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방법 논문

스트레스 강화 된 두려움 학습, 외상 후 스트레스 장애의 강력한 설치류 모델

11.7K 조회수

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DOI:

10.3791/58306

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2018년 10월 13일

이 논문에서

요약

여기는 외상 후 스트레스 장애, 쥐 및 쥐에서의 전 임상 모델 스트레스 강화 된 공포 (SEFL) 학습 실험을 수행 하는 데 필요한 자세한 방법에 설명 합니다. 모델은 파블로프 두려움 컨디셔닝 및 설치류에서 향상 된 두려움의 색인 어의 측면을 활용 합니다.

초록

공포 행동 생존을 위해 중요 하지만 두려움의 어울리지 않게 높은 수준의 외상후 스트레스 장애 (PTSD) 등 정신 장애 개발에 대 한 취약점을 증가 시킬 수 있습니다. PTSD에 두려움 dysregulation의 생물 학적 메커니즘을 이해 하는 장애의 유효한 동물 모델에서 시작 하 중요 하다. 이 프로토콜 쥐 및 쥐에 PTSD의 전 임상 모델 스트레스 강화 된 공포 (SEFL) 학습 실험을 수행 하는 데 필요한 방법론을 설명 합니다. SEFL은 PTSD, 급성 스트레스에 의해 발생 하는 공포 학습의 장기 민감성 등의 중요 한 측면을 정리에 개발 되었다. 파블로프의 SEFL 사용 측면 컨디셔닝 두려워 하지만 고유 하 고 강력한 민감하게 공포 응답 정상 조건부 공포 응답 보다 훨씬 더 큰 생산. 외상 절차 포함 컨디셔닝 챔버에 쥐를 배치 하 고 관리 15 있으면된 충격을 무작위로 배포 하는 90 분 이상 (쥐 실험, 마우스 실험 10 있으면 충격 무작위로 배포 60 분 이상 사용) . 하루에 2, 설치류에에서 배치 됩니다 컨텍스트 컨디셔닝 소설 어디 그들이 받을 단일 충격; 다음, 하루에 3 주 2에서와 같은 맥락에서 다시 배치 되며 수준에 변화에 대 한 테스트 됩니다. 설치류 이전 외상 디스플레이 받은 첫 날에 더 충격을 받은 그에 비해 시험 당일에 동결의 수준을 향상. 따라서,이 모델 단일 높은 스트레스 경험 (외상) 외상 성 이벤트와 연결 된 자극의 극단적인 공포를 생성 합니다.

서론

두려움은 생존, 인식 하 고 위협에 대처 하는 개인 설정에 대 한 중요 한 동작입니다. 그러나, 과장 된 공포 응답 정신 장애 외상후 스트레스 장애 (PTSD) 등의 발전에 기여할 수 있다. PTSD의 1 개의 특징은 가벼운 스트레스, 특히 그의 원래 외상, 그리고 새로운 공포1,2를 개발 하는 경향이 연상에 대 한 과장 된 응답입니다. 실험실에서 두려움은 종종 인간과 설치류3,4에서 두려움의 안정적이 고 ethologically 유효한 인덱스는 동작 동결을 통해 측정 됩니다. PTSD의 공포와 향상 된 공포 식 dysregulation 포함 알려져 있다, 하는 동안 안정적으로 상대적으로 무해 한 자극에이 증강된 공포 응답을 캡처하는 PTSD의 강력한 동물 모델의 부족이 이다.

이 프로토콜 쥐 및 쥐에, PTSD의 안정적이 고 강력한 전 임상 모델 스트레스 강화 된 공포 (SEFL) 학습 실험을 수행 하는 데 필요한 구체적인된 방법론을 제공 합니다. SEFL은 파블로프 두려움 컨디셔닝, 아직 그것은 정상적인 두려움 컨디셔닝에서 명백한 ....

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프로토콜

1입니다. 과목

  1. 쥐
    1. 주문 약 90 일 이전 및 단일 보관 표준 쥐 감 금 소에 있을 때 도착 하 쥐.
      참고: 단일 하우징이 좋습니다 그룹 주택 생산 다양성 때문에 특히 스트레스 노출 다음 홈 장에 동물 간의 상호 작용으로. 남성 및 여성 쥐에, 긴 에반스와 Sprague Dawley 쥐, 및 쥐 19 일7,10어린 SEFL 증명 되었습니다.
    2. 무작위로 두 개 이상 조건에 동물을 할당: 외상 (n = 8) 아무 외상 (n = 8) (참조 Rau 외. 5 추가적인 제어 조건에 대 한).
  2. 마우스
    1. 쥐 때 약 60 일 이전 및 단일 보관 표준 마우스 케이지 들은 도착 주문. 단일 집 실험 기간 내내 뿐만 아니라 외상 전에 적어도 4 주 동안 쥐.
    2. 무작위로 두 개 이상 조건에 동물을 할당: 외상 (n = 8) 아무 외상 (n = 8).

2. 장비 설치

  1. A 문맥과 두려움 컨디셔닝 챔버의 두 번째 집합 컨텍스트 B ....

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결과

주 2 외상 컨텍스트 테스트의 결과 그림 1에 표시 됩니다. 외상 조건에 동물 A 아무 외상 컨트롤에 비해 외상 컨텍스트를 두려움의 인수를 나타내는 컨텍스트에서 동결의 상당히 높은 수준의 보여주었다 [쥐: F(1,17) = 23.58, p < 0.01; 쥐: F(1,14) = 666.50, p < 0.0001]입니다. 3 일에 새로운 맥락에서 단일 충격은 그림 2에 표시 하기 전에 초기 계획 기간 동안 동결. 외상 및 아무 외상 동물 보여 서로 다른 하지 않은 최소한의 동결 레벨 [쥐: F(1,17) = 3.14, p > 0.05; 쥐: F(1,14) 1.70, p > 0.05 =]. 이것은 컨텍스트 A와 B는 외상 동물 소설 컨텍스트에 외상 컨텍스트에서 일반화 하지 않았다 충분히.......

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토론

SEFL 쥐 및 쥐에 지 수를 민감하게 공포 응답 PTSD의 특성을 연구 하는 데 사용할 수 있습니다 PTSD의 강력한 행동 모델 이다. 외상 후 스트레스, 다음 설치류 증가 공포 응답 분명히 다른 컨텍스트에서 이전 외상 경험의 알리미로 제공 하는 가벼운 스트레스와 결합 한 후에 표시. 외상 성 스트레스에 따라 설치류 당연히 두려움 주 2, 외상 성 스트레스는 그대로 그 메모리를 나타내는 (그림 1)에 외상 성 스트레스 상황에 반환의 높은 레벨을 표시 합니다. 그러나, 그들은 3 일 (그림 2)에 3 분 기준 기간 동안 최소한의 동결에 의해 표시 된 대로 새로운 컨텍스트를 외상 성 스트레스 상황에서 최소한의 공포 일반화를 보여줍니다. 이 소설이 컨텍스트에 모든 학습 향상 외상 컨텍스트에서 일반화 때문에 단순히 하지 임을 나타냅니다. 또한, 동물 외상 성 스트레스에 노출 증가 반응 그 학습 향상 단일 충격 때문으로 인식 되고.......

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공개 사항

박사 Fanselow Neurovation 연구소의 창립 이사회 회원입니다.

감사의 글

이 작품에 의해 국립 연구소의 건강 R01AA026530 (MSF), 두뇌 및 행동 건강 (MSF), NRSA-F32 MH10721201A1 및 NARSAD 26612 (AKR), NSF DGE-1650604 (SG) Staglin 센터 투자 되었다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
로우 프로파일 바닥을 위한 공포 조절 챔버 MedAssociates Inc.VFC-008-LP공포 조절 챔버
소음 감쇠 큐비클Med Associates Inc.NIR-022SD외부 소음의 침입을 방지하기 위한 소음 조절 칸막
이 NIR/백색광 제어 박스Med Associates Inc.백색 및 근적외선을 투사할 수 있는NIR-100VR
NIR VFC 라이트 박스Med Associates Inc.NIR-100L2화이트 오버헤드 하우스라이트
윈덱스  오리지널 유리 세정제Windex동물 사이의 공포 조절 챔버 청소 및 냄새를 맡기 위한 솔루션
아세트산Fisher ScientificA38-212동물 사이의 공포 조절 챔버 청소 및 냄새를 맡기 위한 솔루션
A-프레임 챔버 삽입Med Associates Inc.ENV-008-IRT의 내부 레이아웃을 구별하기 위한 검은색 플렉시글라스 삼각형 인서트
VFC-008-CWI컨텍스트 A 및 B의 내부 레이아웃을 차별화하기 위한 흰색 플라스틱 시트
Med Associates Inc.용 1/8" 그리드 로드가 있는 로우 프로파일 컨텍스트 그리드 플로어VFC-005A마우스용 플랫 그리드 바닥
1/8" 및 3/16" 그리드 로드가 번갈아 가며 있는 로우 프로파일 컨텍스트 그리드 바닥 마우스Med Associates Inc.VFC-005-S마우스용 엇갈린 그리드 바닥
Med Associates, Inc.용 1/8" 엇갈린 그리드 로드가 있는 로우 프로파일 컨텍스트 그리드 바닥VFC-005A-L마우스용 교대 그리드 바닥
Med Associates, Inc용 3/16" 그리드 로드가 있는 로우 프로파일 컨텍스트 그리드 플로어,VFC-005쥐를 위한 플랫 그리드 바닥
3/16" 및 3/8" 그리드 로드가 번갈아 가며 로우 프로파일 컨텍스트 그리드 바닥Med Associates Inc.VFC-005-L쥐용 교대 그리드 바닥,
Med Associates, Inc용 3/16" 엇갈린 그리드 로드가 있는 로우 프로파일 컨텍스트 그리드 플로VFC-005-S쥐를 위한 엇갈린 그리드 바닥
금속 팬Med Associates Inc.그리드 바닥 아래의 배설물을 잡기 위한 금속 팬
독립형 혐오 자극기/스크램블러Med Associates Inc.ENV-414S발 충격 전달을 위한 충격 발생기 및 스크램블러
멀티미터Fluke87-5발 진폭 측정을 위한 도구
VideoFreeze SoftwareMed Associates Inc.SOF-843충격 전달 제어를 위한 VideoFreeze 소프트웨어
고속 Firewire, 흑백 비디오 카메라Med Associates, Inc.VID-CAM-MONO-4근적외선으로 녹화할 수 있는 비디오 카메라
조명 제어 상자 컨텍스트 A 및 B 곡선 벽 인서트 Med Associates Inc.Mouse , Mouse , Inc., Rat . Inc.Rat .어, Inc., ,

참고문헌

  1. Bremner, J. D., Krystal, J. H., Southwick, S. M., Charney, D. S. Functional neuroanatomical correlates of the effects of stress on memory. Journal of Traumatic Stress. 8 (4), 527-553 (1995).
  2. Dykman, R. A., Ackerman, P. T., Newton, J. E. ....

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재인쇄 및 허가

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