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방법 논문

축축한 억제 및 재생을 연구하는 쥐 모델의 안면 신경 수술

7.4K 조회수

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DOI:

10.3791/59224

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2020년 5월 5일

이 논문에서

요약

이 프로토콜은 부상의 다양한 유도 패턴의 설명을 포함하여 쥐 모델에서 안면 신경 수술에 대한 재현 가능한 접근 방식을 설명합니다.

초록

이 프로토콜은 쥐 얼굴 신경 손상 모델에서 축축한 재생 및 억제를 연구하는 일관되고 재현 가능한 방법을 설명합니다. 얼굴 신경은 두개내 세그먼트에서 시간외 코스에 이르기까지 전체 길이를 따라 조작 할 수 있습니다. 재생 속성의 실험 연구에 사용 되는 신경 부상의 세 가지 기본 유형이 있다: 신경 호감, transection, 그리고 신경 간격. 가능한 내정간섭의 범위는 신경의 외과 조작, 신경 성 시약 또는 세포의 납품, 및 중앙 또는 말기 조작을 포함하여 광대합니다. 신경 재생을 연구하기위한이 모델의 장점은 단순성, 재현성, 종 간 일관성, 쥐의 신뢰할 수있는 생존율, 그리고 뮤린 모델에 비해 증가 된 해부학 적 크기를 포함한다. 그것의 한계는 마우스 모형 과 쥐의 최상급 재생 능력에 비해 더 한정된 유전 조작을 관련시킵니다, 안면 신경 과학자는 신중하게 복구를 위한 시간 점을 평가하고 더 높은 동물과 인간 연구 결과에 결과를 번역할지 여부를 이렇게. 안면 신경 손상에 대한 쥐 모델은 신경 재생의 해석 및 비교를 위한 기능적, 전기 생리학적 및 조직체학적 파라미터를 허용합니다. 그것은 인간 환자에 있는 안면 신경 상해의 파괴적인 결과의 이해 그리고 처리를 발전시키는 쪽으로 엄청난 잠재력을 자랑합니다.

서론

머리와 목 부위의 두개골 신경 손상은 선천성, 전염성, 특발성, 난성성, 외상성, 신경학적, 종양학, 또는 전신 병인에 이차적일 수 있다1. 두개골 신경 VII, 또는 안면 신경은 일반적으로 영향을 받습니다. 안면 신경 기능 장애의 부각은 매년 100,000명의 사람들 당 20에서 30에 영향을 미치기 때문에 중요할 수 있습니다2. 안면 신경의 주요 운동 가지는 측두엽, zygomatic, 볼, 한계 하악골 및 자궁 경부 가지; 관련된 가지에 따라, 결과는 구강 무능력 또는 침을 흘리거나, 각막 건조, ptosis, dysarthria, 또는 안면 비대칭2,,3에이차 적인 시야 방해를 포함할 수 있습니다. 장기 이환율은 synkinesis의 현상을 포함, 또는 하나의 얼굴 근육 그룹의 무의식적인 운동, 독특한 얼굴 근육 그룹의 자발적인 수축을 시도. 안구 구강 합성은 안면 신경 손상의 후유증으로 비정상적인 재생의 가장 흔한 기능 장애, 당황, 감소 된 자부심, 삶의 질저하를 야기3. 개별 가지에 대한 부상은 선택적으로 손상된 기능을 지시합니다.

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프로토콜

모든 내정간섭은 건강의 국가 학회 (NIH) 지침에 따라 엄격하게 수행되었습니다. 실험 프로토콜은 미시간 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 구현하기 전에 승인되었습니다. 10주령 성인 암컷 스프라그-다울리 쥐를 활용하였다.

1. 수술일 전

  1. 수술 일 전에 멸균 수술 기구, 진통제, 마취 약물 및 산소의 적절한 재고를 확인하십시오. 전체 목록은 재료 표를 참조하십시오.

2. 수술 전 설정

  1. 적어도 두 명 (외과 의사와 조수)을위한 공간을 포함하여 적절한 작업 공간을 확보하십시오.
    참고: 전용 수술대, 마취 기계 설치를 위한 공간, 멸균 및 백업 소모품을 위한 적절한 보관 공간이 필요합니다.
  2. 시술 중에 사용할 작동 현미경을 교정합니다. 외과 의사는 손잡이 / 버튼 위에 살균 커버를 배치하여 현미경과 줌 / 초점 버튼의 핸들을 조정할 수있는 능력을 가지고 있는지 확인
    참고 : 우리는 손잡이 / 버튼 위에 살균 된 알루미늄 호일을 사용했습니다.

3. 마취 및 준비

  1. 마취 챔버에 동물을 배치하고 1.8....

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결과

초기 수술 후, 결과 측정의 두 가지 주요 유형이 있다: 살아있는 동물의 직렬 측정 및 동물을 희생 해야 하는 측정. 직렬 측정의 예로는 화합물 근육 작용 전위측정(30)등의 전기생리학적 측정, 레이저 보조 또는 비디오그래피 수단을 통한 안면 근육 움직임의 평가9,형질전환 동물에서 얼굴 신경의 재성장의 반복적인 라이브이미징(31,,32)이포함된다. 도 1은 성인 형질전환Thy1-GFP 랫트에서 Thy1-GFP 안면 신경의 주요 트렁크의 생생한 이미징을 도시한다. 호감 상해는 한계 하악골 가지에, 첫번째 pes의 분기 점에 대략 2-3 mm 말단에서 수행되었습니다. MetaMorph 이미징 소프트웨어를 활용하여, 우.......

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토론

랫트 안면 신경 손상 모델은 수술 접근성, 분기 패턴 및 생리적 유의성27,,29, 33,,,33,34,,35,36으로인한 신경 영양 인자의 평가를 위한 가장 다재다능한 시스템으로 부상되었다. 비디오 데모와 형질전환 동물 데이터의 응용의 조합은 신경 재생 현상의 과학적 연구를위한 새로운 가능성을 엽니 다. 이 모형은 외상, 신경 영양 영향, 면역 조절 영향 및 미세 환경의 그밖 양상에 신경 반응의 체계적이고 상세한 특성화를 허용합니다. 임상 안면 신경 연구의 주요 목적은 모토뉴런 기능의 회복과 관련이 있지만, 모델은 신경 근육 접합부에서의 사건, 축색 수송의 뉘앙스 및 축색 신경.......

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공개 사항

저자는 공개 할 것이 없다.

감사의 글

S.A.A.는 미국 안면 성형 및 재건 수술 레슬리 번스타인 보조금 프로그램에 의해 지원됩니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
1.8% 이소플루란VetOne13985-030-40
11-0 나일론 미세 봉합사AROSutureTK-117038
4-0 monocryl 봉합사VWR75982-084
부프레노르핀 SRZooPharmMIF 900-006
CarprofenSigma-AldrichMFCD00079028
ChlorhexidineVWR
보석상 겸VWR21909-458
마이크로 Weitlaner 견인VWR82030-146
마이크로 가위VWR100492-348
미니 건절개 가위VWR89023-522
번호 15 메스 블레이드VWR102097-834
작동 현미경Leica
바셀린 아이 젤PharmadermB002LUWBEK
멸균수VWR89125-834
조직 접착제Vetbond, 3MNC9259532
물 도체 패드아쿠아 릴리프 시스템ARS2000B
Bupivacaine국소 진통제로 사용
IC19135805자 기

참고문헌

  1. Chan, J. Y. K., Byrne, P. J. Management of facial paralysis in the 21st century. Facial Plastic Surgery. 27 (4), 346-357 (2011).
  2. Razfar, A., Lee, M. K., Massry, G. G., Azizzadeh, B. Facial Paralysis Reconstruction. Otolaryngologic Clinics of North America. 49 (2), 459....

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