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방법 논문

쥐에 있는 저 승 문 합의 창조

12.1K 조회수

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DOI:

10.3791/58742

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2019년 1월 17일

이 논문에서

요약

Anastomotic 누설 또는 수술 후 고장 수술 후 병 적 상태와 사망률의 주요 원인입니다. 저 승 문 합을 만들기 위한 우리의 수술 anastomoses의 치유 메커니즘을 공부에 대 한 안정적이 고 재현 가능한 방법입니다.

초록

장 anastomoses 선택 및 응급 작업에서 일반적으로 수행 됩니다. 그럼에도 불구 하 고, anastomotic 누수 저 승 수술의 높은 무서운된 합병증 이며 같은 누출 환자에 대 한 최대 39% 사망률과 수술 anastomoses의 최대 26%에서 발생할 수 있습니다. 현재, anastomotic 치유의 세포 메커니즘을 자세히 설명 하는 데이터의 소수 남아 있습니다. 예방 전략 및 anastomotic 누출에 대 한 치료 modalities 고안 적절 한 anastomotic 치유의 더 나은 이해에 의해 크게 potentiated 될 수 있습니다.

Murine 모델 이전 연구 murine 문 합은 가장 임상적으로 유사한 다른 동물 모델에 비해 인간의 경우에 이상적입니다. 쉽게 재현할 murine 모델 쥐에 대 한 추가 설명을 anastomotic 치유 수 있도록 저 승 문 합을 제공 합니다.

서론

내장의 수술 문 합의 높은 무서운된 합병증이입니다 anastomotic 고장 또는 누출. Anastomotic 누수를 복 부 구멍으로 intraluminal 내용의 흘림을 발생, 생명을 위협 하 고 수 있습니다 신속 하 게 리드 복 부 내 패 혈 증; 충격 속도 다음 작은 창 자 anastomoses, 5.5%로 0.3%에서 변화 하 고 0.5%와 26% 저 승 anastomoses1,2사이 상승. 누수를 따라 사망률 때문에 패 혈 증과 죽음 intraabdominal 오염3다음에 빠른 진행의 신속 개시 39%로 높은 수 있습니다. 예방 전략 및 치료 modalities 현재 기준으로 완전히 이해 되지 않습니다 이상 합니다.

현재, anastomotic 치료는 종종에 비해 더 넓게 공부 피부 상처 치유는 상대적으로 가난한 팩스 것을 입증 하는. 치유 하는 것은 일련의 시작 초기 지연 위상으로 겹치는 단계에서 발생 합니다. 장 문 합의 창조 후 0-4 일 동안 지연 위상 세포질 파편의 상처를 지우고 하는 급성 염증 반응에 의해 정의 됩니다. 다음, 3-4 일 동안 fibroblastic 증식과 콜라....

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프로토콜

다음 프로토콜 오클라호마 대학 건강 과학 센터 제도 동물 보호와 사용 위원회 (IACUC)에 의해 승인 되었습니다 고 연구 동물의 사용에 관한 모든 기관 윤리 지침을 준수. 또한, 모든 실험 실험 동물 연구에 관한 제도, 주 및 연방 규정에 따라 수행 했다.

참고:이 프로토콜 사용 했습니다 여성 및 남성 congenic C57BL6/J 쥐에 자란 나이의 12 ~ 72 주에. 이 절차에 사용 되는 모든 마우스 작업 지역 biome에 적응을 하기 전에 적어도 1 주일에 대 한 우리의 비 장벽 시설에서 유지 했다. 작업의 시간에 먹이 동물 허용 되었다 고 우리 구두 기계적 대 장 준비도 절차 이전 직장 홍 사용.

Anastomoses의 창조 1)

  1. 압력솥 수술 도구, 염 분 관개 솔루션 따뜻하고 철저 하 게 70% 에탄올과 모든 요원 표면 청소.
  2. 마 취를 유도 하는 기화 기에 연결 된 유도 상자에 마우스를 놓습니다. 마우스는 진정 될 때까지 1-2 L/분 2-3 %isoflurane 제공 합니다.
  3. 저체온증을 방지 하기 위해가 열 패드와 같이 지구 온난화 장치에 동물을 놓습니다.
  4. 피하 주사 한 0.1 mg/kg buprenorphi....

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결과

수술 후 7 일에는 문 합 잘 치유 될 해야 합니다. 문 합 하기 전에 시간 지점에서 하 고 anastomotic 치유의 단계를 설명 하는 더 나은 7 일 후에 수확 될 수 있습니다. 그림 9에서 조직학 분석 보여줍니다 거리 (콜라겐 trichrome 얼룩에 의해 시각) 응답 중재 평활 근 알파 걸 긍정적인 myofibroblasts. 그러나, 우리는 조직학 분석 결과 마우스, 특히 다시 epithelialization와 anastomotic 사이트에 myofibroblasts의 농도의 정도 사이 다 발견 했다. 우리 보고 사망률 10% 미만, 7 일에 잘 치유 anastomoses 데 마우스를 살아 나 기의 90% 이상 되도록이 절차를 수행 합니다.

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토론

이 절차와 관련 된 병 적/사망률을 최소화 하 고의 성공을 보장 하기 위해 몇 가지 주요 단계가 있습니다. 첫째, 장 조직의 주의 깊은 취급을 확인 하 고 부상을 방지 하기 위해 견인 때 결 노출 내장 회전 돌. 창 자 또는 mesentery에 과도 한 긴장에 부상을 창 자 또는 맥 관 구조와 원인 장 괴 사 문 합의 사이트에서 할 수 있다. 또한, 날카로운 집게 나 이빨으로 겸 해야 사용할 수 없습니다 창 처리 하.

동물의 안락사 내장 회전 또는 무딘 프로브, 구멍 뚫 기에 의해 계획 된 문 합, 사이트에서 별도 창 자에 상해 발생 한다. 우리의 경험에서는, 장 괴 사 또는 상해 이어질 수 있는 복 부 내 패 혈 증 또는 죽음, 그리고 엄청나게 어려운 치료 anastomotic 견본의 복구 크게 증가 염증 반응.

콜론의 transection, 내림차순 콜론의 많은 걸쳐 하지만 주의 하지 transect 장 serosa는 mese.......

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공개 사항

저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
C57BL6/J 마우스Jackson Labs#00664 
Fisherbrand 흡수 언더패드, 20" x 24"Fisher Scientific14-206-62
폴리라인 멸균장, 18" x 24"Busse 병원 일회용품696직사각형 구멍 자르기 
이소테시아 이소플루란헨리 샤인 50033
Fisherbrand 멸균 면 거즈 패드, 4" x 4"Fisher Scientific22-415-469
Puralube 바셀린 안과 연고, 1/8 oz. 튜브Dechra Veterinary ProductsNDC 17033-211-38
Nair 제모 크림교회 & 드와이트 (주)22339-05
Buprenex 부프레노르핀  0.3 mg/mlReckitt Benckiser Pharma IncNDC 12496-0757-5
1 cc 인슐린 주사기, 27  GBecton Dickinson329412
Chloraprep 샴푸MedlineAPL82287
Webcol 알코올 준비 면봉Covidien6818
BioGel PI 수술용 장갑Mö lnlycke 건강 관리ALA42675Z
이빨이 있는 마이크로 집게RobozRS-5150
미세 가위 - 날카로운미세 과학 도구14060-09
직선 톱니 겸자미세 과학 도구11050-10
Castro-Viejo 바늘 드라이버미세 과학 도구12565-14
0.9% 염화나트륨 관개BaxterBHL2F712137도까지 따뜻함; C 사용 전
10 ml 주사기Becton Dickinson309604
4-0 Vicryl 흡수성 꼰 봉합사, 18", PS-2 바늘Henry Schein 
블루 모노필라멘트 봉합사 24" BV-1 바늘Henry Schein 8305H는 일반적으로 이중 암으로 제공됩니다. 중간 지점에서 봉합사를 절단하여 두 개의 사용 가능한 봉합사를 생성합니다.
Cole-Parmer 마이크로 가위, 표준 등급, 스트레이트, 4".콜-파머EW-10818-06
Medline 멸균 윤활 젤리MedlineMDS032273H
6546037

참고문헌

  1. Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
  2. Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomo....

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