세포 기반 분석 결과 의해 인간의 혈 청 안티-aquaporin-4 면역 글로불린 G 검출

요약

세포 기반 분석 결과 세럼 안티-aquaporin-4 면역 글로불린 g.를 검출 하기 위하여 널리 사용 방법은 이 메서드는 임상 진단 및 neuromyelitis 광학 스펙트럼 장애의 과학적 연구에 적용할 수 있습니다.

초록

안티-aquaporin-4 (AQP4) 면역 글로불린 G (IgG) neuromyelitis optica 스펙트럼 장애 (NMOSD)에 대 한 핵심 진단 바이오 마커 이다. 세포 기반 분석 결과 (CBA) 높은 감도와 특이성 인간 혈 청에 안티 AQP4 IgG를 감지 하는 널리 사용 되는 방법 이다. 간단히, 세럼 안티 AQP4 IgG AQP4 페 셀은 바이오 칩에 고정 후 fluorescein 붙인 이차 항 체에 의해 감지에 의해 캡처됩니다. 형광 현미경 검사 법은 형광, 시각화를 활용 하 고 형광의 강도 두 개 이상의 경험이 풍부한 임상에서 평가. NMOSD의 최종 진단 안티 AQP4 IgG 검출 결과, 임상 발현 및 neuroradiological 발견의 조합에 따라 만들 수 있습니다. 이전 연구에 따르면 CBA는 더 과민 하 고 특정 다른 안티 AQP4 IgG 탐지 방법 보다 그리고 임상 진단 및 NMOSD의 연구에 적용할 수 있습니다. 메서드는 제한; 예를 들어 세럼 안티 AQP4 IgG titers를 평가 하는 국제 규모는 여전히 부족 합니다. 여기, 인간 혈 청 안티 AQP4 IgG 감지 CBA를 사용 하 여 상세한 프로토콜을 설명 합니다.

서론

혈 청 AQP4 IgG neuromyelitis optica 스펙트럼 장애 (NMOSD)¹코어 진단 바이오 마커 이다. 세포 기반 분석 결과 (CBA)은 높은 감도와 특이성 널리 안티-AQP4 IgG 감지 방법입니다. 여기, CBA에 대 한 상세한 프로토콜 소개 된다.

AQP4, 물 채널 단백질 막에 걸친 6 단위 있으며 수성 하나를 둘러싼 두 개의 헬리컬 도메인²기 공. 안티 AQP4 IgG를 대상 주로 이다³의 endfeet에 있는 AQP4 바인딩을 통해 NMOSD의 병 인에서 포함 된다. 그것은 안티-AQP4 IgG는 긍정적인 NMOSD 환자⁴의 약 2/3에 표시 되었습니다. NMOSD에 대 한 가장 최근의 국제 진단 기준, 안티-AQP4 IgG 코어 진단 바이오 마커⁵간주 됩니다. 이와 관련, 그것은 인간의 혈 청을 감지 하는 신뢰할 수 있는 프로토콜을 설정 하는 중요 한 안티-AQP4 IgG NMOSD의 임상 진단을 용이 하 게 하 고.

현재, 다양 한 안티-AQP4 IgG....

프로토콜

이 절차의 첫 번째 병원 길 림 대학 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 고 약 1500 과목에서 수행 되었다.

1. 환자 등록 및 혈액 샘플 컬렉션

1. 아래 열거 된 수석 불만과 증상 병원 환자에 게 안티 AQP4 IgG 혈 청의 실험실 탐지를 적용 합니다. 또한 검 진을 수행 합니다.
   
   광학 신경 염: 환자 시각 필드의 손실 및 시력의 감소와 같은 시각적인 적자와 고통을.
   급성 척 수염: 환자 마비, 감각 적자와 자율 기능 장애가 발생할 수 있습니다.
   지역 postrema 증후군: 환자의 설명할 수 없는 딸 꾹 질, 구역 질 또는 구 토 증상이 있을 수 있습니다.
   급성 brainstem 증후군: Brainstem 병 변 다른 증상과 병 변의 위치에 따라 실제 표시 될 수 있습니다.
   증상 narcolepsy 또는 NMOSD-전형적인 diencephalic MRI 병 변과 급성 diencephalic 임상 증후군.
   NMOSD-전형적인 뇌 병 변과 증상이 뇌 증후군.
   
   참고: NMOSD⁵에 대 한 국제 합의 진단 기준에 따라 NMOSD의 진단 할 수 있다 경우에 환자는 혈 청 안티-AQP4 igg가 양성 및 핵심 ....

결과

여기에 설명 된 절차를 사용 하 여, 혈 청 igg가 특정 안티-AQP4 감지입니다. 절차 동안, 미리 희석된 샘플, 긍정적인 통제 및 부정적인 제어 transfected untransfected 영역 (그림 2)를 포함 하는 반응 필드에 추가 되었습니다. Transfected 지역에 부정적인 컨트롤의 형광은 주로 봄에는 (그림 3)에 transfected 세포에 이차 항 체의 불특정 바인딩 표시. 균질 약한 형광 표시 (그림 3) 했다. 긍정적인 컨트롤, 안티-AQP4 항 체 반응 필드에 추가 되었습니다. (그림 4)의 transfected 세포에 AQP4-m 1에 안티 AQP4 IgG의 특정 바인딩 표시 transfected 영역에서 강한 형광 관찰 되었다.......

토론

우리는 안티-AQP4 IgG 인간의 혈 청에서 검출 하는 광범위 하 게 액세스할 수 방법을 설명 했습니다. 안티 AQP4 IgG는 밀접 하 게 관련이 NMOSD, 그리고 신뢰할 수 있는 안티-AQP4 IgG 탐지 방법을 구축 하는 것는 NMOSD의 임상 진단에 대 한 중요 한. 첫째, 안티-AQP4 IgG NMOSD에 대 한 특정 이다. 다 발성 경화 증 또한 중앙 신경의 면역 중재 하는 질병 이며, NMOSD¹²와 많은 유사점을 공유. 그러나, 안티-AQP4 IgG만 NMOSD¹³에 긍정적 이다. 둘째, 안티-AQP4 IgG NMOSD 환자 중 일반적 이다. NMOSD 환자의 약 2/3는 세럼 안티 AQP4 igg가 양성⁴. 셋째, 가장 최근의 진단 기준 NMOSD 세럼 안티-AQP4 기반에 대 한 IgG 테스트⁵. 함께 찍은, 세럼 안티 AQP4 IgG 탐.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
Anti-aquaporin-4 IIFT	Euroimmun	FA 1128-2005-50	AQP4-M1 transfected 및 untransfected EU 90 세포로 코팅된 바이오칩 슬라이드, 플루오레세인 표지된 anti-human IgG, 양성 대조군으로서의 anti-AQP4 항체, 항체 음성 샘플, PBS pH 7.2, Tween 20 및 임베딩 배지용 염을 포함합니다.
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