조직 Microcolumns 수확 용

요약

우리가 생산 하는 수확에 대 한 프로토콜을 설명 하는 여기 전체 간격 피부 조직 기증자를 유발 하지 않고 수집 하는 데 사용할 수 있는 바늘 흉터 사이트. 바늘 대량 수확을 달성 하는 간단한 컬렉션 시스템 결합 될 수 있다.

초록

이 원고는 전체 두께 피부 조직의 microcolumns를 수집 하는 데 사용할 수 있습니다 상용 구성 요소에서 만든 실험실 기구에 대 한 생산 과정을 설명 합니다. 작은 크기는 microcolumns의 수 기증자 기증자 사이트 전체 두께 조직 활성화 피부 조직의 포함 하 여 모든 세포와 세포 외 구성 요소의 관련을 수확 하면서 흉터를 유발 하지 않고 신속 하 게 치료 하는 사이트 깊은 피부 지역와 부속 피부 구조는 기존의 조직 공학 기법을 사용 하 여 성공적으로 복제를 아직 있다. microcolumns을 치료, 보강 피부 상처에 직접 적용 될 수 있다 또는 다른 조직 공학 접근에 대 한 헌 세포/조직 소스로 사용할 수 있습니다. 수확 바늘 표준 피하 주사 바늘, 수정 하 여 만들어진 고 수확 하는 적은 양의 조직에 대 한 단독 사용 하거나 간단한 흡입 기반 컬렉션 시스템 (또한 일반적으로 사용 가능한 실험실에서 만든)을 함께 수 있습니다. 높은-볼륨에서 큰 동물 모델 연구를 촉진 하기 위하여 수확.

서론

자가 피부 이식 상처 복구의 주류 이지만 그것은 기증자 사이트 부족 및 병 적 상태, 기존의 피부 이식^{1,2 대체 하는 새로운 치료 옵션을 개발 하 최근 몇 십년 간에서 공동된 노력을 선도 의해 제한} . 우리는 최근 기증자 사이트 사망률을 최소화 하면서 전체 간격 피부 이식의 혜택을 활용 하는 피부를 수확의 다른 방법 개발. 소형 (~0.5 m m 직경) "microcolumns"의 형태로 전체 간격 피부 수집, 기증자 사이트 신속 하 고 정상적인 상황에서 흉터 없이 치유 수 있습니다 (잠재적인 예외 아래 토론 섹션 참조)³. Microcolumns 가속 상처 폐쇄, 수축³, 줄이고 상처 침대에 직접 적용할 수 있으며 다양 한 표 피 및 피부 세포 유형 및 기능 부속 구조⁴에서 결여 되는 많은 복원 기존의 분할 간격 피부 이식 또는 현재 bioengineered 피부 대체⁵. 치유 증가 시키기 위해 microcolumns의 능력과 그들의 기증자 사이트 흉터 없이 치료 하는 둘 다 독립적으로 유효성이 검증 되지 다른 연구....

프로토콜

모든 작업 관련 된 살아있는 동물 그리고 동물 조직 샘플 매사추세츠 일반 병원 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)에 의해 승인 되었습니다.

1입니다. 바늘의 생산

1. 생산 단계의 설정
   1. 게시물에 여성 luer 잠금 커넥터 연결 하 고는 luer 잠금 (그림 1A) 무대의 중앙에 회전 무대에 게시물을 탑재.
   2. 이 첫 번째 회전 무대를 세로로 놓고 수직으로 (그림 1B) 두 번째, 수평 회전 단계에 그것을 마운트.
   3. 2-축 번역 단계 (그림 1B)에 수평 회전 무대를 탑재 합니다.
   4. 광학 브레드보드 등 안정적인 표면 결합 고정.
   5. 별도로 회전/번역 조합 단계 (그림 1C)에 병렬로 브레드보드와 luer 잠금 커넥터와 대략 같은 높이에 위치 하는 도구와 같은 브레드보드 회전 도구를 탑재 합니다.
   <....

결과

수확 바늘 microcolumns 약 80-90% 성공 속도, 전체 두께 피부 조직의 수집 수 그리고 각 microcolumn 표 피, 진 피, 그리고 피하 지방을 (그림 4)를 포함 해야 합니다. 수확의 성공률은 낮은, 또는 조직에 바늘을 삽입 하기 어려워진 경우 새로운 바늘 가능성이 필요 하다. 수확에 대 한 성공률도 새 바늘으로 일관 되 게 낮은 경우 바늘 너무 짧은 아마 있습니다.

Vivo에서사용 하는 경우 다시 epithelialization는 일반적으로 몇 일³이내 발생 기증자 사이트는 신속 하 게 치료 한다. Microcolumns^3,4.......

토론

여기에 설명 된 방법은 비보에 큰 동물 연구, 상용 실험실에서 만든 도구를 사용 하 여 충분 한 수량에 조직 microcolumns 컬렉션을 사용 하기 위한 것입니다. 이 장치는 이전 조직 삭제 인간의 피부^4,9 라이브 돼지 피부³에서 수확에 사용 되었습니다. 설명 하는 특정 매개 변수는 돼지에 사용 하기 위해 가장 적합 하는 것을 발견 했다. 그것은 같은 장치를 수정 및 설치류와 다른 작은 동물에서 수집 하는 조직에 대 한 적응 수 있습니다 하지만이 우리의 실험실에서 테스트 되지 않았습니다으로 예상 된다.

이 프로토콜의 중요 한 단계 수확 바늘은 충분 한 길이 (비효율적인 수확은 일반적으로 너무 짧은 되 고 바늘 때문)의 보장, 방지 하기 위해 수확 과정을 통해 액체에서 침수는 microcolumns를 유지 건조, .......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
다이아몬드 휠	Dremel	545
피하 주사 바늘 (19G)	Fisher Scientific	14-840-98	실험적 필요에 따라 다른 바늘 크기를 사용할 수 있습니다
스톤 휠	Dremel	540
주사기 (루어 잠금 장치 포함 20mL)	Fisher Scientific	22-124-967
흡입 어댑터	Tulip Medical	PA20BD	선택 사항, 대량 수확용
흡입 캐니스터	Fisher Scientific	19-898-212	선택 사항, 대량 수확용. 사용하기 전에 소독하십시오.
흡입 튜빙	Medline	DYND50216H	옵션, 대량 수확용

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