 노출 장치를 사용 하 여: 나) Buddensiek 시트 감 금 소 ("메쉬 케이지") bioindication hyporheal 조건;에서 테스트 설정 수정 그리고 ii) Hruška 모래 상자 ("모래 케이지"). 오픈 물과 hyporheic 조건에서 두 가지 방법의 응용 프로그램 프로토콜에 설명 합니다 (, 노출의 4 개의 이체 설명). 방법은 점차적으로 수정 및 민물 진주 홍합9 체코 행동 계획 내에서 응용 프로그램의 15 년 이상에 걸쳐 확장 되었고 실험의 세트에 의해 확인.

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Protocol

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. 메쉬 케이지

참고: 그림 1을 참조 하십시오.

  1. 자료 준비
    1. 실험의 실험실에 부분에 대 한 자료 준비: 강 ~ 1-2 L 물 당 메쉬 케이지, 메쉬 케이지 (플라스틱 본체 1, 2 플라스틱 커버, 2 장의 340 µ m, 4 볼트 공과 감 금 소 당 4 견과류와 함께 특별 한 기술 체), 펜 치 스 패너, 파스퇴르 펫, 스 트레이너, 디지털 카메라, 줌 스테레오 현미경, 보정 표 (현미경 장비), 50 mm 직경, 비 커, 2 플라스틱 접시 5 접시를 해 부 trinocular (~ 25 cm x 15 cm x 3-5 cm), 및 플라스틱 상자.
    2. Hyporheal 설치를 수행 하려면 고무 호스와 100 µ m 기 공 망, 그리고 물 총 병을 준비 합니다. 장치의 건설, 보조 파일 1 참조: S.1. 메쉬 케이지 건설.
  2. 아래와 메시 감 금 소의 중앙 부분을 조립. 개인 보유 감 금 소의 부분을 조립 한다. 한 장의 플라스틱 체, 그리고 마지막으로 메인 상단에 몸 한 플라스틱 덮개를 먼저 삽입 합니다. 4 개의 볼트를 사용 하 여 그것을 확보.
  3. 생물 학적 자료를 준비
    1. 메쉬 케이지 강 물을 포함 하는 플라스틱 그릇에 넣어. 약 실 전체의 절반 인지 확인 합니다. FWPM 청소년 걸릴 ( 보조 파일 1 참조: S.6. 생물 소재) 열 절연 상자 밖으로 하 고 페 트리 접시에 넣어.
      주: 갑작스런 온도 변화 ~ 2 ° c.를 초과 하지 않는 확인 하십시오
    2. 물 총 병 및 여과기 using, 청소년 암 설을 통해 선별.
  4. 현미경 및 카메라 설정 합니다. 계기의 캘리브레이션을 수행 (참조 보충 File1: S. 5. 현미경 및 phototechnics)입니다. 현미경 아래에서 약간 물을 포함 하는 페 트리 접시를 놓습니다.
  5. 감 금 소 (실험적인 실험실 작업)에 청소년을 넣어
    1. 파스퇴르 피 펫을 사용 하 여 배양 접시에서 한 개인을 제거 하 고 신중 하 게 현미경 페 트리 접시에 그것을 배치.
    2. 접 안 렌즈 (~ 40 배 확대)로 봐서 개인의 적합성을 확인 합니다.
      참고: "좋은" 피트 니스 의미는 개별 이동, 회전 측면에서 셸, 발 제거 죽 었 거 나 낮은 피트 니스는 파스퇴르와 개인 플라스틱 및 별도 페 트리 접시 (FWPM와는 열린 청소년에에서 배치 하는 민 다 셸, 운동, 발은 하지 꺼내, 조각난된 쉘, 물에 떠 있는 듯이 청소년, 쉘, 부분 decalcification의 보이는 분해).
    3. FWPM의 2 개의 사진을 보여주는 좋은 피트 니스 ~ 80 X의 지속적인 확대를 사용 하 여 개별 가져가 라. 참조 보조 파일 1: S.5. 현미경 및 phototechnics. 사진을 저장 합니다.
      참고: length의 좋은 측정을 위해 청소년 해야 합니다 놓일 세로로 (측면 보기). 주요 목표는 나중 사진을 분석을 가능 하 게 충분히 좋은 최대 포탄 길이의 높은-품질의 사진을 걸릴 것입니다.
    4. 최대한 빨리 사진을 찍은 소년 장에 적절 한 챔버에 삽입 합니다. 사진과 챔버의 번호를 기록 합니다.
    5. 메쉬 케이지에서 사용된 모든 챔버에 대 한 각 개인으로이 단계를 반복 합니다.
      : 참고 보조 파일 1: S.1. 메쉬 케이지 건설.
    6. 일단 모든 사용된 챔버 진주 홍합, 플라스틱 체 케이지, 다음 부드럽게 플라스틱 커버 넣어 넣고 견과류 함께 모든 부품을 확보.
    7. Hyporheic 영역에는 설치의 경우 통과 호스 끝의 하나 하나는 챔버의이 위치에서 수정 다음 반대로 막힘 메쉬과 하단 끝에 바인딩 ( 보조 파일 1 참조: S.1. 메쉬 케이지 건설).
  6. 스토어 청소년
    1. 그는 청소년 완전히 몰입 하는 thermobox에 그것을 계속 케이지 강 물, 플라스틱 상자에 넣어. 설치 하기 전에 제자리에서 강 물 온도에 설치 (점진적 냉각, 최대 24 시간에 5 ° C) 곳에 적응 청소년 하자.
  7. 메쉬 케이지 설치
    1. 청소년, 강철 스파이크, 볼트와 금속 너트, 스 패너, 메시 케이지를 포함 한 필드 자료 준비, 온도 습도 필드 ( 테이블의 자료보조 파일 1 참조: S.4.2. 측정 물), 문자열, 카메라, 필드 프로토콜 망치, 그리고 스페이드.
    2. 안정적인 수 온 변화 < ~ 2 ° c를 유지 FWPM 청소년 필드 thermobox (절연된 상자)에서 사이트에 전송 메쉬 케이지와 thermobox를 로컬 환경 조건 (pH, 전도도, )에 적응 청소년 수 있도록 사이트에 강에 넣습니다.
    3. 메쉬 케이지를 설치 합니다.
      1. 필드 thermobox에서 메시 케이지를 제거 합니다. 2 개의 강철 스파이크와 그것을 제공 하 고 고정 필드 데이터로 거. 연구 영역 (예를 들어, 메인 스트림 흐름 하지 직접적인 햇빛에 있는 서 있는 물에 직접 물 흐름에의 가장자리에)에 FWPMs에 대 한 일반적인 조건 서식 지로 케이지를 앵커.
        1. 오픈 워터, 강철 스파이크의 쌍을 사용 하 여 수정 강 아래쪽에 케이지 강 바닥의 측면과 수준에 누워 강 흐름의 강의 중심을 향해 45 °의 각도에서 다운스트림. 아래쪽 가로 가장자리 강 하단 표면 위에서 약 10-15 cm 이어야 한다. 한 지역에서 각 감 금 소 사이 2 m의 최소 거리를 유지 (참조 보조 파일 1: S.4. 유지 보수 연습장).
        2. Hyporheic 영역에 대 한 감 금 소의 위쪽 가로 가장자리 강 하단 표면에 평행 하 게가 고 약 실에 위치 하는 hyporheic, 물의 흐름에 수직인 수직 가로 위치에 강 바닥으로 새 장을 발굴합니다 깊이 테스트 해야 합니다. 실험 기간 동안 물 샘플링의 가능성에 대 한 아래쪽 표면 위에 고무 호스의 위쪽 끝에 밖으로 (참조 보조 파일 1: S.4.2. 측정 물).
          참고: 것이 좋습니다 감 금 소에 정기적인 검사 및 유지 관리를 수행 하기 위해 (참조 보조 파일 1: 미 4. 유지 보수 연습장).
  8. 감 금 소를 제거 하 고는 노출 후에 청소년을 수송. 이 위해, 물 감 금 소를 당겨 하 고 떠내려 물자로 정밀한 앙금 뿐만의 그들을 취소 한 강 물으로 채워진 필드 thermobox에 넣어. 실험실에 즉시 새 장을 전송 하 고 사망률과 성장 속도 평가 시작 합니다.
    : 참고 보조 파일 1: S.3. 노출 기간. 감 금 소 및 실험실 환경 사이 이상 5 ° C의 온도 차이, 경우 온도 균일화를 첫 번째 필요한입니다.
  9. 각 청소년의 생활/피트 니스를 선택 하 여 실험을 평가 (1.5.2와 1.5.3 단계 참조)와 페 트리 접시 ~ 80 X의 지속적인 확대를 사용 하 여 각 라이브 청소년의 2 이미지를 받아. 체력과 사진과 챔버의 번호를 기록 합니다.
  10. (모든 방법에 공통) 실험을 완료
    1. 이미지 분석 소프트웨어에서 측정을 수행 합니다. 이미지 분석 소프트웨어를 사용 하 여 모두 입력된 이미지 (단계 1.5.3)에 고 출력 이미지 (단계 1.9)에 모든 평가 청소년의 신체 크기 결정에 대 한. 최대 총 포탄 길이 사용 하 여 입력 및 출력에서 본문 크기 값으로 두 사진에 기록.
    2. 테이블 프로세서에 측정 된 값을 삽입 하 고 계산 하는 증가분 (%) 각 살아남기 위한 청소년.
    3. 메쉬 케이지에서 모든 실험 개인에 게 살아남은 개인의 수의 비율을 사용 하 여 메쉬 케이지 당 생존 율 (%)를 예상.
      참고: 실험 후 반환 생존자 사육 프로그램을
      (참조 보조 파일 1: S.6. 생물 소재).

2. 샌 디 케이지

참고: 그림 2를 참조 하십시오.

  1. 자료 준비
    1. 실험의 실험실에 부분에 대 한 자료 준비: 2 접시 (직경 ~8.5 cm), 파스퇴르 펫, 스 트레이너, 25 L 강 물, 플라스틱 상자, 체 (메쉬 크기 1 및 2 m m), 큰 플라스틱 상자 (25 L), 모래 케이지 (참조 보조 파일 1 : S.2입니다. 샌 디 연습장 건설), 디지털 카메라, 줌 스테레오 현미경, 보정 표 (현미경 장비), 해 부 trinocular 정렬 연구 영역에서 강 모래 (단계 2.1.3 참조) 및 프로토콜. 참조 자료의 테이블보조 파일 1: 미 2. 샌 디 연습장 건설.
    2. 격리 프로세스에 대 한 자료 준비: 둥근 용기 (각 케이지 플러스 1 여분의 1), 2 접시 (직경 ~ 14 cm), 파스퇴르 피 펫, 돋보기 안경, 그리고 강 물 1 L.
    3. 2 mm 체 강 모래를 가려낼 다음 1 mm 체 입자 크기의 1-2 m m.을 통해 모래를 건조 하 고 필요한 때까지 건조 형태로 저장.
  2. 가지고 있는 청소년 ( 보조 파일 1 참조: S.6. 생물 소재)는 thermobox의 고 페 트리 접시에 넣어. 물 총 병 및 여과기 using, 청소년 암 설을 통해 선별.
  3. 현미경 및 카메라 설정 (참조 보조 파일 1: S.5. 현미경 및 phototechnics)입니다.
  4. 감 금 소 (실험적인 실험실 작업)에 청소년을 넣어
    1. 플라스틱 상자에 모래 케이지를 놓습니다. 정렬 된 모래를 흩어 (참조 단계 2.1.3) 모래 장의 높이의 1 / 3에. 상자에 물을 부 어. 모래 표면 물 수준 아래 약 10 m m 인지 확인 합니다. 강 물 25 L 상자에 모래 케이지를 삽입 하 고 청소년 FWPMs로 동일한 온도에 노출 (참조 보조 파일 1: S.6.2. 생물학 물자의 저장) 12 헤 햇빛에 모래의 어떤 노출 하지.
    2. 페 트리 접시 준비 FWPM 청소년 가져가 라.
    3. 접 안 렌즈에 보고 하 여 개인의 체력을 확인 (단계 1.5.2 참조).
    4. 사진 문서를 다음과 같이 수행 합니다. 모든 개인 발견의 한 사진의 찍을 (단계 1.5.3 참조) 가장 큰 개인의 10을 선택 하십시오. 또는, 대량 평가 대 한 낮은 배율 (~ 40 X) 함께 모든 청소년의 사진을 찍을 하 고 10 가장 큰 개인을 선택 합니다. 모든 사진을 저장 하 고 그들의 숫자를 기록 합니다.
    5. 물 총 병을 사용 하 여, 준비 된 모래으로 FWPM 청소년 이동 합니다.
  5. 스토어 청소년
    1. 케이지 완전히 포장 되어 강 물으로 큰 플라스틱 상자에 감 금 소를 넣어 고은 thermobox에 그것을 유지. 현장에서 강 물 온도 (점진적 냉각, 최대 24 h를 위한 5 ° C)을 설치 하기 전에 적응 청소년 하자.
  6. 모래 케이지 설치
    1. 필드 설치에 대 한 자료 준비: 모래 감 금 소, 25 L 필드 thermobox, 평평한 돌 (최소한의 무게 1 k g), 그물 (메쉬 크기 10 x 10 m m), 물 총 병, 필드 온도 습도 (참조 테이블의 재료보충 파일 1: S.4.2. 물 측정), 삽, 그리고 필드 프로토콜.
    2. 안정적인 물 온도 (~ 2 ° C 변화) 유지 필드 thermobox에 있는 사이트에 청소년와 함께 감 금 소를 전송 합니다. FWPM 청소년 지역 환경 조건 (pH, 전도도, )에 적응 하도록 필드 사이트에서 강에 모래 연습장과 필드 thermobox를 넣어.
    3. FWPMs (예를 들어, 메인 스트림 흐름은 meander에서, 직접 물 흐름에, 서 있는 물에서 아닙니다, 직접적인 햇빛에의 가장자리에)에 대 한 일반적인 조건 서식 지로 모래 케이지를 설치 합니다.
      1. 오픈 워터에 대 한 그물을 사용 하 여 평평한 돌으로 모래 케이지를 고정 하 고 강 하단에 배치 합니다. 감 금 소의 넓은 쪽 흐름으로 45 °의 각도 형성 확인 하십시오.
      2. 케이지 덮개는 강 하단 표면 수준 Hyporheal에 대 한 물 흐름에 수직인 강바닥에 감 금 소를 발굴.
        참고: 것이 좋습니다 감 금 소에 정기적인 검사 및 유지 관리를 수행 하기 위해 (참조 보조 파일 1: 미 4. 1. 검사 사이트).
  7. 감 금 소 및 전송 청소년 노출 후 제거
    : 참고 보조 파일 1: S.3. 노출 기간.
    1. 물 감 금 소를 당겨, 떠내려 물자의 그들을 취소 하 고 강 물으로 채워진 필드 thermobox에 넣어.
    2. 실험실에 연습장을 수송 하 고 사망률과 성장 속도 평가 시작 합니다.
      참고: 경우 온도 차이가 5 ℃ 이상 장과 실험실 환경, 그것은 온도 맞춰야 하 게 하는 데 필요한.
  8. 모래에서 별도 FWPM 청소년
    1. 준비 물 깊이 50 mm의 둥근 용기 (각 케이지 별도로)와 1 개의 여분 라운드 컨테이너. 케이지에서 둥근 용기에 모래를 전송. 소용돌이 치는 모션을 사용 하 여 별도 용기에 더 가벼운 입자를 밖으로 세척.
    2. 점차적으로이 컨테이너에서 내용을 샘플링 하 고 단계별 파스퇴르 피 펫 및 돋보기를 사용 하 여 청소년에 대 한 검색. 파스퇴르 피 펫을 사용 하 여 페 트리 접시에는 청소년을 넣어. 첫 번째 부정적인 발견 후 마지막 소년 발견 되었습니다 때까지이 단계 및 다음 다른 10 배를 반복 합니다. 각 세척 단계 후 깨끗 한 강물 모래와 원래 컨테이너에 추가 합니다.
      참고: 특히 씻은 후에 첫번째 밖으로, 제대로 내용을 검사할 및 정밀한 앙금 등 다른 층 밸러스트의 그것을 청소.
  9. 실험 평가
    1. 각 소년의 적합성을 확인 (단계 2.4.3 1.5.2 참조) 생존자의 수를 계산 하 고.
    2. 사진의 찍을 (단계 2.4.4 참조) 각 개인의 개별적, 즉은 각 개인의 더 명확한 정체성. 또는, 대량 사진을 찍어 하 고 최종 결과에서 10 최고의 성장된 개인의 하위 집합을 선택 합니다.
      참고: 두 가능성 비슷한 보고 가치가 있다. 가능성 1 최고의 사진 배율, 따라서 또한 더 중대 한 정확도의 혜택 뿐만 아니라 높은 작업의 한계는 있다.
  10. 실험 완료
    1. 이미지 분석 소프트웨어에서 측정을 수행 합니다. 다음 예외와 메쉬 케이지 (단계 1.10 참조)에서 실험 완료: 각 소년의 성장 율 (%)를 평가 하지 않습니다 하지만 모래 케이지 실험에서 전체 그룹을 평가.
      참고: 실험 후 생존자에 반환 되어야 번 식 프로그램
      ( 보조 파일 S.6.1을 참조 하십시오. Se생물 소재의 lection).

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Results

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

4 bioindication 방법 (오픈 워터 모래 연습장, 내 침대 모래 감 금 소, 물 메쉬 케이지, 열고 내 침대 메쉬 케이지) FWPMs에는 위 블타바 강 유역 (보헤미안 숲, 체코에 대 한 환경 조건 적합성 조사에 적용 공화국)입니다. 이 강 중앙 유럽19내 한 FWPM 잔여 위치를 나타냅니다. 여기, 우리는 특별히 선택 된 4 가지 방법 중 가장 중요 한 측면을 설명 하는 결과 집합을 제시. 자세한 내용은 몬테네그로 외 에 의해 포괄적인 연구에 설명 되어 있습니다. 13.

강 환경 두 가지 수준에서 공부 했다.

(I) 경도 강 프로필 메인 스트림...

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Discussion

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노출 시간:

심지어 1 개월 노출 메쉬 케이지 표시 보이는 성장 지역 (그림 3), 그래서 그들은 지역 특성화의 신속 하 고 쉽게 검색을 위한 매우 유용 간의 차이 반영. 그럼에도 불구 하 고, 결과의 관련성 조건, 흔들 리 다 수의 단기 상태에 따라 달라 집니다. 특히, 짧은 강우량 이벤트 역할을 재생할 수 있습니다. 반면, 예측할 수 없는 에피소드 오염 수 있습니다 항상 기록 되지. 지역 V (그림 4A), 물 화학 분석 강한 염화 증가13의 단파를 감지. 이 아마 3 개월 노출 모래 장에 사망률에 대 한 책임은 하지만 30 일 노출된 메시 감 금 소에는 영향을 미치지 않았다.

온도 변동 단기 노출 결과 또한 영향을 미칠 수 있습니다. 메쉬 케이지 노출 시 1 개월 평균 온도 (

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Disclosures

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 공개 없다.

Acknowledgements

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

마이클 Bílý와 Ondřej P. 사이먼 보조금에서 체코 대학의 생명 과학 [내부 부여 기관의 학부 환경 과학, CULS 프라하 (42110 1312 3175 (20164236))]에 의해 지원 되었다. 카렐 Douda에 대 한 지원 체코 과학 재단 (13-05872S)에서 왔다. 민물 진주 홍합의 정부에 의해 투자는 체코 공화국의 자연 보존 기관에 의해 관리에 대 한 체코 행동 계획의 구현 동안 bioindication 및 진주 홍합의 현재 발생에 대 한 데이터 수집에 체코 공화국에서 사용할 수

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
<강>생물학적 재료 유지 및 관리
민물 진주 홍합 어린FWPM 사육 프로그램의모든NA
플라스틱 상자모든NA
thermoboxMERCI212,070,600,030많은 가능성이 있습니다. 이것은 한 가지 예일 뿐입니다.
필드 써모박스(ca25 l)모든NA콜드 박스(절연 상자), 식품 운송에 일반적으로 사용
강물모든NA
페트리 접시NA
플라스틱 파스퇴르 피펫, 풍선 전구(스포이드)), 모든NA구멍 직경 1mm
과산화수소모든NA
플라스틱 용기(ca 50 l) 강물의 경우모든NA
플라스틱 차 여과기
< 강> 메쉬 케이지 건설< / 강>
주요 플라스틱 몸체NA
plactic 덮개모든NA
특수 기술 체 340 및 마이크로; m실크 & 진보UHELON 20 T
특수 기술 체 100 µ m실크 & Progress UHELON 67 M
고무 호스(직경 5.5mm)모든NA
스틸 볼트,NA
스틸 너트,NA
스패너모든NA
스틸 스파이크NA
플라이어NA
비커
플라스틱 접시 (ca. 25x15x3-5cm)모든NA
분출 병모든NA
필드 프로토콜모든NA
문구류모든NA
플라스틱 용기모든NA
스트링모든NA
망치모든NA
sandy 케이지 구조 및 사용 < / strong>
sieve 1 mm모든NA
체 2 mm모든NA
특수 기술 체 340 µ m실크 & ProgressUHELON 20 T
플라스틱 상자, 꼭 맞는 뚜껑,모든NA
핫멜트 접착제모든NA
플라스틱 상자(약 250 x 150 x 100cm),
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References

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