쥐에 폐 고혈압의 모델로 Monocrotaline 또는 Sugen와 함께 왼쪽된 Pneumonectomy

요약

설치류 왼쪽된 pneumonectomy 폐 고혈압 연구에 귀중 한 기술 이다. 여기, 선물이 쥐 pneumonectomy 절차와 최소한의 사망률 및 사망을 보장 하기 위해 수술 후 치료를 설명 하는 프로토콜.

초록

이 프로토콜에서 우리 세부 올바른 절차 단계 및 성공적으로 수행 하는 왼쪽된 pneumonectomy 고 monocrotaline (MCT)의 추가 관리와 쥐에서 PAH를 유도 필요한 조치 또는 SU5416 (Sugen). 우리는 또한 연구에 일반적으로 사용 되는 다른 PAH 모델을 이러한 두 가지 모델을 비교 합니다. 지난 몇 년 동안, 동물 PAH 모델의 초점 plexiform 병 변, 있는 증가 폐 혈의 역할 이라고 여겨진다 심각한의 개발에 중요 한 방 아 쇠로 폐의 angioproliferation의 메커니즘을 공부 쪽으로 이동 했습니다. 관 리 모델링입니다. 증가 폐 흐름의 가장 유망한 설치류 모델 중 하나입니다 일방적인 왼쪽된 pneumonectomy MCT 또는 Sugen의 "두번째 명 중"와 함께. 왼쪽된 폐의 제거 및 사나운 폐 혈액의 흐름과 혈관 개장 이끌어 낸다. 현재, 쥐에 pneumonectomy 수술의 더 상세한 절차가입니다. 이 문서는 pneumonectomy 수술 및 남성 Sprague-Dawley 쥐에 수술 치료의 단계별 프로토콜을 자세히 설명합니다. 간단히, 동물 마 취 하 고 가슴을 열. 일단 왼쪽된 폐 동맥, 폐 정 맥, 그리고 기관지는 시각, 그들은 출혈 하 고 왼쪽된 폐 제거 됩니다. 가슴 다음 폐쇄 하 고 복구 하는 동물. 혈액 순환 우측 폐에만 강제로. 이 혈관 압력이 증가 하는 진보적인 개장 하는 작은 폐 동맥의 폐색 리드. MCT 또는 Sugen의 두 번째 히트 사용된 1 주일 후 수술 내 피 기능 장애를 유발 하는 것 이다. 폐 및 내 피 기능 장애에서 증가 혈액 흐름의 조합 하면 심각한 PAH. 이 절차의 기본 한계가 이다 일반적인 외과 기술을 요구 한다.

서론

폐 동맥 고혈압 (PAH)는 진보 및 치명적인 질병 폐 혈, 혈관 저항 증가, 염증, 및 개장 하는 작은 폐 혈관¹의 증가 의해 특징 이다. 이 리 모델링을 일반적으로 방해 하 고 작은 폐 동맥, vasoconstriction을 일으키는 원인이 되 고 우 심 실 afterload²증가 없애다 혈관 병 변 발생 합니다. PAH의 몇 가지 성공적인 약리 치료 존재; 결과적으로, PAH 관련 사망률 남아 높은. Angio 확산을 증가 폐 혈의 역할 간주 됩니다 폐의 개발에 중요 한 방 아 쇠로 혈관의 메커니즘으로 폐 고혈압의 pathobiology에 대 한 연구의 초점을 이동 하는 최근, ^3,4리 모델링.

폐 고혈압의 동물 모델은 질병의 이상 설명 하 고 약물, 세포, 유전자, 및 단백질 배달을 위한 플랫폼으로 봉사 하는 데 도움이 중요 한 통찰력을 제공 합니다. 전통적으로, 만성 저 산소 증 유발 폐 고혈압 모델 및 MCT 폐 상해 모델 메인 모델 PAH 이상⁵를 공부 하는 데 사용 되....

프로토콜

아래 설명 하는 절차는 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)는 아이 칸의 학부의 마운트 시 나이에 의해 승인 되었습니다. 모든 쥐 시내산 "관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 가이드" 준수 인도적인 치료를 받았다.

1입니다. 수술을 위한 준비

1. 고압 쿨 리-마요 곡선가 위 (대 위), 직선 아이리스가 위 (작은 위), 맥 퍼 슨 욕실이 아이리스가 위 (뒤가 위), Wangensteen 조직 집게 (겸 자 atraumatic), 제럴드 조직 겸 자, 일반 와이어 검 (자기 유지 견인), 작은 그릇 cauterizer, 거 즈, 더블 엔드 프로브, 얇은 혈관 바늘 홀더, 그리고 마이크로-제이콥 슨 모기 hemostatic 집게 (모기).

2. 준비 및 쥐의 삽 관 법

1. 6-8 주 오래 된 남성, Sprague-Dawley 쥐, 수술 전에 30 분 buprenorphine 진통 (0.1 mg/kg)의 피하 주사를 관리 합니다.
2. 챔버는 쥐 제대로 마 취 때까지 isoflurane 4%와 3-4 분 동안 산소 (1 L/min)에 노출에 쥐를 개별적으로 배치 (즉, 무 의식, 호흡을 천천히, 그리고 만지거나 소리에 응답).
....

결과

허용된 분류 시스템에 따라 폐 고혈압 정상 폐 동맥 압력 (즉, 25 mm Hg)의 상한 초과 평균 폐 동맥 압력 (mPAP)에 의해 특징입니다. Pneumonectomy + MCT 그룹에서 심각한 PAH 하루 21 증가 mPAP (그림 1)에 의해 개발. mPAP 수식에 의해 계산 됩니다.

수축 기 및 diastolic RV 및 PA 압력 장점은 태양광 시스템에 연결 된 주 폐 동맥에서 압력 카 테 터로 측정 했다. 평균 폐 동맥 압력 (mPAP) 위의 수식을 사용 하 여 계산 됩니다. 컨.......

토론

PAH-영향을 받는 폐 혈관 확산 neointimal 형성 및 폐 동맥의 말살 심각한 hemodynamic 변경, 오른쪽 심 실 실패 및 초기 사망률^7,8발생할. 혈관 벽에 변화 저항 동맥 및 오른쪽 심 실 압력 증가 혈액 흐름을 증가. PAH의 초기 단계에서 일반적으로 MCT 또는 Sugen, 관리 후 3 주 쥐 개발 중간 비 대, adventitial 두껍게 그리고 작은 동맥 arterioles의 muscularization 같은 일반적인 조직학 변화. 이러한 변경 내용을 잠재적으로 되돌릴 수 있습니다. 나중 단계에서 MCT 또는 Sugen, 관리 후 약 6-8 주 쥐의 폐는 neointimal와 방해 하 고 매체 및 작은 폐 동맥 arterioles, 세포 내 확산을 없애다 plexiform vasculopathy와 동심 내 섬유 증입니다. Plexiform 병 변은 일반적으로 내 피 세포와 myofibroblasts .......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
외과 용 블레이드	Bard-Parker	371215	절개
Forane (Isoflurane, USP)	Baxter	NDC 10019-360-40	마취
BD Angiocath 16 G	BD	381157	삽관 튜브, 흉관
BD 1 mL 인슐린 주사기	BD	329652	수술 후 buprinex 투여
바이오 젤 외과 의사 수술 장갑	바이오 젤	30460-01	멸균 수술용 장갑
Wahl BravMini+ 트리머	Braintree Scientific	CLP-41590 P	면도 수술 부위
SU5416	Cayman Chemical	13342	Sugen
삽관 용	광섬유 조명기	Cole-Parmer	EW-41723-02
Surgipro II 4-0 봉합	Covidien	VP831X	폐쇄 늑간 근육
Polysorb 5-0 봉합사	Covidien	GL-885	폐쇄 피부
중간 슬라이드 상단 유도 챔버	DRE 수의학	12570	산소 및 이소 플루란 전달
DRE 컴팩트 150 설치류 마취 기계	DRE 수의학	373	산소 및 이소플루란 전달
소형 용기 소작	미세 과학 도구	18000-00	출혈을 최소화하는 소작
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마우스 발 맥박 산소 농도계 센서	Kent Scientific	SPO2-MSE	맥박 산소 농도계 및 심박수 발 센서
PhysioSuite RightTemp	Kent Scientific	PS-02	온도 패드
PVP 준비 솔루션	Medline	MDS093944	수술 부위 청소
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