Method Article

Clostridium Perfringens 독성 연구를 마 취 특정 병원 체 무료 닭에 합자 장 루프 모델

DOI:

10.3791/57523

October 11th, 2018

In This Article

Summary

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여기 치킨 소장에서 '장 합자 루프'를 수술로 만들려고 프로토콜 선물이. 이 절차는 여러 Clostridium perfringens 긴장의 독성에서 제자리에 단일 호스트에서의 비교에 대 한 수 있습니다. 이 메서드는 현저 하 게 일반적으로 비슷한 vivo에서 실험에 필요한 닭의 수 감소.

Abstract

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괴 사 성 장 염은 다양 한 비보에 감염 모델을 사용 하 여 닭에 공부 했다. 대부분의 gavage 또는 Clostridium perfringens를 사용 하 여 피드를 통해 관리 predisposing 요소, coccidiosis, 다이어트, 등의 조합을 사용 합니다. 이러한 모델에서 독성 연구에 대 한 여러 C. perfringens 긴장의 비교는 많은 중요 한 결과 얻기 위해 호스트 필요 합니다. 연구의 과정에서 사망률 따라서 연구에서 동물 복지에 관한 윤리적 우려를 제기 하는 실험 모델에 따라 높은 수 있습니다. 적은 동물 공부 병 인, 아직 제공 하 고 통계적으로 중요 하 고 유효한 결과 요구 하는 새로운 감염 모델의 개발 연구에서 동물 사용 감소에 중요 하다. 쥐, 토끼, 송아지 등 다양 한 종에서 clostridial 감염 공부 하 장 합자 루프 모델 사용 되었습니다. 합자 루프 세그먼트를 만드는 수술 절차에 따라 C. perfringens 긴장 박테리아와 장 점 막 사이의 긴밀 한 접촉을 설정 하는 루프에 직접 주입 됩니다. 소장 및 luminal 내용을 샘플 몇 시간 후 절차의 종료에 찍힌다. 여러 세균성 긴장 따라서 실험에서 필수 과목의 수를 줄이고 각 동물에 주사 될 수 있습니다. 또한, 절차는 동물 통증을 줄이기 위해 전신 마 취 아래 수행 됩니다. 닭,이 모델을, 때문에 적은 동물 필요 없음 predisposing 요소, 질병을 유발 하는 데 필요한 통증 진통제에 의해 제어 됩니다 C. perfringens 스트레인 pathogenicity 비교할 구강 관리 보다 더 적절 한 것 . 장 합자 루프 모델은 닭에 제대로 설명 하 고 표준화의 최적의 사용을 위해 필수적 이다. 이 원고는 닭에 수많은 장 합자 루프를 만드는 데 필요한 모든 단계를 제공 하 고 유효한 결과 얻기 위해 중요 한 포인트에 대 한 정보를 제공.

Introduction

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인간과 동물에 영향을 미치는 전염병 연구 동물 모델의 사용 규제 정교를 방지 하거나 질병1치료 전략으로 특정 조건 또한의 병 독성 요인 평가에서 중앙 도구입니다. 동물 모델을 사용 하 여 다양 한 질병 연구의 수많은 장점에도 불구 하 고이 연습에 대하여 윤리적인 관심사는 발생 하는. 연구팀은 중요 하 고 유효한 결과 가져오는 동안 동물 사용을 최소화 해야 합니다. 3 Rs 원칙 (대체, 감소 및 수정)의 개념은 복지 문제 같은 재판에서 해결 했다 보장 하기 위해 정교 했다. 닭 괴 사 성 장 염 연구, 치킨 모델 vivo에서 병 인, 예방, 및이 조건2,3,,45의 치료를 조사 하는 데 사용 됩니다. C. perfringens 들고 NetB 독 소6, 등 특정 독성 요인의 병원 성 긴장 닭7에서 괴 사 성 장 염을 일으킬 관리 됩니다. 교체 원리가 이다, 따라서, 이러한 독성 요인으로 중요 한 다른 동물 종....

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Protocol

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라이브 동물 사용과 모든 절차의 학부의 수의학, 대학교 드 몬트리올 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 (CÉUA, '위원회 회의 d' éthique 드 데 동물 ').

1입니다. 수술 전 고려 사항

  1. 10 주 오래 된 수술에 대 한 특정 병원 체 자유롭게 (SPF) 레그 닭을 선택 합니다.
    참고: 자신의 체중 1.0과 1.2 k g 사이 여야 합니다.
  2. 피드를 빈 창 자 절차 이전 12 h를 철회 한다.
  3. 수술 전에 전신 마 취에 의해 확인 하는 프로토콜을 다음에서 닭을 놓습니다. Premedicate 각 치킨 midazolam의 근육 주사 (IM)으로 수술 하기 전에 15 분 1 mg/kg 및 butorphanol 4 mg/kg. 반복, 모든 4 h butorphanol 주사 4 mg/kg IM 또는 호흡 패턴 변화와 주파수 마 취 동안 증가 하는 경우. 전신 마 취에 대 한 모든 절차 동안, 1.5와 intratracheal 튜브 2.5% 농도에서 isoflurane를 관리 합니다.
    참고: 진정 및 진통에 대 한 premedication의 사용으로 그들은 것입니다 크게 마 취의 깊이 향상, 필요한 모든 절차 동안, 마 취약의 수량을 줄일 뿐 아니라 통증 수준을 제어 하는 연구원을 가....

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Results

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9 장 루프와 8 interloops의 회로도 그림 1에 표시 됩니다. 이 모델에서는 총 9 루프와 8 interloops 간단한 합자 함께 만들어집니다. 2cm 근 합자에서 측정에 의해 인접 하 고 원심 합자 루프에 의하여 이루어져 있다. 두 개의 인접 한 루프는 1 cm의 interloop으로 구분 됩니다. 루프는 합자에서 누설에 의해 사이 상호 오염을의 가능한 위험을 감소, interloop 합자 원심 합자를 2 인접 루프의 인접 합자 중간 방식으로 배치 됩니다. 연구의 요구 사항에 따라 루프의 수를 조정할 수 있습니다.

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그림 1: 합자 장 루.......

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Discussion

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Clostridium perfringens Clostridium 남과 어울리지 않 는, 등 다양 한 장 병원 체로 인 한 질병의 병 인 호스트 병원 체 상호 작용을 공부 하 고 수많은 종에 창 자 루프 모델 설명 되었습니다. 살 모 넬 라 enterica7,,913,,1415. 그것은 또한 점 막 면역 응답16, 장 병원 체11 배설 세균성 독 소를 중화 하 고10 장 질병을 방지 하기 위해 백신 후보자를 평가 하는 항 체의 효능을 분석 하 사용 되었다 . 그러나, .......

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Disclosures

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저자는 공개 없다.

Acknowledgements

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이 작품 대학교 드 몬트리올의 수의학의 학부에서 가금류 연구 (M. Boulianne)에 자에 의해 지원 되었다. 박사 Boulianne 및 부모 모델 개발. 박사 Boulianne 및 부모는 수술을 수행. 박사 화상 마 취 프로토콜을 개발에 도움. 박사 부모 비디오를 편집 하 고 원고를 썼다. Drs 번즈, 원고를 편집 하는 Desrochers 및 Boulianne.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
EZ-Scrub 747Becton Dickinson and Company4% 클로르헥시딘 글루코네이트 세제 함침 멸균 브러시. 사용 가능한 카탈로그 번호가 없습니다. 웹 주소: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes 
이소프로필 알코올 70% USP 4 L상업용 이소프로필 알코올P016IP70웹 주소: http://www.comalc.com/products/
ChlorexidineSigma-Aldrich282227-1G클로르헥시딘 글루코네이트 용액은 4%로 희석해야 합니다. 웹 주소: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr®ion=CA&gclid=EAIaIQ
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수술용 드레이프 스몰 (27 인치 x 24 인치) with 3 x 6 inch 창호수의학 전문 제품32724웹 주소: http://www.vetspecialtyproducts.com/index.cfm?fuseaction=ecommercecatalog.
detail&productgroup_id=15
메스 블레이드 #3Swann-Morton301웹 주소: https://www.swann-morton.com/product/16.php
멸균 식염수 NaCl 0.9%Sigma-AldrichS8776-100ML웹 주소: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s8776?lang=fr®ion=CA
Vicryl 3-0EthiconD9003Polyglactin 다중 필라멘트 흡수성 봉합사 재료. 웹 주소: http://www.ethicon.com/healthcare-professionals/products/wound-closure/absorbable-sutures/coated-vicryl-polyglactin-910-suture
주사기 1ml(26G 바늘포함) Becton Dickinson and Company329652웹 주소: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/diabetes-care/insulin-syringes/bd-1-ml-conventional-insulin-syringes
Brain Heart InfusionSigma-Aldrich1104930500웹 주소: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/mm/110493?lang=fr®ion=CA&cm_sp=Insite-_-prodRecCold_xorders-_-prodRecCold2-1
Eppendorf tubeSigma-AldrichT9661-500EA마이크로 원심분리기 튜브. 웹 주소 : http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t9661?lang=fr®ion=CA&gclid=EAIaIQ
obChMI-YizzfiY1wIVRkCGCh
30SQjuEAAYAiAAEgLK5fD_BwE
포르말린 용액, 완충 중성, 10 %시그마 - 알드리치HT501128-4L비율 조직 : 1의 포르말린 : 적절한 고정을위한 10. 웹 주소: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr®ion=CA
Clostridium perfringens strainsUniversité de Montré al, Chaire en recherche avicoleN/A각 실험실에 특화되어 있으며, 해당 저자에게 요청 시 제공됩니다
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References

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Vitale, A., Chiarotti, F., Alleva, E. The use of animal models in disease research. Rare diseases and orphan drugs. 2 (1), 1-4 (2015).
  2. Uzal, F. A., et al. Animal models to study the pathogenesis of human and animal Clostridium perfringens in....

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