Method Article

골절 기구 디자인 및 설치류에서 폐쇄 안정 골절에 대 한 프로토콜 최적화

DOI:

10.3791/58186

August 14th, 2018

In This Article

Summary

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

프로토콜의 목표를 일관 된 골절 골절 생성 매개 변수를 최적화 하는 것입니다. 이 프로토콜은 뼈 크기와 동물 사이 존재할 수 있는 형태 변화에 대 한 계정. 또한, 비용 효과적인, 조정 가능한 분쇄 장치 설명 되어 있습니다.

Abstract

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

동물 모델에서 일관 된 안정된 골절의 신뢰할 수 있는 세대 뼈 재생의 생물학을 이해 하 고 치료 및 장치 개발에 대 한 필수적입니다. 그러나, 사용할 수 있는 부상 모델은 불일치 결과 낭비 및 자원 동물과 불완전 한 데이터에 의해 괴 롭 혀. 골절이이 문제를 해결 하려면 여기에 설명 된 방법의 목적은 각 동물에 골절 발생 매개 변수를 최적화 하 고 일관 된 골절 위치 및 패턴을. 이 프로토콜 차지 뼈 크기와 형태는 마우스 긴장 사이 존재할 수 있으며 쥐 같은 다른 종에 일관 된 골절을 생성 하기 위해 적용할 수 있습니다. 또한, 비용 효과적인, 조정 가능한 분쇄 장치 설명 되어 있습니다. 현재 안정된 골절 기법에 비해 최적화 프로토콜 및 새로운 골절 기구 안정된 골절 패턴 및 위치에서 일관성을 증가 입증. 사용 하 여 최소화 폐쇄 골절 생성 절차에서 일반적으로 관찰 하는 골절이 유발된 충격의 정밀도 샘플 형식, 설명된 프로토콜 증가 매개 변수를 최적화 합니다.

Introduction

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

골절 치유에 대 한 연구는 큰 임상 및 경제 문제를 해결 하는 데 필요한. 매년 12 백만 이상 골절은 미국1, 비용 $80 십억 년2당 처리 됩니다. 남성 또는 여성 고통 그들의 일생에서 골절의 가능성은 25%와 44%, 각각3. 골절 치유와 관련 된 문제는 인구 노령화로 증가 comorbidities 증가 예상 된다. 연구 하 고이 문제를 해결, 강력한 모델 골절 발생 및 안정화가 필요 합니다. 설치류 모델은이 목적을 위해 적합 합니다. 그들은 임상 관련성을 제공 하 고 주소 특정 조건 (, 여러 개의 부상, 오픈, 폐쇄, 허 혈 성, 그리고 감염 된 골절)을 수정할 수 있습니다. 임상 시나리오를 복제 하는 것 외에도 동물 골절 모델은 뼈 생물학 및 치료제 개발 및 장치를 이해 하기 위한 중요 합니다. 그러나, 개입의 차이 공부 하려고 일관성 골절 발생에 의해 도입 된 다양성에 의해 복잡 수 있습니다. 따라서, 동물 모델에서 재현 하 고 일관 되 게 폐쇄 골절 생성 musculoskeletal 연구의 분야에 필수적 이다.

제대로 적절 한 유전적 배경, 성별, 나이, 및 환경 조건 함으로써 잠재적인 주제가 대 한 제어, 임상 관련 일관 된 뼈 상해의 생산은 중요 한 변수가 영향을 미치는 제어 해야 하는 재현성 일관성 없는 골절을 사용 하 여 통계 비교 실험 잡음과 높은 가변성4; 퍼진는 또한, 골절 변화 샘플 크기 또는 골절 鋭 또는 malpositioned 동물 안락사를 필요성을 증가 하는 필요 때문에 불필요 한 동물 죽음에 발생할 수 있습니다. 여기에 설명 된 메서드 샘플 형식에 관련 된 골절 생성 매개 변수를 최적화 하 고 일관 된 골절 위치 및 패턴.

골절 발생의 현재 모델은 각각 그들의 자신의 강점과 약점을 가진 두 개의 넓은 범주로을. 오픈-골절 (뼈) 모델 후 골절은 뼈를 절단 하거나 그것을 약화 및 다음 수동으로 그것을 깨는5,6,,78에 의해 유도 된 뼈를 노출 하는 수술을 받 다. 이 방법의 혜택은 골절 사이트와 더 일관 된 골절 위치 및 패턴의 직접적인 시각화. 그러나, 접근의 생리와 임상 관련성 및 상해의 메커니즘은 제한 됩니다. 또한, 골절 발생의 open 메서드는 외과 접근 및 장기간 동안 설치류 오염의 증가 위험에 노출 되는 폐쇄 필요 합니다.

닫힌된 기술을 오픈 기술 한계의 많은 주소. 닫힌된 기법 골절 뼈와 더 비슷합니다 인간의 임상 부상에서 본 주변 조직에 상해를 유도 하는 외부에서 인가 되 무뚝뚝한 힘 외상을 사용 하 여 생성 합니다. 가장 일반적인 방법은 Bonnarens와 아인혼 19849에 설명 했다. 그들은 어떤 외부 피부 상처를 유발 하지 않고 뼈를 무뚝뚝한 외상을 느 꼈는 데 사용 되는 가중치 단두대 설명. 이 방법은 유전학10,11, 약리학 적인 치료12,13,,1415, 역학16, 의 효과 연구를 널리 채택 되었습니다 17, 및 쥐 및 쥐에서 치유 하는 뼈에 생리학18,,1920 . 닫힌된 방법의 혜택은 순수 관련 골절, 실험의 재현성 및 사후 경직 골절이 의해 제한 됩니다. 일관성 없는 골절 발생 결과 제한 된 그룹 사이 감 별 법, 손실된 표본, 통계적 의미를 달성 하는 데 필요한 동물 증가.

골절 발생 및 안정화에 가변성을 제어 하는 것은 의미 있는 결과 생산 하 필수적 이다. 제대로 골절 수리 생물학 공부를 하기 위해 간단 하지만 강력한 골절 모델 필요 합니다. 모델 설치류 종, 뼈 종류 (대 퇴 골 또는 경골, 예를 들어), 그리고 가변 마우스 유전자 배경에서 번역 및 돌연변이 유발. 또한, 이상적인 절차는 기술적으로 간단 하 고 일관 된 결과 생성 해야 합니다. 주소 골절이 여기에 설명 된 방법은 잘 제어 된 분쇄 장치 매개 변수를 최적화 하 고 나이, 성별, 또는 유전자 형에 관계 없이 일관 되 게 폐쇄 골절을 생성 하는 데 사용 될 수의 건설.

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Protocol

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 프로토콜은 되도록 동물 불필요 하 게 사용 되지 않는 모든 불필요 한 통증과 고통; 아끼지는 개발 되었다 그것은 모든 연방, 주, 지역, 및 기관 관련법 및 동물 연구를 경 세 하는 지침을 준수 합니다. 프로토콜은 수 의사에 의해 지시 하는 동물 의학 프로그램 실험실 동물 의학에서 전문 대학 전체 실험실의 지도 하에 개발 되었다. 프로토콜 검토 하 고 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)에 의해 승인 했다.

1. 골절 타워 건설

참고: 모든 부품 자료 섹션 (자료 테이블)에 나열 됩니다. 상세한 기술 도면 가공 및 3D 인쇄 부품 보충 그림 1-12에 제공 됩니다. 서브 어셈블리 기술 도면 패스너 (보충 그림 1, 2, 7,9) 모든 탑재 된 부품에 대 한 세부 정보를 포함합니다.

  1. 서브 어셈블리 지원
    참고: 지원 서브 어셈블리의 기술 드로잉에 대 한 보충 그림 1를 참조 하십시오.
    1. 빔 지원-수평 섹션의중간에 광속 지원-턱 섹션을 연결 합니다.
    2. 빔 지원-세로 1 빔 지원-턱 섹션, 빔 지원-수평 섹션에서에서에서 2의 윗 표면에 연결 합니다.
    3. 중간점 (끝에서 7)에 빔 지원-수평 섹션의 위쪽 표면에 빔 지원-수직 2를 연결 합니다.
    4. 빔, 지원-플레이트 마운트 빔 지원-세로 1빔 지원-수직 2의끝에 연결 합니다. 플레이트 지원의 끝은 빔 지원-세로 2의뒷면으로 플러시해야 합니다.
  2. Ram 서브 어셈블리
    참고: ram 서브 어셈블리의 기술 드로잉에 대 한 보충 그림 2를 참조 하십시오.
    1. 기계 블록 중지 하 고 블록 가이드 (보충 그림 3); 로드 Ram (보충 그림 4); 나사 정렬 (보충 그림 5); 그리고는 플레이트 장착 (보충 그림 6).
    2. 빔 지원-플레이트 마운트 지원 서브 어셈블리의 플레이트 장착 을 연결 합니다.
    3. 다음과 같은 순서로 슬라이드를 첫 번째 선형 슬리브 베어링; 블록 가이드; 두 번째 선형 슬리브 베어링; 그리고는 블록 중지 로드 Ram에. 플레이트 장착가이드와 블록 연결 합니다.
    4. 3 ⅜ 너트 로드 Ram의 스레드 부분에 연결 합니다. 하나는 전자석과 교전 막대의 끝으로 플러시해야 합니다. 다른 2 골절 깊이 조정 하려면 사용 됩니다.
    5. 앞으로 얼굴을 블록 가이드의 스레드 구멍에 정렬 나사 를 삽입 막대 Ram 에 그루브를 맞춥니다.
  3. 자석 서브 어셈블리
    참고: 자석 서브 어셈블리의 기술 드로잉에 대 한 보충 그림 7참조.
    1. 전자석 리드 와이어 솔더 (극성 전자석 작업에 대 한 요인이 되지 않습니다). 바닥, 분쇄 장치 위치에 도달 충분 한 길이 허용 합니다. 사용 우편 넥타이 또는 스트레스에 첨부 파일의 또 다른 형태는 와이어를 완화.
    2. 전력 공급의 끝을 제거 하 고 발 페달에 연결. 마지막으로, "off" (개방) 구성에 발 페달 에 와이어를 연결 합니다. 발 스위치 를 누르면 하지 전자석 에 되도록 회로 테스트 합니다. 이 골절 하기 전에 ram을 개최 한다.
    3. 산 자석 (보충 그림 8A8B) 인쇄 첨가제 제조 장치를 사용 하 여 또는 알루미늄에서 부품 기계.
    4. 마운트 자석전자석 을 연결 합니다.
    5. 2 코너 괄호 빔 지원-자석에연결 합니다.
    6. 다음과 같은 순서로 막대 자석 최고 코너 부류 를 통해 스레드 및 추가 1 ¼ 너트; 마운트 자석; 2 개의 ¼ 너트; 그리고 하단 코너 브라켓. 각 끝에 2 개의 ¼에 견과류와 어셈블리를 보안 합니다.
  4. 전체 어셈블리
    참고: 전체 어셈블리의 기술 드로잉에 대 한 보충 그림 9를 참조 하십시오.
    1. 빔, 지원-플레이트 마운트의 상단 표면에 자석 서브 어셈블리 를 연결 합니다.
    2. 자석 막대, Ram종사 빔 지원-자석의 정렬을 조정 합니다.
      참고: 막대 발 페달을 누르면 해제 하지 않습니다, 경우 빔 지원-자석이동 하 여 전자석와 막대 사이의 접촉 영역을 줄일.
    3. 기계는 괄호 다리 턱 (보충 그림 10).
    4. 괄호 다리 턱 빔 지원-턱 섹션을연결 합니다. 삭제, ram의 팁 각 턱에서 동등한 거리에 있어야 합니다.
    5. 장소 플랫폼 골절 (보충 그림 11A11B) 문 턱의 위.
    6. 지 그 위치 골절 인쇄 (보충 그림 12A12B)와 지 그 핀 게이지 (보충 그림 13A13B) 첨가제 제조 장치를 사용 하 여 또는 기계는 알루미늄에서 부품입니다.
      참고: 2 단계에 자세히 설명 하는 최적화 단계에서 지 그 의 크기를 계산 합니다.
    7. 플랫폼 골절 지 그 골절 위치 를 연결 합니다.
    8. 영향의 깊이 로드 Ram에 두 중지 너트를 사용 하 여 조정 될 수 있다 확인 하십시오.
    9. 자석 마운트를 아래로 이동 하 여 영향의 속도 조정할 수 있습니다 확인 합니다.
    10. 확인 대괄호 다리 턱 가까이 또는 멀리 로드 Ram을 이동 하 여 골절의 너비를 조정할 수 있습니다.

2. 골절 최적화

  1. 골절 위치
    1. 5 안락사 동물의 대표 샘플에 골절을 다리 (대 퇴 골 또는 경골)의 방사선을 얻을.
      참고: 샘플 표본, 유전자 형, 연령과 성별에 따라 실험 프로토콜에 사용 될 것입니다 일치 되어야 한다. 최종 프로토콜 골절된 한 사지를 호출 하는 경우에 두 샘플 사지 사용 됩니다.
    2. 사실 옆과 앞쪽/후부 보기 뼈를 얻으려고 x 선 빔에 접선 다리를 놓습니다. 분석에 대 한 규모를 제공 하기 위해 이미징 비행기에서 알려진된 치수의 개체를 배치 합니다.
    3. 참고: 만약 이미징 화관 있도록 다리 대 퇴 골 경골와 같은 축 평면에는 전체 확장입니다.
    4. 원하는 표시 되도록 사지의 방사선 사진에 골절의 위치 (그림 1A -파선) 골절. 발뒤꿈치 뼈 tibial 관절에서 표시 된 골절 (그림 1A)의 레벨을 측정 합니다. 모든 시험 표본에 대 한 평균 골절 길이 (FL)를 계산 합니다. 대 퇴 골 골절에 대 한 intercondylar 노치에서 측정 합니다.
  2. 골절 위치 지 그
    1. 단두대 영향 (CGI) (그림 2)의 중심에 하나의 지원 모 루의 외부 표면에서 거리를 측정 합니다. 플로리다, 골절 위치 지 그 깊이 (JD) 계산을 2.1.4, 단계에서 설명한에서 CGI 를 뺍니다. 기계 또는 3D 인쇄는 높이와 너비는 모 루와 깊이 JD (그림 3A)와 같은 U-모양의 채널. 샘플 기술 도면과 CAD 파일에 포함 되어 보충 그림 12A12B.
      참고: 다리는 지 그에 놓으면 발 등 단두대 영향 사와 표면에 속여야 한다. 추가 정리는 사지에 대 한 필요한 경우 U-모양의 채널을 수정 합니다.
    2. 표본을 분쇄 장치 대 퇴 골 골절에 대 한 경향이 위치 또는 경골 골절 (그림 4)에 대 한 부정사 위치에에서 놓습니다. 골절 위치 지 그 말에 대 한 피트의 등을 누릅니다. 수동으로 사지 골절까지 단두대를 우울 하 게. 지 그 크기와 골절 위치 (그림 2B) 것인지 골절된 사지의 방사선 사진을 얻을.
    3. JD 위치 있는 경우 골절, 뼈에도 원심 늘리거나 JD 골절 위치는 너무 뼈에 인접 하는 경우.
  3. Pin 매개 변수의 안정화
    1. 핀 길이: 2.1 단계에서 얻은 검사를 사용 하 여, 후부 발목 경골 골절에 대 한 또는 대 퇴 골 골절에 대 한 더 중대 한 trochanter에 intercondylar 노치의 단계로 tibial 고원에서 다리 길이 (LL) 측정 합니다. 0.9 핀 길이 (PL) (그림 1A3B)를 계산 하 여 뼈 길이 곱하면.
    2. 핀 폭: 2.1 단계에서 얻은 검사를 사용 하 여 최소 골 수 직경 (MD) (그림 1A) 골절된 사지에서 측정 합니다. 이상의 1.5 x PL골 수 직경 및 길이 대략 동등한 게이지 바늘을 선택 합니다.
      참고: 14 주 된 C57BL/6J 마우스에 대 한 대략적인 핀 크기 각각 22 G에 1½ 및 27 G, 대 퇴 골 및 경골에 1¼입니다.
  4. 핀 절단 계기
    1. 2.4.1. 기계 또는 3D 인쇄 길이 바늘 길이 (CGL) (그림 3B; 마이너스 PL 크거나 계기 보충 13A 인물13B). 한쪽 끝에서 바늘의 허브에 대 한 나머지 오버행 하 고 다른 핀을 감축 해야 표시 해야 합니다. 샘플 기술 도면과 CAD 파일에 포함 되어 보충 그림 13A13B.
  5. Intramedullary 핀 골절 안정화
    1. 2.1 단계에서 골절이 아닌 시험 표본을 사용 하 여, 중간 대 퇴 골, 무릎 관절을 노출에 중간 경골에서 전기 깎기 또는 depilatory 크림 머리를 제거 합니다.
    2. 경골 고정: 시경 슬 개 골 인 대를 옆 바늘을 삽입. Medially 슬 개 골 인 대를 제거 하 고 경골의 축에 바늘의 끝. 리밍 모션을 사용 하 여, 부드럽게 tibial 고원 위반 하 고 골 수 구멍 아래로 바늘을 안내 합니다.
    3. 대 퇴 골 고정: 시경 슬 개 골 인 대를 옆 바늘을 삽입. Medially 슬 개 골 인 대를 제거 하 고 intercondylar 노치에 대 퇴 골의 축에 바늘의 끝. 리밍 모션을 사용 하 여, 부드럽게 intercondylar 노치의 관절 표면을 위반 하 고 골 수 구멍 아래로 바늘을 안내 합니다.
    4. 2.4 단계에서 제조 하는 계기를 사용 하 여 노출 된 바늘 게이지 길이 때까지 묶음. 제공 하는 충분 한 공간 (3 밀리미터) 계기에 표시 된 수준에서 바늘을 바늘을 철회.
      참고: 위험한 발사체가 되지 않습니다 그래서, 하는 동안 바늘의 근 위 (플라스틱) 끝을 해야 합니다.
    5. 0.3 m m의 핀 커터를 사용 하 여 핀 선단부의 방해 하 고 계기의 수준에서 핀을 잘라. 바늘의 직경 보다 큰 x 1.5 직경을 가진 막대를 사용 하 여 관절 표면에 핀을 싱크대.
      참고: Crimping 바늘 뼈 접촉을 증가 하 여 바늘 및 마이그레이션의 회전을 방지 합니다.
    6. 바늘은 사지의 골 수 운하의 길이 확장 하 고 인접 또는 원심 끝 (그림 1C)에서 밀려 나 다 하지 않습니다를 확인 하는 검사를 얻을.
  6. 충격 깊이
    1. 2.1 단계에서 얻은 검사를 사용 하 여 원하는 골절 (그림 1A)의 수준에서 피 질의 직경을 측정 합니다. 모든 시험 표본에 대 한 말은 대뇌 피 질의 직경 (CD)를 계산 합니다.
    2. 제조 단계 2.2에서에서 골절 위치 지 그와 분쇄 장치에서 2.5 단계에서 고정 된 시험 견본을 배치 합니다. 손상 되지 않은 사지에 영향 ram을 휴식.
      참고: 삭제; ram을 허용 하지 않습니다 뼈는이 최적화 단계에 그대로 유지 됩니다.
    3. 부드러운 조직을 압축 하지만 뼈를 골절 하지 ram에 충분히 아래로 힘을 적용 합니다. 0.75 x CD (그림 2)에 영향을 깊이 (ID)를 조정 합니다.
      참고: 이상적인 영향 깊이 0.5 x CD 어떤 부드러운 조직 없이 뼈를 골절 하는 때 이다. 추가 소프트-조직 압축 0.75 계정을 사용 하 여.
  7. 모 루 폭
    1. 0.4 cm 마우스 경골 이나 대 퇴 골 (그림 2)에 대 한 모 루 폭 (AW)를 설정 합니다.
      참고: 넓은 폭 쥐 같은 더 큰 견본을 위해 좋습니다.
  8. 램 중량
    1. 250 g의 최소 무게 murine 표본에 대 한 것이 좋습니다.
      참고: 추가 무게 수 될 스레드를 ram에 더 큰 표본 (그림 2)에 대 한.
  9. 충격 속도
    1. 설정 드롭 높이 (DH) 2 cm (그림 2). 활성화 된 전자석에 연결 하 여 ram의 시작 위치에 놓습니다.
    2. 평가판 사지 골절 장치에 위치. 2.2 단계에서 제조 골절 위치 지 그에 대 한 발 등을 누릅니다. 짧게 ram 출시 발 스위치를 우울 하 게 하 고 시작 위치로 다시 설정.
    3. 영향 을된 재판 사지 방사선 다리 골절 (그림 1D)의 증거를 분석.
      참고:이 때 제어 영향 깊이와 낮은 속도 사용 하 여 미묘한 수 있습니다.
    4. 없는 골절을 생성 하는 경우 단계 2.9.1-2.9.3 반복 하 고 드롭 높이 2 c m 증가.
    5. 골절을 생성 하는 경우 드롭 높이 기록 하 고 1.1 곱하십시오. 이것은 새로운 지명이다.
    6. 단계의 2.9.5 DH 를 사용 하 여 다음 재판 다리 골절.
    7. 없는 골절을 생성 하는 경우 단계 2.9.1-2.9.6 반복 하 고 드롭 높이 2 c m 증가.
    8. 골절은 생성, 반복 단계 2.9.6-2.9.7 모든 샘플 테스트 때까지 사용 됩니다. 최종 DH 및 최적화에서 모든 매개 변수 (플로리다, CGI, JD, PL, MD, PS, CGL, CD, ID, AW RW)를 기록 합니다. 시험 표본 나이, 성별, 유전자 형, 그리고 무게 기록.

3. 폐쇄-안정 골절 발생

  1. 설정
    1. 모든 장비 및 악기를 통해 압력솥, 뜨거운 비드 침수, 또는 그들의 동등 물 소독.
    2. 수술 테이블에 난방 요소를 배치 하 고 최적의 온도를 설정 합니다. 외과 용 드 레이프와 요소를 커버. 외과 용 드 레이프의2 에 3 x 3 0.75에 원이 중간에 잘라 준비 합니다.
    3. (그림 2) 각 재판 전에 골절 타워의 조정을 확인 합니다. ID, AW, RW, 그리고 지명 타자 성, 나이, 및 유전자 형 공부 표본에 대 한 특정 최적화 프로토콜에서 파생 된 값을 설정 합니다.
    4. 무게 하 고 동물의 체중을 기록 합니다.
  2. 수술
    1. 적절 하 게 흡입 마 취약을 사용 하 여 마우스를 진정 (isoflurane: 유도 4-5%, 유지 보수에 대 한 1-2%) 이거나 다른 실험실 마 취 프로토콜 설정. 호흡 속도 55-100 호흡/분 이어야 한다. 동물 뒷 다리 발가락 핀치에 반응 해서는 안됩니다.
    2. 수술 후 무 통 buprenorphine의 첫 번째 복용량 관리 (0.1 mg/kg 피하).
    3. 각 막 건조 방지 하기 위해 눈 윤 활을 적용 됩니다.
    4. 중앙 대 퇴 골, 무릎 관절을 노출에 중간 경골에서 전기 깎기로 동물의 머리를 제거 합니다. 청소 비 반응성 테이프를 사용 하 여 과잉 머리의 사이트. 70%를 적신 젖은 면봉으로 고정 사이트 준비 EtOH. 절 개 영역에서 모든 머리카락을 제거 하려면 필요에 따라 반복 합니다.
    5. 준비 하 고 고정 영역 povidone-요오드와 70%의 대체 면봉을 청소 EtOH. 무 균을 보장 하기 위해 두 개의 대체 면봉 시퀀스를 사용 합니다.
    6. 한 드 레이프 피부 적절 하 게 소독 된 후 수술 부위의 주위에 배치 됩니다.
    7. 수 2.5 단계에 설명 된 프로토콜을 사용 하 여 골절을 사지를 고정 합니다. 취득 핀 골 수 운하의 길이 확장 하지만 인접 또는 원심 끝에서 밀려 나 다 하지 않습니다를 확인 하는 검사.
    8. 전자석에 돌아서 영향 ram을 시작 하는 위치에 연결.
    9. 대 퇴 골 골절에 대 한 경향이 위치에 또는 경골 골절에 대 한 부정사 위치에 그것을 배치 하 여 표본을 분쇄 장치에 놓습니다. 고정 된 다리는 추 및 골절 위치 지 그와 지 그의 외부에 대 한 누르고 다리의 등에서에서 두어야 한다.
    10. 한 손으로 발을 눌러 고 사지만 영향에는 ram 대상 지역, 하는 동안 짧게 ram 출시 발 스위치를 우울 하 게. 시작 위치에 ram을 교체 합니다.
    11. 검사를 취득 하 고 골절의 위치와 종류를 확인 합니다.
  3. 수술 후 관리
    1. 모니터링에서 복구 하는 동안 15 분 마다 동물까지 마 취 의식, sternal recumbency, 유지할 수 있는 이며 동물 보 행. 동물 수 72 h 동안 ambulate를 확인 합니다.
    2. 그것은 완전히 복구 될 때까지 동물을 개별적으로 집.
    3. 진통 buprenorphine와 48 h 동안 유지 (0.1 mg/kg 피하) 모든 12 h를 관리.
    4. 모니터링 하 고 매일 7-10 d 또는 안락사까지 동물의 건강 상태를 기록 합니다.
  4. 골절 후 분석
    1. 플로리다, PL, CD, MD, 및 분쇄 패턴을 측정 합니다. 마스터 데이터 파일에서 측정을 기록 합니다.

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Results

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이전 우리의 실험실에서 사용 하는 단두대와 2004 년에 개발 되었다 아인혼21에 의해 게시 된 모델을 기반으로 했다. 디자인을 적절 하 게 뼈 형태학의 차이 조정 허용 하지 않았다 고 다리의 재현 위치를 허용 하지 않았다. 또한, 이전 장치 작동 하는 두 사람이 필요 합니다. 따라서, 우리는 설계, 설계, 및 새로운 골절 장치 내장. 주요 디자인 목표는 골절 깊이, 충격 힘, 3 점 연락처 및 동물 포지셔닝의 고 충실도 조정 가능성 이었다. 디자인은 200822에 Marturano에 의해 설명 된 분쇄 장치를 기반으로 합니다. 그들의 디자인의 제한 요인이 골절 깊이 충격 속도 사이의 링크를 했다. 충격 속도 하지 골절 깊이 동물 위치를 변경 하지 않고 조정 수 없습니다. 이것 하나만 변경 하는 것이 불가능 했다 골절 매개 변수를 최적화 하는 경우 한 번에 변수. 또한, 그것은 쉽게 긴...

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Discussion

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이 골절 최적화 및 생성 프로토콜 골절 매개 변수에서 파생 하 고 생산 하는 정밀, 반복, 가로 골절 최소한 침략 적 절차를 수행 하는 효율적인 방법으로 연구를 제공 합니다. 또한,이 프로토콜 연구원 중 방법을 일관성을 승진 시키는 일반적인 골절 세대 매개 변수 집합을 설정 합니다. 이 매개 변수는 매개 변수 (예:, 나이, 성별, 성별, 그리고 유전자 형)의 다양 한에 따라 골절 기준을 확립 하는 일반적인 골절 데이터베이스의 생성 수 있게 된다. 골절 변수의 최적화는 크게 샘플이-시간 낭비, 분실 된 자원, 그리고 사용할 수 없는 데이터의 양을 줄이는 감소 합니다.

정확 하 고 정밀한 분쇄를 생성 하려면 특이성의 높은 수준의 생산 되며 골절 위치의 가변성을 줄일 골절 세대 매개 변수의 표준화 된 설정을 설정 하기 위해 생명 이다. 골절 세대 뿐만 아니라 적절 한 안정화는 또한 골절 굳은 살 형성을 촉진 하 고 비 노동조합의 확률을 줄이기 위해 필요 합니다. In...

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Disclosures

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저자는 공개 없다.

Acknowledgements

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 간행물에 보고 된 연구는 국립 연구소의 관절염과 Musculoskeletal에 의해 지원 되었다 고 수상에서 국립 보건원의 피부 질병 번호 F30AR071201 및 R01AR066028.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Support SubassemblySupplementary Figure 1
Beam, Support--Jaw Section 80/201003 x 9.00w/ #7042 at A, C, 왼쪽 끝
빔, 지지--수평 섹션80/201002 x 14.00
빔, 지지--수직 180/201050 x 10.50 w/ #7042 왼쪽 끝의 A와 오른쪽 끝의 A
빔, 지지대--수직 280/201010 x 10.50 w/ #7042 D, 왼쪽 끝의 B, 오른쪽 끝의 A
빔, 지지대--플레이트 마운트80/201030 x 8.00 w/ #7036 왼쪽 끝
빔, 지지대--자석80/201010 x 13.50 w/ #7042 at A, C, 오른쪽 끝
앵커 (3)80/203392
더블 앵커 (3)80/203091
볼트 어셈블리 (6)80/2033861/4-20 x 3/8"
버튼 헤드 소켓 캡 나사 (6)80/2036041/4-20 x 3/4"
Ram SubassemblySupplementary Figure 2
Block, Stop맞춤형보충 Figure 3
블록, 가이드맞춤형보충 Figure 3
Rod, Ram맞춤형보충 Figure 4
정렬 나사맞춤형보충 Figure 5
플레이트, 장착맞춤형보충 Figure 6
선형 슬리브 베어링 (2)McMaster-Carr8649T2
육각 너트 (3)McMaster-Carr92673A1253/8-16 UNC
소켓 캡 스크류 (8)McMaster-Carr92196A1084/40 x 3/8"
소켓 캡 스크류 (6)McMaster-Carr92196A0324/40 x 1 1/8"
소켓 캡 스크류 (1)McMaster-Carr92196A267 10/32 3/8 인치
Magnet SubassemblySupplementary Figure 7
Mount, MagnetCustomSupplementary Figure 8
전원 공급 장치McMaster-Carr70235K23
풋 스위치McMaster-Carr7376k2
ElectromagnetMcMaster-Carr5698k111
와이어 - 10 피트McMaster-Carr9936k12
로드, 마그넷McMaster-Carr95412A5661/4" 나사가 달린 막대 x 7"
코너 브라켓 (6)80/204108
소켓 캡 스크류 (1)McMaster-Carr92196A70510/32 1 1/4"
육각 너트 (4)McMaster-Carr92673A1131/4-20 UNC
Complete AssemblySupplementary Figure 9
Bracket, Leg Jaw (2)CustomSupplementary Figure 10
Platform, FravtureCustomSupplementary Figure 11
Jig, Positioning-FractureCustomSupplementary Figure 12
Other
Pin Cutter의료 용품 및 장비150S
바늘시그마Z192430, Z192376 23g x 1.5" - 마우스 대퇴골, 27g x 1.25" - 마우스 경골
에서

References

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