초파리 melanogaster 회전 운동 정량화 시스템 (REQS)를 사용 하 여 운동 수준 측정

요약

회전 운동 정량화 시스템 (REQS) 초파리 melanogaster 동물에 의해 수행 활동의 금액을 동시에 측정 하는 동안 회전 운동을 유도할 수 있다. 여기, 선물이 회전 운동 치료는 REQS.를 사용 하 여 발생 하는 동물의 활동 수준을 측정 하는 방법을 자세히 설명 하 여 포인트 프로토콜

초록

초파리 melanogaster 운동 생물학에서 연구에 대 한 새로운 모델 생물 이다. 날짜 하려면, 두 개의 주요 운동 시스템, 전력 타워와는 Treadwheel 설명 되었습니다. 그러나, 운동 치료를 통해 유도 추가 동물 활동의 양을 측정 하는 방법 부족 되었습니다. 회전 운동 정량화 시스템 (REQS) 동물 발생 하는 회전 운동에 대 한 동물 활동의 측정을 제공이 필요를 채웁니다. 이 프로토콜은 REQS을 사용 하 여 회전 운동을 하는 동안 동물 활동을 평가 하는 방법을 자세히 설명 하 고 생성 될 수 있는 데이터의 종류를 보여 줍니다. 여기, 우리는 REQS를 사용 하 여 유도 된 운동 활동에 섹스 및 스트레인 특정 차이 측정 하는 방법을 보여 줍니다. REQS 운동 유도 활동에 나이, 다이어트, 또는 인구 크기와 같은 다른 다양 한 실험적인 매개 변수의 영향을 평가 하기 위해 사용할 수 있습니다. 또한, 그것은 다른 운동 훈련 프로토콜의 효능 비교에 사용할 수 있습니다. 중요 한 것은, 그것 사이 긴장, 필요한 경우 그룹 사이 활동의 동일한 금액을 달성 하기 위해 연구원을 수 있도록 운동 치료를 표준화할 수 있는 기회를 제공 합니다. 따라서,는 REQS 운동 생물학 초파리 모델 시스템 작업에 대 한 주목할 만한 새로운 리소스 이며 기존 운동 시스템을 보완 한다.

서론

최근에, 연구원은 초파리 melanogaster 과일 파리를 사용 하 여 운동 생물학을 공부 하기 시작 했습니다. D. melanogaster 100 년^1,2유전자 모델 시스템 되었습니다. 그러나, 초파리 연구가 했다 공헌을 뿐 아니라 유전학 뿐만 아니라 생물학, 행동 생물학, 생리학³등 다른 분야의 다양 한. 2009 년 전력 타워 초파리에 대 한 첫 번째 운동 기계 설명된⁴했다. 전력 타워는 동물 들의 부정적인 geotaxis 응답 합니다. 방해, 초파리 그들의 케이스의 상단으로 이동 하는 경향이. 이 응답 잘 설립 하 고 등반 능력 및 체력 초파리에서 추정 하는 데 사용 되는 인기 있는 "반지" (급속 한 반복 부정적인 Geotaxis⁵) 분석 결과의 기초 이다. 전력 타워는 몇 인치에 의해 반복적으로 그들의 인클로저 내에서 동물의 집합을 리프트 모터 장치에 연결 된 지상에 다시 놓는 기계 팔 부정적인 geotaxis 응답 (Tinkerhess 외. 2012⁶ 유도를....

프로토콜

REQS 초파리 활동 모니터 단위 구성 됩니다 (소스 정보를 참조 하십시오 테이블의 자료) 모터 장치 (그림 1)에 의해 제어 되는 회전 팔에 장착. 활동 모니터 해 부 분석 결과 튜브의 중간 레이저 광선의 배열을 방해 주어진된 시간 범위에서 빈도 결정 합니다. 상세한 도면과 깊이 있는 특성에 대 한 우리의 이전 게시⁹를 참조 하십시오. 동안 우리의 시스템에서 LAM25H 단위를 사용 하는 REQS 뿐만 아니라 다른 초파리 활동 모니터 단위에 맞게 수정할 수 있습니다.

1. 테스트는 REQS의 설치

1. 부하 테스트 CO₂ 또는 처리, 빈 관으로 이동 하 고 튜브를 상한에 대 한 다른 선택된 방법으로 동물을 마비 유리 표본 튜브로 파리.
2. 활동 모니터 단위의 슬롯에 출장된 유리 표본 튜브를 삽입 합니다. 고무 오 링 (17-18 게이지)을 사용 하 여 튜브 확보 및 튜브를 보장 하기 위해 장치의 양쪽에 고무 밴드를 회전 하는 동안 이동 하지 않습니다.
   1. 하나의 링 견본 튜브에 슬립 하 고 튜브의 중간점 근처 링 위치. 앞에서 작업 모니터의 슬롯에 표본 튜브를....

결과

REQS와 개별 실행에서 출력 (예제 참조 추가 파일 1)에 대 한 기본적으로 "Monitor1.txt" 표시 됩니다 DAMSystem308 소프트웨어에 의해 생성 하는 데이터 테이블입니다. 같은 테이블에서 발췌는 표 1에 표시 됩니다. 각 열 행 실험 (맨 위)의 시작 부분에서 끝 (아래) 각 시간 간격을 측정 하는 활동을 포함 하는 동안 데이터는 개별 분석 결과 튜브를 포함 합니다. 에 있는 경우 케이블을 조정 해야 합니다 (예: 그에서 본된 표 2), 데이터의 단편은 처음 세 개의 데이터 요소를 모니터링 해야 합니다.

그림 2 는 4 가지 유전자 초파리 라인 (¹³

토론

대표 결과 제시는 REQS 초파리 운동 활동을 정확 하 게 측정 가능 하다. REQS 유연한 이며 운동 생물학 또는 운동 중재와 관련 된 연구 질문의 다양 한 연구자를 수 있습니다. 강조 하기 위해 프로토콜에서 두 가지 중요 한 단계가 있습니다. 첫째, 테스트는 DAMSystem308에는 REQS에서 데이터 전송이 제대로 작동 하는지 확인을 REQS의 설정이 필수적 이다. 아니라면 제대로 설정, 데이터 케이블 수 될 엃 혀 있었습니다, 회전 하는 동안 그리고 때때로 REQS와 DAMSystem308는 연결 중단 마모로 인해 회전 연결에서 (비록는 REQS의 거의 매일 사용, 우리는 했다 대체 커넥터 2 년에 한 번). 그것은 교체 부품을 손에서 계속 하입니다. 둘째, 환경 매개 변수의 일관성은 실험의 성공에 필수적입니다. 초파리는 소음 또는 진동에 아주 과민 하 고 따라서, 실험 데이터 수집 하는 동안 방해 하지 중요 하다. 따라서, 이상적으로, 실험 실험 실행 하는 동안 액세스 하지 전용된 인큐베이터에서 실행 됩니다. 이러한 .......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
초파리 활동 모니터	Trikinetics	LAM25H	REQS 구성 요소
전화 코드 디탱글러	Uvital	uv20170719	REQS 구성 요소
바이알 마개 (플루그)	Genesee Scientific	49-102	초파리 배양 용품
바이알	Genesee Scientific	32-120	초파리 배양 용품
파리 배양 그물 캐	롤라이나 생물학 공급	173090	초파리 배양 용품
옥수수 가루	펩시코	43375	초파리 매체
당밀	골든 배럴	BLA-GAL	초파리 매체
한천	Apex Bioresearch	66-103	초파리 배지
비활성 건조 효모	Genesee Scientific	62-106	초파리 매체
Tegosept	Apex Bioresearch	20-258	초파리 매체
프로피온산	Genesee Scientific	20-271	초파리 매체