우리는 PCOS와 이러한 PCOS 같은 댐에서 자손의 이상 공부 dihydrotestosterone 펠 릿 마른 PCOS 같은 마우스 모델의 개발을 설명 합니다.
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이 논문에서
요약
초록
Hyperandrogenemia 여성에서 생식 및 대사 기능에 중요 한 역할을 담당 하 고 다낭 성 난소 증후군의 특징 이다. PCOS 가진 여자를 모방 하는 마른 PCOS 같은 마우스 모델을 개발 하는 것은 임상적으로 의미가 있습니다. 이 프로토콜에서 우리는 이러한 모델을 설명합니다. DHT (dihydrotestosterone) 크리스탈 분말 펠 릿의 4mm 길이 삽입 하 여 (펠 릿의 총 길이 8 m m), 매월 교체, 하지 DHT (no-DHT)으로 이식 하는 쥐 보다 더 높은 혈 청 DHT 레벨 2 배와 PCOS 같은 마우스 모델을 생성할 수 있습니다. 우리는 체중과 신체 구성을 변경 하지 않고 생식 및 대사 장애를 관찰. 불모의 높은 학위를 전시, 이러한 PCOS 같은 여성 쥐의 작은 하위 집합 임신 얻을 수 그들의 자손 성인 지연된 사춘기 및 증가 남성 호르몬을 표시 하는 동안에. 이 PCOS 같은 마른 마우스 모델 PCOS와 이러한 PCOS 같은 댐에서 자손의 이상 공부를 유용한 도구입니다.
서론
Hyperandrogenism 안 드로 겐 과잉 및 PCOS (애 PCOS) 사회와 NIH 기준에 따라 polycystic 난소 증후군 (PCOS)의 특징 이다. PCOS 가진 여자 임신 어려움이 있고 임신 합병증1의 위험을 증가 했다. 그들은 임신 하는 경우에 그들의 여성 자손 불리 한 건강 결과2,3있다. 다양 한 전략4,5,6,7,,89,10,11 을 사용 하 여 동물 모델 개발 되었습니다. , 12 그리고 체중 증가와 비만 확장된 adipocyte 크기 및 증가 체형 무게와 관련 된 (무 배 란, 나 장애....
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프로토콜
여기, 상세한 프로토콜 DHT 펠 릿 준비 및 삽입, 및 생식 하 고 신진 대사 테스트를 위해 선물이. 쥐가이 연구에 사용 된 혼합된 배경 (C57/B6, c d 1, 129Sv) 그리고 음식과 함께 유지 되었다 광고 libitum 24 ° c의 존스 홉킨스 대학에서 브로드 웨이 연구 건물 동물 시설에서 14/10 h 명암 주기 물 의학입니다. 모든 절차는 존스 홉킨스 대학 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 되었다.
1. PCOS 같은 마우스 모델 만들기
-
DHT 펠 릿 준비
- 오토 클레이 브 소독 실리콘 튜브입니다. 실리콘 튜브 면도날; 15 mm의 길이로 잘라
- 20 G 무딘 바늘 3 mL 주사기에 부착 된 튜브에 의료 접착 실리콘을 주입 하 여 한쪽을 봉인. 플런저는 주사기 그리고 저수지에 삽입 하는 접착제에서 철수 해야 합니다. 플런저를 다시 삽입 하 고 바늘에서 등장 하기 시작 때까지 접착제 밀어. 무딘된 바늘 어떤 강한가 위 20 G 바늘의 날카로운 끝 쪽을 절단 하 여 이루어집니다. 실리콘 튜브에서의 길이 포스트 프로덕션 트리밍; 수 있도록 2 m m 이상 이어야 한다
- 하룻밤 건조; 봉인 된 측에 공기 방울을....
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결과
혈 청 DHT 수준 및 포도 당 내성 검사
DHT 수준은 측정 했다 수집 된 혈 청에서 두 ELISA와 LC-MS 프로토콜 1.24-1.25, 그리고 2.9, 3.0. 그러나 DHT 절대 값은 질량 분석 및 ELISA,, DHT 대 아니 DHT 삽입 두 분석에서 유사 이며 전체 실험15,,2324 ( 의 상대 배 (약 2-fold) 사이 다른 그림 2A). 그러나 DHT 수준을 크게 DHT와 노-DHT 쥐에서 임신을 통해 선입견에서 증가,, DHT 수준을 2-fold (1 일 짝짓기 전에) 둘 다 pregestational no-DHT 쥐에 비해 D.......
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토론
Hyperandrogenism은 PCOS의 핵심 기능입니다. 혈 청 DHT (두 배 높은 아니 DHT 마우스에 비해 DHT 쥐)이이 프로토콜에 사용 되는 이전 연구에서 다른 조사자에 의해 보고 그 보다 낮은 및 비례 PCOS5,19, 여성 모방을 보정 20,21. 다른 모델과 달리이 2-fold DHT 모델 몸 무게와 DHT 삽입23,24후 최대 3.5 개월 아니 DHT 쥐에 비해 몸 전체 구성 변경 되지 않습니다. 이러한 성인 DHT 이식 마우스 지속적인 exogenous DHT에 의해 유지 됩니다. 몸 전체 구성 변경 되지 있지만 구조 변경 및 함수는 adipocytes의 마른 PCOS 여자<.......
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공개 사항
아무것도 공개입니다.
감사의 글
이 작품은 건강의 국가 학회 (보조금 R00-남서에 HD068130)와 볼티모어 당뇨병 연구 센터에 의해 지원 되었다: 조종사와 (남서)에 타당성 부여.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 결정질 5α-DHT 분말 | Sigma-Aldrich | A8380-1G | |
| Dow Corning Silastic 튜빙 | Fisher Scientific | 11-189-15D | 0.04in/1mm 내경 x0.085in/2.15mm 외경 |
| 의료용 접착 실리콘 | 팩터 II, InC. | A-100 | |
| 고글, 실험복, 장갑 및 마스크. | |||
| 10 & 마이크로; 필터가 없는 L 피펫 팁 | USA Scientific | 11113700 | |
| 번짐용 현미경 슬라이드 | Fisher Scientific | 12-550-003 | |
| 염색을 위한 Diff Quik | Fisher Scientific | NC9979740 | |
| Lancet | Fisher Scientific | NC9416572 | |
| 3 mL 주사기 | Becton, Dickinson and Company (BD), | 30985 | |
| 부속 바늘 : 20G | BD | 305176 | |
| 눈금자 : 밀리미터 눈금이있는 10cm 이상의 길이. | |||
| Xylazine | Vet one AnnSeA LA, MWI, Boise | NDC13985-704-10 | 100 mg/mL |
| 케타민 염산염 | Hospira, Inc | NDC 0409-2051-05 | 100 mg/mL |
| 수술용 스테이플 | AutoClip® 시스템, Fine Science Tool | 12020-00 | |
| 인슐린 주사기 | BD | 329461 | 1/2 CC, 저용량 U-100 인슐린 주사기 |
| 투관침 | 미국 | MP-182 | |
| 현미경 | Carl Zeiss Primo Star | 415500-0010-001 | 독일 |
| 귀 펀치 | Fisher Scientific | 13-812-201 | |
| 테스토스테론 쥐/쥐 ELISA 키트 | IBL | B79174 | |
| DHT ELISA 키트 | 알파 진단 국제 | 1940 | |
| 원터치 울트라 혈당계 | Life Scan, Inc. | ||
| 원터치 울트라 테스트 스트라이프 | 스캔 (Life Scan, Inc.) | ||
| Eppendorf 튜브 | Fisher Scientific | 05-402-18 | |
| 면도날 | Fisher Scientific | 12-640 | |
| 클리독 | Fisher Scientific | NC0089321 | |
| 외과용 언더패드 | Fisher Scientific | 50587953 | 제조사: Andwin Scientific 56616018 |
| Betadine 방부제 솔루션 | Walgreens | ||
| 3M Vetbond (n- 부틸 시아 노 아크릴 레이트) | 3M 과학. 생활 |
참고문헌
- Palomba, S., de Wilde, M. A., Falbo, A., Koster, M. P., La Sala, G. B., Fauser, B. C. Pregnancy complications in women with polycystic ovary syndrome. Hum. Reprod. Update. 21 (5), 575-592 (2015).
- Doherty, D. A., Newnham, J. P., Bower, C., Hart, R. Implicati....
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재인쇄 및 허가
