이 프로토콜에서 우리 실험 근 유도 사용 하 여 마우스에 새롭게 설계 된 안경, 눈 매개 변수 측정에 안정적이 고 재현 가능한 결과 달성 하기 위한 필요한 기술의 전체 과정을 설명 합니다.
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이 프로토콜에서 우리 실험 근 유도 사용 하 여 마우스에 새롭게 설계 된 안경, 눈 매개 변수 측정에 안정적이 고 재현 가능한 결과 달성 하기 위한 필요한 기술의 전체 과정을 설명 합니다.
근 시의 murine 모델 비교적 쉬운 유전자 조작으로 인해 근 연구를 위한 강력한 도구를 수 있습니다. 동물에서 근 시를 유발 하는 한 가지 방법은 주 (유도 하는 렌즈 근 시 임) 눈 앞에서 렌즈 뺀 분명 넣어 하는 것입니다. 그러나, 유도 및 평가 대 한 현존 프로토콜 연구실 실험실에서 다릅니다. 여기, 우리가 새로 설계 하는 마우스를 사용 하 여에 임 안경 유도를 매우 실용적이 고 재현 가능한 방법을 설명 합니다. 방법 수정 하면서 마우스 눈 앞 안정적으로 렌즈 수 있습니다 국 소 또는 청소를 위해 이륙 하는 렌즈 관리 마약. 표현 형 강력 하 고 효율적 이며 분산 작습니다. 여기 설명 하는 방법은 마우스는 실험에 대 한 가능한 기간 연장 이유 후 바로 적용할 수 있습니다. 우리는 또한 준 기술 굴절 및 축 길이 측정에서 재현 가능한 결과 달성 하기 위한 조언. 우리 여기에서 설명 하는 단계별 프로토콜 희망과 상세한 기사 myopia 근 시 실험을 더 원활 하 게 수행 하 고 데이터 비교 연구소에서 연구원을 도울 수 있다.
근 시의 보급 최근에 극적으로 증가 했다, 그것의 발병 및 진행의 메커니즘은 여전히 크게 unknow1. 근 시의 가장 특징적인 표현 형의 축 길이 (알), 망막 합병증 이나 심지어 실명2에 대 한 위험 증가 신장 이다. 근 시의 병 인을 이해 하 고 효과적인 치료법을 개발에 강력한 근 시 동물 모델 및 안정적인 표현 형 평가 필요 하다.
짧게, 두 가지 방법을 유도 하는 동물에서 근 시 상태에 대 한 존재: 모양 박탈 근 시 (FDM)와 렌즈 유도 근 (임)3. 전 눈 앞 디퓨저를 장소 또는 근 표현 형에 따른 안구의 정상적인 발전을 좌우 하는 이미지를 보이지 않게 하기 위해 눈 꺼 풀 sutures. 렌즈는 망막 뒤에 초점을 이동 하는 눈 앞에 마이너스 후자의 장소. 망막 초점의 변화를 감지 하 고 망막 및 초점을 다시 맞추고 하 안구 elongates. FDM, 눈 꺼 풀 닫히거나 디퓨저, 눈 앞에서 수정 되었습니다 후 거의 추가 정비 필요 합니다. 임, 렌즈 투명 유지 하기 위해 청소를 위해 이륙 해야 합니다. 따라서, FDM 기술적으로 유도를 상대적으로 쉽습니다. 그러나, FDM과 임의 메커니즘은 서로 다른....
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모든 절차는 게이오 대학의 학부의 동물 연구 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 ARVO 문을 안과 및 비전 연구, 동물 실험에서 게이오에 기관 지침에 동물의 사용에 대 한 준수 대학, 그리고 동물 연구: 연구에 있는 동물의 사용에 대 한 보고의 Vivo 실험 (도착) 지침.
1. 쥐에 대 한 안경 조립
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에 먼저, 모든 필요한 부품 (그림 1a) 준비 하는 경우 확인 합니다. 조립된 안경의 작품의 예는 그림 1b에서 표시 됩니다. 프레임과 너트의 본체를 제외한 모든 다른 부품은 각 마우스에 대 한 일회용입니다. 완성 된 안경의 집합 그림 1 c에 표시 됩니다. 다른 연령대와 마우스에 맞게 두 프레임 사이의 각도 변경 합니다.
굴절 측정의 예는 그림 2a에 표시 됩니다. 이것은 3 주 p21에서 시작-30 D 렌즈에 의해 유도 된 마우스 눈 이다. Note 마우스는 바로 카메라9앞을 보고 하는 것을 의미 하 고 .......
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있는지 확인 하려면 마우스 머리에 안정적으로 고정 될 안경,이 프로토콜의 여러 단계 큰 관심을 지불 될 필요가 있다. 과 치과 접착제 시스템을 사용 하기 전에 완전히 제거 되어야 합니다. 두개골에 피는 또한 주의 정리 될 필요가 있다. 약간 미세 하 게 조정 하는 것은 직후에 접착제의 응용 프로그램 허용, 접착 시스템을 건조 하기 전에 자주 메모리를 이동 하지 마십시오. 신중 하 게, 접착 시스템의 지시에 따라 특히 최종 혼합물의 각 성분의 비율. 때 마우스를 잡고 안경 또는 수술 후 후속 측정의 유지 보수 동안 할 파악 하지 마우스의 시체와 함께 스틱 함께. 두개골 지팡이 사이 상대 운동 막대기의 아래로 떨어지는의 가장 빈번한 원인입니다. 적절 한 수술 및 장악 기술, 개인 막대기를 드롭다운 수 20 개인을 포함 하 여 3 주 실험에서 1 미만 것입니다.
머리카락과 음식 찌 꺼 기는 눈과 렌즈 사이의 간격으로 풀 수 있습니다. 이것은 렌즈의 투명도 영향을 미칠 뿐만 아니라 또한.......
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마우스 안경의 디자인 특허 (no. 201741349 응용 프로그램)에 대 한 적용 되었습니다.
우리는 SDOCT, 굴절 및 각 막 곡률, 3 차원 프레임 데이터, M. 미 야우 치; 재현 씨 Sanshouo의 측정에 대 한 조언 F. Schaeffel에 대 한 조언을 몬태나 Pardue 감사 합니다. K. Tsubota; Y. 다나카; S. 콘도; C. 마사다; M. 부; Y. 미; Y. 하기와 라; A. 이시다; Y. 토 미타; Y. Katada; E. Yotsukura; K. 다카하시; 그리고 중요 한 면담을 위해 Y. 왕입니다. 이 작품은 과학적 연구에 대 한 (KAKENHI, 숫자 15 K 10881) 교육, 문화, 스포츠, 과학 및 기술 (문 부 과학성)에서 TK. 보조금 inAid에 의해 지원 되었다 이 작품에서 Tsubota 실험실, Inc. (일본 도쿄) 근 시 연구에 대 한 권한을 부여 하 여 지원 됩니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 나사 | NBK | SNZS-M1.4-10 | |
| 와셔 | MonotaRO | 42166397 | |
| 너트 | MonotaRO | 42214243 | |
| 스틱 | DMM Make | none | 은 인증자가 설계하고 DMM에서 임대한 3D 프린터로 출력합니다. |
| 프레임 | DMM Make | 인증자가 설계하지 않고 DMM Make에서 임대한 3D 프린터로 출력합니다. | |
| 렌즈 | 레인보우 콘택트 렌즈 | 없음 | 회사에서 마우스 사용을 위해 사용자 정의 |
| cyanoacrylate 접착제 | OK MODEL | MP 20g | |
| 치과 접착제 수지 시멘트 | SUN MEDICAL | 슈퍼 본드 | 에는 마우스 두개골 골막을 제거하는 데 사용되는 에칭 액체가 포함되어 있습니다 |
| 광 굴절기 | Steinbeis Transfer Center | 없음 | University of Tü의 Frank Schaeffel 박사가 설계하고 제공합니다. bingen |
| 스펙트럼 도메인 OCT | Leica | R4310 | |
| 트로피카 아미드, 페닐 에프린 염산염 용액 | Santen | Mydrin-P | |
| midazolam | Sandoz K.K. | 마취제 | SANDOZ |
| Orion Corporation | 취제 | ||
| butorphanol tartrate | Meiji Seika Pharma | Vetorphale | 마취제 성분 |
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