개발 및 간 암에 대 한 토끼 VX2 모델의 Angiographic 사용

요약

이 문서의 목표는 개발 및 간 암에 대 한 VX2 암 토끼 모델의 사용에 대 한 입문서를 제공 하는입니다.

초록

토끼 VX2 종양 간세포 암 (HCC) 중재 방사선과의 분야에 관한 조사에 변환에 대 한 일반적으로 활용 하는 동물 모델입니다. 이 모델은 쉽고 안정적으로 최종 수확 및 이식 이식 간으로 순진한 받는 사람에 대 한 기증자 토끼의 골격 근육에서 전파를 하다 편평 세포 암 종을 사용 합니다. 이 종양 이식 가능한 hypervascular 캡슐에 의해 포위 하는 괴 사 성 코어 특징 angiographically 식별 종양으로 받는 사람 토끼의 간 내에서 급속 하 게 성장. 토끼 해부학의 실제 크기는 혈관 계측 응용 프로그램에 대 한 허용 하 고 다양 한 중재 기법의 테스트를 용이 하 게 하기에 충분. 이러한 장점에도 불구 하 고 연구자는 모델 작업에 대 한 구체적인 기준으로 행동 기술 자원의 소수를 존재 합니다. 여기, 우리는 개발, 성장, 전파, 그리고 초보자와 경험이 풍부한 연구자 모두에 의해 사용 하기 위해 토끼 VX2 종양 모델의 angiographic 활용의 기술적 측면에 대 한 포괄적인 시각적 개요를 제시.

서론

토끼 VX2 종양 모델 1935^1,2의 개발 이후 실험 종양에서 역할을 담당해 왔습니다. 이 종양은는 바이러스 유도 하다 편평 세포 암 종 hypervascularity, 급속 한 성장, 및 골격 근육^3,4에 쉽게 전파 특징. 토끼 VX2 종양 모델 다양 한 암^5,6,,78;를 조사 하기 위해 사용 되었다 이 문서의 초점은 간 암^9입니다.

설명 하는 방법의 목적은 기본 간 암, 또는 간세포 암 (HCC), 번역 상 연구에 대 한 중재 방사선에 의해 사용할 수 있는 모델을 제시 하는 것입니다. 그것은 pharmacokinetic 연구, 치료 조사 및 테스트^10,11....

프로토콜

다음 프로토콜 다음과 모든 요구 사항 및 지침-일리노이의 대학에 의해 위임 된 시카고. 그것은 검토 하 고 실행 하기 전에 로컬에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회 승인.

1. VX2 뒷 다리 종양 개발

1. 국립 암 연구소 사단의 암 치료 진단 및 치료 종양/셀 라인 저장소에서 VX2 종양 세포 라인을 조달.
   참고:이 시점에서 주문 카탈로그에서 찾을 수 있습니다 다음 링크: https://dtp.cancer.gov/repositories/.
2. 그들은 해 동 때까지 세포 현 탁 액 분사를 준비 하려면 미지근한 물에 냉동된 VX2 샘플 및 스 매체를 놓습니다.
   1. 5 mL 주사기로 해 동된 세포 현 탁 액의 0.5\u20121 mL 및 해 동된 스 매체의 동일한 볼륨을 발음.
      참고: 그것은 발음 셀 서 스 펜 션에 21 또는 22 G 바늘을 사용 하 여 더 큰 계기 바늘 스 중간 발음을 하는 데 도움이 있습니다. 얼음에 주사기를 놓습니다.
3. 세포 현 탁 액, 1 mg/kg acepromazine 및 피하 주어진 0.02 mg/kg buprenorphine 사용 하 여 진정으로 시작의 접종에 대 한 뒷 다리 종양 기증자 토끼를 준비 합니다. 클리퍼 스와 함께....

결과

그림 1에서 볼 때, 그것은 분명 토끼의 quadricep 확대 됩니다. 또한, 일반적으로 근 막 통해 종양 성장 연관 여러 작은 개별 혹 볼 수 있습니다. 촉진, 시 주입된 사지 비 주입 사지 보다 나타납니다. 연구원 종양 존재의 더 확실 한 보증 하는 경우, 초음파 이미징 근육에 포함 된 종양을 식별 하기 위해 사용할 수 있습니다. 종양이 감지 되지 않으면 뒷 다리 종양 세포 현 탁 액으로 다시 주입 해야 합니다.

성공적인 혈관 접근을 확인, 칼 집에 반환 혈액 그림 13D에서 보듯이 포부에 관찰 된다. 혈관 접근에 성공 하면 미 포부 칼 집에서 공기를 얻을 것 이다 또는 주사기의 플런저를 당겨 하는 때 중요 한 저항으로 제시.

토론

VX2 종양 방법론에서 첫 번째 중요 한 단계는 기증자 토끼의 뒷 다리에 종양의 성공적인 전파입니다. 이 단계에 대 한 자세한 내용은 "대표 결과" 섹션에서 첫 번째 단락을 참조 하십시오.

다음 중요 한 단계는 가능한 종양 캡슐 올바르게 식별을 하도록 하 고 있다. 뿐만 아니라이 종양 정지 준비를 위해 필요한 것 그러나 그것은 또한 선택 하 고 생성 하는 종양 조각 간 이식에 대 한 중요 하다. 실행 가능한 종양과 주변 근육 조직 사이의 경계 그림 4에 주석을 답니다. 잘못 된 조직 샘플은 서 스 펜 션 준비 도중 긁힌 것, 이후 뒷 다리 전파 실패 합니다. 이럴 경우 간 이식 시, 간에서 종양의 성장 발생 하지 않습니다. 이 되지 않습니다 명백한 혈관까지.

간 이식 하는 동안 간 좌 엽에 접근 하는 때 배려를가지고 한다. 때때로, 복 막에 들어갈 때 간 예가 경우 연산자는 관.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
MethoCult (Methycellulose)	Stemcell Technologies	M3134
VX2 세포주	NCI	VX-2
5 mL 주사기	BD	309646
16 G 바늘	BD	305197
22 G 바늘	BD	305155
이발기	Wahl	41870-0438
폼 절연 상자	Mr. Box Online	10 x 10 x 4
Acepromazine	Henry Schein	003845
Buprenorphine	Par	42023-179-05
Meloxicam	Henry Schein	049755
알코올 패드	Covidien	5033
케타민	Henry Schein	056344
Xylazine	Akorn	59399-110-20
Pentobarbital (Fatal-Plus)	Vortech	9373
멸균 페트리 접시	써모 피셔	172931
DMEM	Gibco	11965092
식염수	Baxter	2F7124
15 블레이드	Steris	02-050-015
메스 핸들 x 2	Steris	22-2381
곡선 지혈	WPI	501288
외상성 겸	Sklar	52-5077
거즈	메들린	NON21430LF
11-Blade	Steris	02-050-011
Surgicel	Ethicon	1951
3-0 PDS / 테이퍼	Ethicon	Z305H
4 - 0 Vicryl / 절단	Ethicon	J392H
40 μ m 스트레이너	BD	352340
50 mL 코니컬 튜브	Thermo Fisher	339652
플라스틱 피펫	Thomas Scientific	HS206371B
Centrifuge	Sorvall	75004240
1.40 mL 튜브 (내부 나사)	Micronic	MP32131-Z20
3-F VSI Micro-HV Introducer Kit	Vascular Solutions	맞춤 주문 (P15180391)
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Omnipaque	GE	Y510