이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

과일 파리를 처리하는 간단한 수제 도구 -초파리 멜라노가스터

16.1K 조회수

DOI:

10.3791/59613

2019년 7월 24일

이 논문에서

요약

여기에 설명 된 여러 수 제 도구의 사용 전송, 진정, 성인 Drosophila를죽일, 뿐만 아니라 유리 문화 유리 유리 병을 청소 하 고 계란을 수집. 이러한 도구는 쉽게 만들 수 있으며 Drosophila를 처리하는 데 매우 효율적입니다.

초록

과일 파리, 드로 소필라 멜라 노 가스터,널리 생물학적 연구 및 생물학 교육 모두에서 사용된다. 성인 파리를 취급하는 것은 일반적이지만 성인 파리가 비행하기 때문에 실제로는 어렵습니다. 여기에서 설명한 것은 Drosophila의처리에 있는 어려운 문제점을 해결하기 위하여 몇몇 간단하고 비용 효과적인 공구를 만드는 방법입니다. 폼 스토퍼의 구멍이 만들어지고 피펫 팁이나 깔때기가 구멍에 삽입됩니다. 파리는 피펫 팁/깔때기 조립체로 한 방향으로만 이동하여 성인 Drosophila를 바이알로 또는 바이알로 이송하는 것을 효율적으로 제어할 수 있습니다. 기존 프로토콜은 분쇄 된 얼음에서 냉각하고 차갑고 단단한 얼음 팩 표면으로 옮겨 서늘한 마취 파리를 위해 수정되었습니다. 아이스팩은 입체 현미경으로 검사할 때 응축된 물에서 움직이지 않는 파리를 유지하는 의료용 거즈 조각으로 덮여 있습니다. 파리는 마침내 마이크로 웨이브에 의해 계산 및 분류 또는 폐기안락사된다. 병 모양의 케이지는 계란을 수집하기 위한 개발되었으며, 노동력 을 절약하는 장치와 유리 배양 바이알 을 청소하기위한 프로토콜이 동반되었습니다.

서론

과일 파리, Drosophila melanogaster는, 널리 주제1,2의넓은 범위를 연구하는 생물학 연구 및 생물학 교육에 사용되는 모델 유기체이다. Drosophila를 취급하는 기본적인 문제는 모든 성인 (일부 돌연변이 3,4제외)이 비행 할 수 있으므로 바이알에서 바이알로 의 성인을 옮기고 파리의 고정을 처리하기가 더 쉽습니다.

종래, 연구원은 두 개의 유리병을 입에서 입으로 잡고, 파리를 두드리거나 파리가 다른 바이알로 날아오르도록 허용한 다음 두바이알을 분리하고 다시 연결하여 한 바이알에서 다른 바이알로 이동합니다 4. 분명히, 이것은 동일한 직경의 두 개의 바이알의 개구부를 필요로하며, 전송 된 파리의 양을 제어하기가 어렵습니다. 한편, 이것은 일을 끝내기 위하여 빠른 손이 필요하고, 길 잃은 파리를 탈출하는 것은 실험실 또는 교실에 대한 문제가 귀착될 수 있습니다. 엑스트라 버진 파리 또는 수컷 파리를 이미 준비된 십자가에 추가하는 것은 ....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

1. 도구 및 액세서리 준비

  1. 팁/깔때기 스토퍼
    1. 두 개의 스폰지 플러그를 구하십시오 (플러그의 직경은 파리를 전송하는 데 사용되는 바이알의 내부 직경보다 약간 커야합니다). 가열 된 전기 납땜 인두로 스폰지 플러그의 중심에 구멍을 만듭니다.
    2. 두 개의 1mL 파이펫 팁을 얻고 날카로운 칼로 반으로 자르고 뾰족한 끝을 버립니다. 그런 다음, 두 번째 파이펫 팁에서 뾰족한 끝의 1.5 cm를 잘라. 두 파이펫 팁의 유적을 다목적 접착제와 함께 접착제로 사용하여 긴 파이펫 팁을 만듭니다(그림1A).
    3. 깔때기와 길쭉한 파이펫 팁을 스폰지 플러그에 삽입하여 팁및 퍼널 스토퍼(이하 T-및 F-스토퍼라고 함)를 만들고 100 μL 미세원심지 튜브(그림1A)로피펫 팁을 캡합니다.
      참고: 깔때기 줄기의 길이는 플러그의 높이보다 커야 합니다. 플러그 높이보다 짧거나 같으면 파리가 줄기 개구부에서 빠져나갑니다. 깔때기 줄기의 끝은 배양 배지또는 빈 바이알의 바닥 위에 적어도 2 cm 위에 위치되어야 한다. 작은 내부 스템 개구름(&5mm)을 가진 작은 깔때기(예: 디스크 ....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

T-및 F 스토퍼는 모든 플라이 전송 활동에 적응하고 사용할 수 있는 간단한 도구 세트로 개발되었습니다. 오래된 문화에서 여러 신선한 문화로 파리를 전송하는 것은 신선한 바이알의 플러그를 제거하고, F-스토퍼로 교체한 다음, 오래된 바이알에서 파리를 두드리고, 신속하게 플러그를 제거하고, T 스토퍼로 교체하는 것입니다. 오래된 음식이 컴팩트한 경우 오래된 바이알을 뒤집고 T 스토퍼의 끝을 F 스토퍼의 개구부로 삽입한 다음 파리를 신선한 바이알로 탭하는 것이 중요합니다. 그런 다음 T-및 F 스토퍼를 교체하고 바이알을 다시 연결합니다. 오래된 음식이 덜 컴팩트해지면 신선한 바이알을 뒤집어 T 스토퍼에 장착하고 파리가 신선한 바이알로 기어 올라갈 수 있도록하는 것이 좋습니다.

이미 준비된 크로스에 여분의 파리를 추가하려면 크로스 바이알의 파리를 누르고 플러그를 F 스.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

Drosophila 양육 및 실험에 관련 된 기본 활동을 처리 하기 위한 몇 가지 수 제 도구는이 종이에 설명 되어 있습니다. 이러한 도구는 간단하지만 오히려 효과적입니다. 사실상, 모든 실험실은 이러한 도구를 쉽게 만들 수 있으며, 연구 또는 교육 실험실은 아마도 로컬로 사용할 수없는 기성 대안을 찾을 필요가 없습니다.

플라이 전송은 Drosophila 실험에서 가장 일반적인 관행이자 어려운 작업입니다. 불행하게도, 지금까지, 설명 된 전송 도구3,4,12,17 여기, T- 및 F 스토퍼가 설명되어 있지 않다. 이 간단한 도구는 파리를 훨씬 쉽고 제어 할 수 있게하고, 최근 몇 년 동안 유전학 수업에서 몇 가지 길 잃은.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

저자는 공개 할 것이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
플라이어
무선 드릴 드라이버최대 속도: 500 rpm
전기 납땜 인두
디스크 파일
퍼널직경< 60mm
아이스 박스
곤충 핀
적외선 온도계HCIYET HT-830
긴 커프 고무 장갑
기계 연필
의료 거즈
마이크로 원심 분리기 튜브100 ul
전자레인지
파라필름
페리 디쉬내부 직경 60 mm
피펫 팁1 ml
플라스틱 필름
플라스틱 페리 디쉬&파이; 빈 유리병을 덮는 데 사용되는 36mm
포인트 핀셋
보호 작업 장갑
재냉동 가능한 하드 아이스팩26.5회; 14.5&회; 2.5 cm 이상의
고무 공기 블로워
스냅 커터
소프트 드링크 병500 ml, 내부 직경 c.a. 65 mm
스폰지 스토퍼
스테인레스 스틸 스폰지
튜브 브러시
바이알& 피; 34mm &시간; 90의 mm
한 쌍

참고문헌

  1. Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
  2. JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
  3. Ashburner....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

태그