방법 논문

Acellular과 세포 폐 종양 전이 연구 모델

7K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/58145

⸱

2018년 8월 19일

 , 
1Department of Surgery, Houston Methodist Hospital Research Institute, 2Division of Thoracic Surgery, Department of Surgery, Weill Cornell Medical College, Houston Methodist Hospital

이 논문에서

요약

여기, 선물이 비보 전 폐 암 모델을 모방한 종양 진행의 단계 및 기본 종양을 격리 하는 데 도움이 프로토콜 순환 종양 세포, 및 전이성 병 변.

초록

종양 진행의 다른 지점에서 종양 세포를 분리 하는 것이 어렵습니다. 우리는 비보 전 폐 모델 자연 매트릭스와 종양 세포의 상호 작용 및 영양분의 지속적인 흐름이 보여줄 수 있는 뿐만 아니라 정상적인 세포 구성 성분으로 종양 세포의 상호 작용 및 자연 매트릭스 모델을 만들었습니다. Acellular 비보 전 폐 모델 쥐 심장-폐 블록 분리 및 decellularization 프로세스를 사용 하 여 모든 셀을 제거 하 여 만들어집니다. 오른쪽 주 기관지에서 연결 하 고 종양 세포를 주사기에 의해 기관에 배치 됩니다. 셀을 이동 하 고 왼쪽된 폐. 폐 폐 동맥 폐쇄 회로에 미디어의 지속적인 흐름을 받는 생물에 배치 됩니다. 왼쪽된 폐에 성장 하는 종양은 1 차 종양. 순환 미디어에 격리 되어 종양 세포는 종양 세포를 순환 하 고 오른쪽 폐에 종양 세포는 전이성 병 변. 세포질 비보 전 폐 모델 decellularization 과정을 건너뛰는 의해 만들어집니다. 각 모델은 다른 연구 질문에 대답을 사용할 수 있습니다.

서론

암 전이 대부분 암 관련 된 죽음 뒤에 범인 하 고 암을 싸우는 노력에 궁극적인 도전 포즈. 이 방법의 전반적인 목표는 3 차원 (3 차원) 세포 성장 뿐만 아니라 흐름의 차원 4 차원 (4d) 세포 문화 프로토콜을 디자인 하는 것입니다. 그것은 전이 과정 [즉, 주 종양, 순환 종양 세포 (CTCs), 및 전이성 병 변]의 세 가지 단계를 나타냅니다.

지난 3 년간 전세계의 과학자 들은 다른 암 치료 또는 진행 없는 생존의 가능성을 향상에 전이성 진행을 기본 메커니즘을 이해 하는 정보 비교할 수 없는 풍부한 나왔고. 일부 암, 유방암, 등의 임상 관리 개선 크게1; 그러나, 폐 암 등 일부 암에는 여전히 가난한 생존2있다. 생체 외에서 그리고 vivo에서 동물 모델에 새로운 통찰력을 질병의 발전을 지탱 하는 메커니즘을 생성 되었습니다. 지난 몇 년 동안, 셀 라인 파생 xenografts (CDX) 및 환자 파생 xenografts (PDX)의 더 많은 관심으로 그들이 조직학 특징, 행동 기본 인간 종양3, 성장 속도 등 많은 관련 기능을 유지 되었습니다. 특성, 그리고 치료에 대 한 응답입니다. 그러나, 각 모델에는 CTC 형성 및 전이를 먼 기관4,,56의 메커니즘을 이해 하는 제한이 있습니다.

최근, 우리 기관 재설계 및 관류 기반 세포 배양의 개념을 이용 하 여 4 차원 비보 전 폐 암 모델 개발. 비슷한 인간 암 분 비와 함께 시간이 지남에 성장 perfusable 종양 작은 혹을 형성 하 여 인간의 폐 암 성장을 모방 단백질 생산7. 그것은 암 환자에서 가난한 생존 예측 나타나고 또한 치료 응답 cisplatin 치료8,9시 종양 회귀에 의해 유전자 표현 서명을 나타냅니다. 그것은 전이성 병 변 형성할 수 있도록 폐 모델 수정 추가 했습니다. CTCs는 맥 관 구조에 기본 종양과 intravasate에서 개발 하 고 전이성 병 변10를 contralateral 폐로 extravasate. 유전자 표현 연구 기본 종양, CTCs, 전이성 병 변의 독특한 식 프로필 형10에 필요한 유전자의 부분 집합의 upregulation를 하시기 바랍니다. 이 전이 과정 생물 학적 조건 암 환자에서의 존재로 인해 발생 합니다. 이 모델의 장점은 자연 매트릭스 및 건축의 존재와 종양 작은 혹의 형성에 이르게 하는 양분의 살포. 또한, 그것은 또한 시간이 지남에 종양 진행에 종양 microenvironment 또는 약의 다른 성분의 효과 공부 하는 기회를 제공 합니다. 이 모델은 실험실 설정에서 암 세포 (폐암, 유방암, 육 종 등)의 범위를 성장 사용할 수 있습니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

동물 실험에 대 한 프로토콜 기관 동물 관리 및 사용 위원회 휴스턴 감리교 연구소에 의해 승인 하 고 모든 규정, 법령, 지침 및 정책에 따라 수행 했다.

1. 쥐 폐 수확

  1. 케 타 민 (100mg/kg) 및 xylazine (10 mg/kg)의 측면에서의 복 (IP) 주입에 의해 4에 6-1 주일-오래 된 남성 Sprague-Dawley 쥐를 anesthetize. 뒷 다리 발가락 집게로 슬쩍 때 움직임의 부재를 확인 하 여 마 취를 확인 합니다.
  2. 10 분 후 가슴 및 복 부를 면도 하 고 액체 면봉으로 피부를 닦아냅니다.
  3. 집게와을 따기로 일회용 메스와 incising에 의해 피부를 제거 합니다. 메스와 incising에 의해 흉 강을 연 후가 위로 왼쪽 흉 곽의 앞쪽 측 및 횡 경 막의 오른쪽을 절단 하 여 양자 thoracotomy를 수행 합니다.
    참고: 이것은 비 생존 수술입니다.
  4. 흉 곽을 잡고 고 27 G 바늘을 사용 하 여 뛰는 심장의 우 심 실에 헤 파 린 (1000 단위/mL)의 2 개 mL를 주입.
    참고:이 폐에 혈전의 어떤 형성이 되지 것입니다.
  5. 완전히가 위 흉 곽을 제거 하 고 혈액이 밖으로 나오는 때까지 환기, 좌 심 실에서 18 G 바늘 장소. 그런 다음, 25g 바늘을 사용 하 여 우 심 실에 heparinized 인산 염 버퍼 염 분 (12.5 단위/mL; heparinized PBS)의 15 mL를 주사.
  6. 열 등 하 고 우량한 베 나 카바, 심장의 오른쪽에 두 개의 큰 혈관 고 heparinized PBS 27g 바늘을 사용 하 여 우 심 실에서의 추가 10 mL와 폐를 플러시.
    참고: 열 등 한 베 나 정 맥의 큰 그릇으로 마음의 바닥에서 시각 이다 붉은 혈액으로 가득. 마찬가지로, 뛰어난 베 나 정 맥은 큰 그릇으로 심장의 위쪽 부분에 시각.
  7. 갑 상선에 기도 잘라. 조심 스럽게 제거 hemiazygos 정 맥 및 아치에 대동맥의 분 지의 수준에서 하강 대동맥.
  8. 흉 강 쥐 시체의 나머지 부분에서 심장-폐 블록을 가져가 라.
  9. 오른쪽과 왼쪽 심의 절반 절단 하 여 수행 하는 ventriculotomy 고 주문 품 prefilled 18 G-스테인리스 바늘 정 우 심 실을 통해 주요 폐 동맥 (PA) 합니다.
  10. 2-0 실크 넥타이 정을 보호 하 고 신중 하 게 노출 우 심 실 및 심 방.
  11. 좌 심 실에 여성 Luer 칸막이 배치 하 고 2-0 실크 넥타이와 그것을 확보.
  12. PA 정 통해 heparinized PBS의 20 mL와 심장-폐 블록을 플러시 하 고 문화 미디어 또는 heparinized PBS 포함 50 mL 튜브에.
    참고: 휴대 전화 모델에 대 한 단계는 생물 반응 기를 설정 하는 3.1로 이동 합니다. Acellular 모델는 decellularization에 대 한 2.1 단계로 진행 합니다.

2. 폐 Decellularization

  1. Decellularization 단위의 준비
    1. 병 뚜껑에 두 개의 구멍을 관통 하 고 여성 루어 (그림 1A 및 1B) 구멍에 스냅 하 여 각 decellularization 챔버/병을 준비 합니다. 다른 쪽에 검은 나일론 반지와 보안. 마찬가지로, 정 맥 설정된 첨부 파일 (그림 1C)에 대 한 또 다른 병 뚜껑에 단일 구멍을 드릴 합니다.
      참고: 그림 1A 및 1B 의 두 가지 측면에서 동일한 병 뚜껑 있습니다. 그림 1C 단계 2.1.1에서에서 위에서 말한 바와 같이 단일 구멍 다른 모자입니다.
    2. (그림 1A 및 1B) 병 뚜껑 내부에서 여성 루어를 0.5 인치 튜브 (에 폐 동맥 또는 PA 끝) 및 6 인치 튜브 (그림 1J)를 연결 하 고 연결 끝에 남성 Luer 잠금. Decellularization 챔버/병 500 mL 병으로 잠금을 설정 합니다.
    3. 여성 루어와 카트리지 (그림 1G)에 의해 펌프 헤드 (그림 1E , 1F)에 붙어 있는 펌프 튜브 (그림 1 H)의 어느 끝에 (남성 Luer 잠금 연결 되)는 두 개의 2 피트 튜브의 한쪽 끝을 연결 잠금 (그림 1I) 합니다.
    4. 2 피트 튜브 (2.1.3 단계)에서 각 decellularization 챔버/병 뚜껑 (그림 1 L)에 여성 Luer 자물쇠 머리의 다른 끝을 연결 합니다.
    5. 250 mL 설정 heparinized PBS (PBS의 200 mL)와 함께 병 병 뚜껑 및 decellularization c에 연결 된 2 피트 튜브 교체 선단부에 삽입 정 맥 세트 (그림 1D)의 근 위 끝으로 스탠드에 거꾸로 병 거 여 hamber/병 PA 끝 (그림 1B). 난 병이 2 피트 튜브를 연결 합니다.
      참고: 병 설정 됩니다 마분지에 그림 1과 같이. 정 맥 관 폐 비 계에 시 약을 분배 하 거 병 온다.
  2. 폐 decellularization 프로세스
    1. Decellularization 챔버/병에서 자유롭게 흐름 때까지 30 mm Hg (그림 1 K)의 생리 관류 압력 heparinized PBS를 실행 하 고, 다음, 파 정을 통해 PA 끝에 심장-폐 블록을 연결.
    2. Decellularization 챔버/병 안에 어떤 초과 버퍼/솔루션 삭제 되 면 펌프를 지속적으로, 실행을 유지.
    3. 통해 초기 세척 (그림 1 K)에 대 한 30 mm Hg의 관류 압력에 15 분 동안 PA heparinized PBS를 실행 합니다.
    4. 0.1% 나트륨 라우릴 황산 염 (SDS)에 이온된 수와 heparinized PBS 병을 장착 하 고 perfuse는 decellularization에 대 한 2 시간에 대 한 폐.
    5. Decellularization, 후 15 분 동안 폐 비 계를 통해 이온된 압력가 수 perfuse.
    6. 그런 다음, perfuse 이온된 수 10 분에 1% 비 이온 세제.
    7. Decellularization 챔버/병 걸려 폐 병 내부 캡으로 그대로 유지 압력가 PBS 1 x 항생제 (페니실린 스 암포), 보충의 500 mL 바꿉니다.
    8. 정 맥, decellularization 챔버의 폐 동맥 끝에 다시 버린 컨테이너에 연결 된 2 피트 튜브를 넣어 놓고 6 mL/min (그림 1 L)에서 펌프를 실행을 삭제 합니다.
    9. 72 h에 대 한 폐를 perfuse 하 고 항생제 마다 12 h와 PBS를 변경 유지.
      참고: acellular 폐는 즉시 사용할 준비가. 그것은 필요할 때까지-80 ˚C에 저장할 수 있습니다. 분홍색 반점 또는 혈액 혈전 폐 엽에 명확 하 게 구상 될 수 있다, 만약 폐기 폐. 그것은 무작위로 DNA 또는 histopathology 테스트 수 있습니다. 완전 한 acellular 폐 세포와 DNA의 99.9%는 떨어져 세척 될 것입니다 표시 되지 않습니다.
      참고: 세포 폐 모델로 작업 하는 경우는 decellularization를 건너뜁니다. 수확된 폐 (1 단계)는 생물 반응 기에서 직접 설정할 수 있습니다.

3. 생물 설정

  1. 생물 병 및 설정에 필요한 항목을 준비 합니다.
    1. 동등한 거리에 한 500 mL 병 뚜껑에 3 개의 구멍을 드릴 및 검은 나일론 고리 (그림 2A 와 2B)를 사용 하 여 모든 3 개의 구멍에서 여성 루어를 수정.
      참고: 두 개의 구멍에 Luer 잠금 종료 얼굴 외부, 한쪽 병의 내부를 직면 하는 동안.
    2. 생물 당 펌프 튜브에 6, 관에서 2, 6, 1.5 피트 튜브, 2 피트 튜브와 10 피트 oxygenator 튜브를 잘라.
    3. 18 G-스테인리스 바늘 잘라내어, 다시, tracheal 정에 대 한 생체 튜브 끝 연결.
    4. 오토 클레이 브 테이프 (그림 2C)를 사용 하 여 솔레노이드 철 망에 끝에 Luer 잠금 커넥터 oxygenator 튜브를 바꿈.
    5. 위에서 언급 한 오토 클레이 브 및 계속 그들에 UV 빛 10 분.
  2. 500 mL 병에 쉽게 맞게 트레이 사이의 적절 한 간격이 일반 셀 문화 인큐베이터 (37 ° C, 5% CO2) 내부 펌프를 설정 합니다.
  3. 펌프 카트리지에 70% 에탄올을 스프레이 하 고 펌프 튜브 펌프에 양쪽 끝에 여성 Luer 잠금 커넥터와 연결.
  4. 펌프 튜브와는 생물에서 1.5 피트 튜브와 다른 쪽 끝에는 oxygenator의 한쪽 (유출)를 연결 하 여 솔레노이드 와이어 메쉬 셀 문화 인큐베이터 안에 감싸 oxygenator를 설정 합니다.
  5. 무 균 조건 캐비닛에 biosafety 생물 병을 설정 합니다.
    1. 하나는 아빠를 통해 흐름을 제어 하 여 손잡이의 머리에 3 방향 자 지 (노란색)를 첨부
    2. 기도 (그림 2F) 통해 시드 셀에 대 한 또 다른 여성 Luer 잠금 칸막이를 단방향 자 지 (파란색)를 연결 합니다.
    3. 2 외부에 튜브에서를 연결 (흰색)와 6 개 미디어 순환 병의 내부에 튜브. 2 피트 튜브를 남성 Luer 잠금 적합 하 고 여성 Luer 러 그 스타일을 추가 하거나 아무것도 제거 액세스를 제공 하는 티를 연결 합니다.
    4. 3 방향 커넥터 (여성 Luer 러 그 스타일 티)의 구멍 중 하나를 단방향 자 지를 연결 합니다.
    5. 남성 Luer 잠금 및 여성 Luer 잠금 2 피트 튜브에 연결 합니다.
    6. 10 %FBS 1% 항생제 세포 배양 매체 (셀 요구 사항에 따라 다름)와 RPMI1640의 200 mL를 추가 하 고 인큐베이터에는 생물을 전송. (단방향 자 지와 티 커넥터) 폐쇄 루프 생물 수 있도록 두 개의 열린 끝에 oxygenator 튜브를 연결 합니다.
  6. 사전 실행 펌프 oxygenator와 튜브를 채우기 셀 문화 미디어와 셀 문화 인큐베이터 안에 6 mL/min에서 아무 공기 방울 튜브에 존재.
  7. 튜브 미디어 채워진다, 일단은 자 지 닫고는 oxygenators 생물 병의 양쪽 끝에서 분리 하 여 인큐베이터에서 생물 병을 제거 합니다.
  8. biosafety 캐비닛 생물 병을 넣어, 자 지를 통해 문화 미디어를 통과 하 고 남성 Luer 커넥터를 통해 자 지를 폐 비 계 (acellular 또는 세포)의 PA 정을 연결.
    참고: 여기 그것은 (decellularization 과정 다음) acellular 모델 또는 갓 수확된 심장-폐 블록을 사용 하 여 (즉, 휴대 전화 모델, 그것은 네이티브 쥐 세포 유지).
  9. 어떤 공기를 제거 하 여 기도에 실크 스레드 tracheal 정 넥타이 단방향 자 지 통해 문화 미디어를 전달 합니다.
  10. PA와 기관지의 모든 왜곡을 피하기 위해 있는지 확인 합니다. 가까운 폐와 생물 병 뚜껑 내부 발판, 다시, aseptically 인큐베이터에는 생물 반응 기를 전송 하 고 6 mL/min 속도로 펌프를 시작.
  11. 실행 되도록 10-15 분에 대 한 문화 미디어 모든 돌출부 비정상적 얻을 하 고 폐 (그림 2G) 좋은 형태로 보인다.

4. 전이 모델 및 셀 시드

참고: 기본 종양 성장 연구에 대 한 위의 폐 모델 시드 셀로 이동 합니다. 다음과 같이 전이성 모델에 대 한 폐 비 계 (acellular 또는 세포)를 수정 합니다.

  1. 인큐베이터에서 폐 비와 함께 생물을 꺼내와 캐비닛는 biosafety에 넣어.
  2. 기도 통해 문화 미디어의 5 mL을 통과 하 고 교수형으로 생물 뚜껑을 열고를 Luer 잠금 주사기를 사용 하 여 폐 비 계 (그림 2F).
  3. 이 단계에서 더 많은 사람이 폐의 전이성 모델 수정에 도움이 필요 합니다.
  4. 실크 2-0 준비 하 고 각도 집게 분기 지점에서 기도 통해 패스를 사용 하 여 얻을.
  5. 분기 지점에서 오른쪽 폐에가 하는 기도 고 문화 미디어를 전달 하 여 왼쪽된 폐에 기관지를 통해 미디어의 자유로운 흐름을 확인 하십시오.
    참고: 기관 분기 지점에 연결 되 면 기도 통해 시드 셀 자동으로 이동 됩니다 왼쪽된 돌출부에 씨. 그것은 기도 통해 추진 문화 미디어에 의해 셀을 뿌리기 전에 테스트할 수 있습니다. 전이성 모델에서 미디어는 팽창 것입니다 왼쪽된 엽만, 및 오른쪽 엽10을 이동 합니다.
  6. 20 mL Luer 잠금 주사기 tracheal 정 위에 설정 하 고 RPMI1640 완전 한 문화 미디어 (그림 2F) 50 mL에 ATCC 폐암 세포 (A549, H1299)를 추가 합니다.
  7. 셀 biosafety 캐비닛에 시드를 수행 합니다. 셀의 15 mL 주사기에 추가 하 고 중력에 의해 폐 엽을 통과 하자. 어떤 기포를 통과 하기 전에 셀의 나머지를 추가 합니다.
  8. Acellular 폐 시드에서 생물 병에 떨어지는 perfused 미디어를 수집 하 고 다시 3 배는 기관지를 통과 하자.
    참고: perfused 미디어는 때로는 시드 암 세포는. 따라서, 효율적인 시드에 넣어 다시 미디어 다시 기도에 주사기를 통해.
  9. 일단 시드, 주사기를 제거, 15 분 동안 기다려, 신선한 미디어, 추가 그리고는 생물 인큐베이터 다시 돌아갑니다. 튜브에서 모든 기포를 제거 합니다.
  10. 펌프 6 mL/min에서 미디어 perfuse를 시작 합니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

폐 쥐에서 수확 그대로 맥 관 구조 및 포11 (그림 3A 와 3B)를 유지 합니다. Decellularization, 시 등의 콜라겐, fibronectin, 엘라 스 틴, acellular 폐의 세포 외 기질 구성 요소11 (그림 3C, 3D, 3E및 3F) 유지 됩니다. decellularization 연결 되며 고 오신 (H & E)에 의해 관찰 될 수 있는 폐에 네이티브 쥐 세포의 완전 한 제거 및 DNA 분석11 DNA 양을 ( 에 있는 감소를 보여주는 셀의 부재를...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

Ex vivo 4 차원 폐 종양 성장 및 전이 실험실 설정에서 공부 하는 기회를 제공 한다. 네이티브 폐 매트릭스는 복잡 한 시스템 정상 조직에 지원을 제공 하 고 유지 하는 세포 세포 상호 작용, 세포-매트릭스 상호 작용, 세포 분화, 그리고 조직 조직입니다. 그것은 종양의 성장에 미치는 영향 및 다른 세포와의 상호 작용 연구를 어떤 종양 microenvironment 구성 요소를 추가 하는 기회를 제공 한다.

폐 수확 비보 전 4 차원 폐 모델에 대 한 중요 한 단계입니다. decellularization 동안는 시 약의 자유로운 흐름에 영향을 미칠 수 있습니다 폐에 혈액 응고 흉부 개통 후 헤 파 린 주입 관리에 지연 될 수 있습니다. 적절 한 홍 조 heparinized PBS를 가진 무색 액체 환기에서 올 때까지 하는 것이 세포 모델과 특히 중요 합니다. 뛰어난 베 나 정 맥의 주의 절단은는 실바에 게 어떤 해 든 지 방지 하는 것이 중요...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

P. 김 민 두 번째 존 W. Kirklin 연구 장학금, 흉부 수술, 그레이엄 연구 재단, 휴스턴 감 리 전문 의사 그룹 그랜트, 및 마이클 M. Joann H. 콘 연구 수상 미국 협회에서에서 보조금 지원을 받았다. 우리는 언어의 원고 편집에 대 한 앤 Saikin 감사 합니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Sprague Dowley ratHarlan206M남성
클로르헥시딘 면봉Prevantics, NY, USANDC 10819-1080-1
HeparinSagent Pharmaceuticals, Schaumburg, IL, USANDC 25021-400-10
18게이지 바늘McMaster Carr, USA75165A249
2-0 실크 넥타이Ethicon, 샌 앤젤로, TX, 미국A305H
Masterflex L/S 펌프Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USAEW-07554-80
Masterflex L/S 펌프 헤드Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USAEW-07519-05
Masterflex L/S 펌프 카트리지Cole-Parmer, Vernon Hills, IL,EW-07519-70
Tygon TubeCole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA14171211
MasterFlex 펌프 튜브Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA06598-16
암 루어 잠금 커넥터Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA45508-3475165A249
수 루어 잠금 커넥터Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA45513-04
블랙 나일론 링Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USAEW-45509-04
정맥 주사 세트CareFusion41134E
황산나트륨(SDS)Fisher ScientificCAS151-21-3
트리톤 X-100시그마-알드리치X100-1L
항생제Gibco15240-062
실리콘 산소공급기Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USAABW00011Saint-GoBain-Wire
mesh1164610105LowesNew York 와이어
여성 루어 러그 스타일 TEECole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA45508-56
200 시리즈 BarbCole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA45518-08
암 루어 스레드 스타일 커플러Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA45508-22
Clave 커넥터ICU Medical11956
안녕-플로 &무역; 4방향 스톱콕 w/스위블 남성 루어 잠금스미스 의료MX9341L
MasterFlex 펌프 튜브Cole-Parmer, Vernon Hills, IL, USA06598-13캐뉼라용
US

참고문헌

  1. Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer Statistics, 2017. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 67 (1), 7-30 (2017).
  2. Torre, L. A., Siegel, R. L., Jemal, A. Lung Cancer Statistics. Advances in Experimental Medicine and Biology. 893, 1-19 (2016).
  3. Lallo, A., Schenk, M. W., Frese, K. K., Blackhall, F., Dive, C. Circulating tumor cells and CDX models as a tool for preclinical drug development. Translational Lung Cancer Research. 6 (4), 397-408 (2017).
  4. Yang, S., Zhang, J. J., Huang, X. Y. Mouse models for tumor metastasis. Methods in Molecular Biology. 928, 221-228 (2012).
  5. Bissell, M. J., Hines, W. C. Why don't we get more cancer? A proposed role of the microenvironment in restraining cancer progression. Nature Medicine. 17 (3), 320-329 (2011).
  6. Francia, G., Cruz-Munoz, W., Man, S., Xu, P., Kerbel, R. S. Mouse models of advanced spontaneous metastasis for experimental therapeutics. Nature Reviews Cancer. 11 (2), 135-141 (2011).
  7. Mishra, D. K., et al. Human lung cancer cells grown in an ex vivo 3D lung model produce matrix metalloproteinases not produced in 2D culture. PloS One. 7 (9), e45308(2012).
  8. Vishnoi, M., Mishra, D. K., Thrall, M. J., Kurie, J. M., Kim, M. P. Circulating tumor cells from a 4-dimensional lung cancer model are resistant to cisplatin. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (3), discussion 1063-1064 1056-1063 (2014).
  9. Mishra, D. K., et al. Gene expression profile of A549 cells from tissue of 4D model predicts poor prognosis in lung cancer patients. International Journal of Cancer. Journal International du Cancer. , (2013).
  10. Mishra, D. K., et al. Ex vivo four-dimensional lung cancer model mimics metastasis. The Annals of Thoracic Surgery. 99 (4), 1149-1156 (2015).
  11. Mishra, D. K., et al. Human lung cancer cells grown on acellular rat lung matrix create perfusable tumor nodules. The Annals of Thoracic Surgery. 93 (4), 1075-1081 (2012).
  12. Pence, K. A., Mishra, D. K., Thrall, M., Dave, B., Kim, M. P. Breast cancer cells form primary tumors on ex vivo four-dimensional lung model. Journal of Surgical Research. 210, 181-187 (2017).
  13. Mishra, D. K., et al. Human Lung Fibroblasts Inhibit Non-Small Cell Lung Cancer Metastasis in Ex Vivo 4D Model. The Annals of Thoracic Surgery. 100 (4), discussion 1174 1167-1174 (2015).
  14. Mishra, D. K., Miller, R. A., Pence, K. A., Kim, M. P. Small cell and non small cell lung cancer form metastasis on cellular 4D lung model. BMC Cancer. 18 (1), 441(2018).

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

이 JoVE 논문의 텍스트 또는 그림 재사용 허가 요청

허가 요청

태그

Ex Vivo

관련 논문