꼬마 선 충 모델에서 Aeromonas 감염의 병 인 및 독성 평가

요약

C. 선 충감염 Aeromonas 공부 하 세 다른 실험을 소개 합니다. 이러한 편리한 방법을 사용 하 여, 그것 중 고 Aeromonas 종 내에서 독성을 평가 하기 쉽습니다.

초록

인간 병원 체 Aeromonas 임상적으로 위장염, 상처 감염, 패 혈 증, 및 요로 감염 원인 표시 되었습니다. 대부분의 인간의 질병 4 종의 박테리아와 관련 된 것으로 보고 되었습니다: Aeromonas dhakensis, Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii및 Aeromonas caviae. 모델 생물 꼬마 선 충 은 Aeromonas의 세균 병 인을 공부 하는 우수한 감염 모델을 제공 하는 bacterivore 이다. 여기, 생존, 액체 독성, 그리고 근육 괴 사 분석을 포함 하 여 선 충 C. 모델을 사용 하 여 Aeromonas 감염 연구 3 다양 한 실험을 소개 합니다. Aeromonas 의 독성을 결정 하는 세 가지 방법의 결과 일치 했다. A. dhakensis 는 4 주요 Aeromonas 종 임상 감염을 일으키는 가운데 가장 독성이 있을 표시 했다. 이러한 메서드 및 Aeromonas 종 내에서 독성을 평가 하 고 Aeromonas 감염의 병 인에 대 한 우리의 이해에 기여 하는 편리한 방법이 되도록 표시 됩니다.

서론

인간 병원 체, Aeromonas, 임상적으로 위장염, 상처 감염, 패 혈 증, 및 요로 감염^1,2에 표시 되었습니다. 가장 관련 된 인간의 질병 관련 4 개의 세균성 종 된 것으로 보고 되었습니다: Aeromonas dhakensis, Aeromonas hydrophila, Aeromonas veronii및 Aeromonas caviae ^{2,3 , 4 , 5}. Aeromonas 전염병 중 소프트-조직 감염에에서 발생할 수 있습니다 심각한 병 적 상태와 사망률 인 간에. 메모의 근육 괴 사 연 조직 감염⁶의 가장 심한 형태입니다. 생존의 관찰 및 감염 후 꼬마 선 충 의 근육 괴 사 Aeromonas의 독성을 추측 하는 편리한 방법입니다.

과....

프로토콜

1입니다. 문화 매체의 준비

참고: 솔루션 준비에 대 한 표 1을 참조 하십시오.

1. M9 중간¹²준비, KH₂포₄1.5 g, 나₂HPO₄, 5.66 g 및 이온된 물 500 mL에 NaCl의 2.5 g을 분해. 20 분을 위한 121 ° C에 고압 실내 온도에 냉각 될 때까지 기다립니다 고 1 M MgSO₄ 처음 사용 하기 전에 0.5 mL를 추가 합니다.
2. 선 충 류 성장 매체 (NGM)¹²를 준비 하려면 3g NaCl, 2.5 g 세균성 펩, 및 이온을 제거 된 물 1 리터에 20 g 한 천 분해. 20 분을 위한 121 ° C에 고압 물 욕조에 55 ° C에 냉각 될 때까지 기다립니다 고 1 M CaCl₂의 1 mL, 1 mL의 1 M MgSO₄, 5% 에탄올, 콜레스테롤의 1 mL 및 인산 염 버퍼의 25 mL를 추가 합니다. 잘 섞어 소용돌이 친다.
3. 약 5 mL NGM 각 6 cm 배양 접시에 부 어. 접시의 표면에 거품 생산을 하지 마십시오. 1 박 및 4 ° c....

결과

위에서 설명한 프로토콜에 따라, 4 개의 Aeromonas 긴장에서 독성 구분 하기 쉽습니다. C. 선 충 의 생존 분석 결과 그림 1에 표시 됩니다. C. 선 충 감염 Aeromonas 종, 낮은 높은 순서로 표시 된의 생존 율 했다: A. caviae, A. veronii, A. hydrophila 그리고 A. dhakensis. 독성 및 Aeromonas 종 내 면에서 다양성은, C. 선 충의 생존 율 평균, A. dhakensis감염 벌레 중 가장 높은 사망률을 보였다. A. hydrophila 의 독성은 A. dhakensis (p < 0.01)의 열 등 한. A. dhakensis , A........

토론

C. 선 충 은 bacterivorous 선 충 류는 자연스럽 게 음식 섭취 박테리아의 진화 과정 동안 박테리아에 복잡 한 타고 난 면제를 개발 했다. 유지 하 고 면역을 지 원하는 주요 장기의 2 개는 표 피와 내장^9,13. 표 피와 근육 C. 선 충 의 포유류와 인간⁶소프트-조직 구조를 유사합니다. 이러한 특성 때문에 C. 선 충 은 Aeromonas 감염의 병 인 연구 모델 생물으로 적용 됩니다.

여기, 우리는 임상 관찰⁷4 Aeromonas 종 중 다양 한 독성의 대표 고 상관은 Aeromonas C. 선 충 감염을 조사 하기 위한 세 가지 방법 제시. 이러한 편리한 방법을.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
셰이커 인큐베이터	YIH DER	LM-570R	박테리아 배양
K2HPO4	J.T.Baker	MP021519455	배양 배지 준비
KH2PO4	J.T.Baker	3246-05	배양 배지 준비
Na2HPO4	J.T.Baker	MP021914405	배양 배지 준비
NaCl	SIGMA	31434	배양 배지 준비
MgSO4SIGMA		M7506	배양 배지 준비
한천	Difco	214530	배양 배지 준비
CaCl2	SIGMA	C1016	배양 배지 준비
콜레스테롤	SIGMA	C8503	배양 배지 준비
에탄올	SIGMA	32205	배양 배지 준비
KOH	SIGMA	P5958	배양 배지 준비
6cm 페트리 플레이트	ALPHA PLUS	46	한천 플레이트
준비 96-웰 플레이트	FALCON	353072	액체 분석
세균 펩톤	Affymetrix/USB	AAJ20048P2	배양 배지 준비
효모 추출물	SIGMA	92144	배양 배지 준비
구연산 &황소; H2O	SIGMA	C1909	배양 배지 준비
트리-포타슘 시트레이트&불; H2O	SIGMA	104956	배양 배지 준비
퍼지R	SIGMA	1271008	배양 배지 준비
디소듐 EDTA	SIGMA	E1644	배양 배지 준비
FeSO4• 7 H2O	SIGMA	215422	배양 배지 준비
MnCl2• 4 H2O	SIGMA	221279	배양 배지 준비
ZnSO4• 7 H2O	SIGMA	204986	배양 배지 준비
CuSO4• 5 H2O	SIGMA	C8027	배양 배지 준비
트립톤	SIGMA	16922	배양 배지 준비
현미경 시스템	Nikon	Eclipase Ti 반전	현미경 이미징
과학적인 CCD 카메라	QImaging	Retiga-2000R 패스트 1394	현미경 이미징