설치류 왼쪽된 pneumonectomy 폐 고혈압 연구에 귀중 한 기술 이다. 여기, 선물이 쥐 pneumonectomy 절차와 최소한의 사망률 및 사망을 보장 하기 위해 수술 후 치료를 설명 하는 프로토콜.
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방법 논문
설치류 왼쪽된 pneumonectomy 폐 고혈압 연구에 귀중 한 기술 이다. 여기, 선물이 쥐 pneumonectomy 절차와 최소한의 사망률 및 사망을 보장 하기 위해 수술 후 치료를 설명 하는 프로토콜.
이 프로토콜에서 우리 세부 올바른 절차 단계 및 성공적으로 수행 하는 왼쪽된 pneumonectomy 고 monocrotaline (MCT)의 추가 관리와 쥐에서 PAH를 유도 필요한 조치 또는 SU5416 (Sugen). 우리는 또한 연구에 일반적으로 사용 되는 다른 PAH 모델을 이러한 두 가지 모델을 비교 합니다. 지난 몇 년 동안, 동물 PAH 모델의 초점 plexiform 병 변, 있는 증가 폐 혈의 역할 이라고 여겨진다 심각한의 개발에 중요 한 방 아 쇠로 폐의 angioproliferation의 메커니즘을 공부 쪽으로 이동 했습니다. 관 리 모델링입니다. 증가 폐 흐름의 가장 유망한 설치류 모델 중 하나입니다 일방적인 왼쪽된 pneumonectomy MCT 또는 Sugen의 "두번째 명 중"와 함께. 왼쪽된 폐의 제거 및 사나운 폐 혈액의 흐름과 혈관 개장 이끌어 낸다. 현재, 쥐에 pneumonectomy 수술의 더 상세한 절차가입니다. 이 문서는 pneumonectomy 수술 및 남성 Sprague-Dawley 쥐에 수술 치료의 단계별 프로토콜을 자세히 설명합니다. 간단히, 동물 마 취 하 고 가슴을 열. 일단 왼쪽된 폐 동맥, 폐 정 맥, 그리고 기관지는 시각, 그들은 출혈 하 고 왼쪽된 폐 제거 됩니다. 가슴 다음 폐쇄 하 고 복구 하는 동물. 혈액 순환 우측 폐에만 강제로. 이 혈관 압력이 증가 하는 진보적인 개장 하는 작은 폐 동맥의 폐색 리드. MCT 또는 Sugen의 두 번째 히트 사용된 1 주일 후 수술 내 피 기능 장애를 유발 하는 것 이다. 폐 및 내 피 기능 장애에서 증가 혈액 흐름의 조합 하면 심각한 PAH. 이 절차의 기본 한계가 이다 일반적인 외과 기술을 요구 한다.
폐 동맥 고혈압 (PAH)는 진보 및 치명적인 질병 폐 혈, 혈관 저항 증가, 염증, 및 개장 하는 작은 폐 혈관1의 증가 의해 특징 이다. 이 리 모델링을 일반적으로 방해 하 고 작은 폐 동맥, vasoconstriction을 일으키는 원인이 되 고 우 심 실 afterload2증가 없애다 혈관 병 변 발생 합니다. PAH의 몇 가지 성공적인 약리 치료 존재; 결과적으로, PAH 관련 사망률 남아 높은. Angio 확산을 증가 폐 혈의 역할 간주 됩니다 폐의 개발에 중요 한 방 아 쇠로 혈관의 메커니즘으로 폐 고혈압의 pathobiology에 대 한 연구의 초점을 이동 하는 최근, 3,4리 모델링.
폐 고혈압의 동물 모델은 질병의 이상 설명 하 고 약물, 세포, 유전자, 및 단백질 배달을 위한 플랫폼으로 봉사 하는 데 도움이 중요 한 통찰력을 제공 합니다. 전통적으로, 만성 저 산소 증 유발 폐 고혈압 모델 및 MCT 폐 상해 모델 메인 모델 PAH 이상5를 공부 하는 데 사용 되었습니다. 그러나, 그들은 인간 환자에서 설명 하는 변경에 비해 리 모델링의 증가 폐 혈액 흐름과 neointimal 패턴을 생산 하기 위해 충분 하지 않습니다. 만성 저 산소 증 모델에서 설치류 angio 말살 하지 않고 hypoxic vasoconstriction 혈관 벽의 두껍게 작은 폐 혈관6의. 또한, hypoxia 조건은 이다 가역. 따라서, hypoxia 모델은 또한 심각한 PAH를 생산 하기에 충분 하지. MCT 폐 상해 모델은 좀 내 피 기능 장애를 유도 하지만 심각한 주요 PAH와 인간에서 발견 복잡 한 혈관 obliterative 병 변 쥐2개발 하지 않습니다. 또한, MCT 치료 쥐 PAH2아닌 MCT 유도 폐 독성, veno 폐색 간 질환과 심근 염에서 죽는 경향이 있다. 마지막으로, 혼자 pneumonectomy 시간의 짧은 기간에 작은 폐 혈관 병 변 neointimal를 생산 하기 위해 충분 하지 않습니다. Pneumonectomy, 후 폐 동맥 압력7에서 최소한의 상승이 이다. 인간에서는, pneumonectomy는 contralateral 폐는 건강 한7때 잘 용납입니다.
그러나, MCT 또는 Sugen와 함께 왼쪽된 pneumonectomy 절차 증가 폐 혈액의 흐름을 모방 하 고 폐 혈관 개장에 심한 임상 PAH 비교 결과 있기 때문에 유리 하다. pneumonectomy는 1 엽, 왼쪽된 폐에 보다는 4 개의 돌출부 오른쪽에 수행 됩니다. 오른쪽 폐는 제거 하는 경우 동물 것 호흡기 부족에 대 한 보상 수 없습니다. Pneumonectomy-MCT 모델에 neointimal 패턴 개장 운영-동물 치료7의 90% 이상에서 발전 한다. 마찬가지로, Sugen 및 pneumonectomy 결과 심각한 PAH, angio obliterative 혈관 병 변, 증식, apoptosis, 및 RV 부전8특징의 조합입니다. 또한 왼쪽된 pneumonectomy 절차는 PAH를 유도 하기 위해 다른 수술에 비해 유리 합니다. 이전 쥐 폐에 폐 혈 류 량 증가를에서 설명된 모델 aorto caval 션트 또는 하-폐 동맥 문 합 포함 됩니다. 이 모델은 매우 복잡 한7,9,,1011. Aorto-caval 션트를 수행 하려면 동물의 복 부를 열 수 있다. 우회로 그냥 폐 대신 모든 복 부 장기에 혈액 흐름을 증가 하는 복 부 대동맥에 배치 됩니다, 그리고 따라서, PAH 개발을 훨씬 더 오래 걸립니다. 또한, 그것 어렵습니다 우회로 통해 혈액의 흐름을 결정 하는 pneumonectomy와 혈액 흐름 나머지 폐 복식을 하는 반면. 하-폐 동맥 문 합은 또한 많은 합병증을 있다. 혈관에 동맥 혈액의 흐름 문 합과 출혈의 혈전 증으로 이어질 수 있습니다. Aorto-caval 션트 처럼는 문 합을 통해 혈액의 흐름을 결정 하기가 어렵습니다. 또한, 혈관 외과 기술을 요구 하는 비싸고 어려운 기법입니다. 일방적인 왼쪽된 pneumonectomy 혈액 흐름과 contralateral 폐에 전단 응력을 두 배로 하 고, MCT 또는 Sugen와 함께, 내 피 세포 손상8, 는 PAH의 전형적인 hemodynamic 및 histopathological 결과 발생 12.
이 원고 참신 왼쪽된 pneumonectomy 쥐 및 이러한 모델의 기술 및 생리 적 과제의 토론의 매우 상세 하 고 포괄적인 수술 프로토콜에서 제공 됩니다. 이 프로토콜은 현재 사용할 수 없습니다, 때문에 많은 조사 모델은 너무 어려운 사용 믿습니다. 왼쪽된 pneumonectomy 수행한 조사 높은 사망률과 병 적 속도 관련 된 동물, 과학적인 평가 타협의 불필요 한 손실과 직면. 대신, 많은 PAH를 만들려고 MCT 주입,-만성 저 산소 증, 또는 그냥 pneumonectomy 클래식 모델을 사용 합니다. 그러나,이 모델은 왼쪽된 pneumonectomy와 MCT 또는 Sugen의 조합 보다 훨씬 효과적입니다. 이 문서의 주된 목적은 쥐에서 왼쪽된 일방적인 pneumonectomy에 대 한 먼저 상세 하 고 재현할 수 수술 프로토콜을 제공 하 여 PAH의 최고의 외과 모델 제공입니다. MCT 또는 SU5416 왼쪽된 일방적인 pneumonectomy 위한이 프로토콜을 결합 수 사관이 치명적인 질병의 병 인 연구 심각한 PAH의 훨씬 더 효과적이 고 임상으로 관련 된 모델을 만들 수 있습니다.
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아래 설명 하는 절차는 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)는 아이 칸의 학부의 마운트 시 나이에 의해 승인 되었습니다. 모든 쥐 시내산 "관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 가이드" 준수 인도적인 치료를 받았다.
1입니다. 수술을 위한 준비
2. 준비 및 쥐의 삽 관 법
3입니다. 살 균 환경 준비
4. 왼쪽된 Pneumonectomy 수술
5. 수술 후 회복
6. 관리의 "두 번째" MCT 또는 Sugen
7. 터미널 수확
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허용된 분류 시스템에 따라 폐 고혈압 정상 폐 동맥 압력 (즉, 25 mm Hg)의 상한 초과 평균 폐 동맥 압력 (mPAP)에 의해 특징입니다. Pneumonectomy + MCT 그룹에서 심각한 PAH 하루 21 증가 mPAP (그림 1)에 의해 개발. mPAP 수식에 의해 계산 됩니다.

수축 기 및 diastolic RV 및 PA 압력 장점은 태양광 시스템에 연결 된 주 폐 동맥에서 압력 카 테 터로 측정 했다. 평균 폐 동맥 압력 (mPAP) 위의 수식을 사용 하 여 계산 됩니다. 컨...
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PAH-영향을 받는 폐 혈관 확산 neointimal 형성 및 폐 동맥의 말살 심각한 hemodynamic 변경, 오른쪽 심 실 실패 및 초기 사망률7,8발생할. 혈관 벽에 변화 저항 동맥 및 오른쪽 심 실 압력 증가 혈액 흐름을 증가. PAH의 초기 단계에서 일반적으로 MCT 또는 Sugen, 관리 후 3 주 쥐 개발 중간 비 대, adventitial 두껍게 그리고 작은 동맥 arterioles의 muscularization 같은 일반적인 조직학 변화. 이러한 변경 내용을 잠재적으로 되돌릴 수 있습니다. 나중 단계에서 MCT 또는 Sugen, 관리 후 약 6-8 주 쥐의 폐는 neointimal와 방해 하 고 매체 및 작은 폐 동맥 arterioles, 세포 내 확산을 없애다 plexiform vasculopathy와 동심 내 섬유 증입니다. Plexiform 병 변은 일반적으로 내 피 세포와 myofibroblasts ...
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저자 아무 잠재적인 이해 충돌 있다.
이 원고는 NIH에 의해 지원 되었다 7R01 HL083078-10 미국 심장 협회 AHA-17SDG33370112와는 국립 연구소의 건강 NIH K01 HL135474와이 스 하 고는 국립 연구소의 건강 R01 HL133554 L.H.에 부여 부여
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| BD 1 mL 인슐린 주사기 | BD | 329652 | 수술 후 buprinex 투여 |
| 바이오 젤 외과 의사 수술 장갑 | 바이오 젤 | 30460-01 | 멸균 수술용 장갑 |
| Wahl BravMini+ 트리머 | Braintree Scientific | CLP-41590 P | 면도 수술 부위 |
| SU5416 | Cayman Chemical | 13342 | Sugen |
| 삽관 용 | 광섬유 조명기 | Cole-Parmer | EW-41723-02 |
| Surgipro II 4-0 봉합 | Covidien | VP831X | 폐쇄 늑간 근육 |
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