쥐와 토끼 동맥류 모형에 있는 동맥류 관류 그리고 부모 동맥 Patency의 평가를 위한 형광 혈관 조영술

요약

우리는 형광계 형광 비디오 혈관 조영술 (FVA)를 사용하여 쥐와 토끼에 있는 측벽 동맥류의 동맥류 관류 및 혈관 점성을 능률하게 평가하기 위하여 프로토콜을 제시합니다. 92.6 %의 긍정적 인 예측 값으로, 특별한 장비가 필요하지 않은 간단하지만 매우 효과적이고 경제적 인 방법입니다.

초록

뇌 동맥류 치료는 완전한 폐색을 달성뿐만 아니라 부모 동맥의 혈류를 보존에 초점을 맞추고있습니다. 플루오레세인 나트륨과 인도시아닌 녹색은 각각 혈류 및 혈관 관류 상태를 관찰하는 데 사용된다. 이 연구의 목적은 토끼와 쥐의 측벽 동맥류 유도 후 실시간 혈류, 혈관 관류 상태 및 동맥류의 폐색을 확인하고 이러한 종의 절차를 검증하기 위해 FVA를 적용하는 것입니다.

20 개의 측벽 동맥류는 기증자 토끼의 경동맥에 탈세포화 된 동맥 혈관 주머니를 봉합하여 10 마리의 토끼에서 만들어졌습니다. 또한, 48 마리의 미세 수술 측벽 동맥류가 48 마리의 쥐에서 만들어졌습니다. 생성 후 한 달에 후속 동안, 부모 동맥류 복합체는 해부되었고 FVA는 토끼의 귀 정맥 카테터 삽입과 쥐의 대퇴 정맥 캐터 삽입을 통해 정맥 플루오레세인 (10 %, 1 mL) 주사를 사용하여 수행되었습니다. 동맥류를 수확한 후, 가부장제가 거시적으로 평가되었습니다.

거시적으로, 토끼에 있는 16동맥류 중 14는 완전히 가려진 루미나에 있는 잔여 부모 동맥 관류가 없음을, 그러나 11 (79%) 표시했습니다 FVA에 의해 감지되었습니다. 4개의 동맥류는 기술적인 문제로 인해 제외되었습니다. 쥐에서, 잔류 동맥류 관류는 48건 중 25건에서 거시적으로 관찰되었다. 관류의 거시적 증거가없는 23 의 FVA는 22 동맥류 (96 %)의 발생률을 확인했습니다. FVA와 관련 된 불리 한 이벤트 는 없었다. 플루오레세인은 쉽게 적용할 수 있으며 특별한 장비가 필요하지 않습니다. 토끼와 쥐와 실험 환경에서 부모 동맥 무결성 및 동맥류 개통 /잔류 관류를 평가하기위한 안전하고 매우 효과적인 방법입니다. FVA는 조영제로 플루오레세신을 사용하여 동맥류와 기본 혈관의 개통을 제어하는 데 효과적인 것으로 보이며 심지어 수술을 우회하도록 조정할 수도 있습니다.

서론

완전한 동맥류 말살 및 부모 동맥 무결성의 증거는 동맥류 수술에서 가장 중요합니다. 도플러 초음파 검사, 기존의 대뇌 혈관 조영술 (DSA), 컴퓨터 단층 조영술 (CTA) 또는 자기 공명 혈관 조영술 (MRA) 1과 같은 부모 동맥개통 및 동맥류 폐색을 확인하는 몇 가지 옵션이^{있습니다. 2}. 그러나, 이들은 종종 실험실 설정에서 사용할 수없는 비용이 많이 들고 시간이 많이 걸리는 방법입니다. 더욱이, 그(것)들은 운동 유물을 피하기 위하여 실험동물의 추가 적인 감미료를 위한 방사선 노출 또는 필요와 같은 관련 있는 부작용이 있을 수 있습니다.

새로운 혈관 내 장치의 수가 증가함에 따라 이러한 장치의 전임상 테스트가 연속적으로 필요합니다. 그러나, 이 연구 결과는 수시로 사후 분석 (예를 들면, 거시 병리학 및 조직학)에 의존하고 동적 관류에 대한 정보가 부족합니다. 또한, 연구원에 대 한 실험 적인 수술 절차 동안 즉각적이 고 신뢰할 수 있는 정보를 얻을 하는 것이 중요 할 수 있습니다. 형광 혈관 조영법은 비용 효율적이고 시각화 기술을 수행하기쉬운 1,

프로토콜

설치류는 동물 보호 시설에 보관되었고 실험은 스위스 베른 대학 (BE 108/16)과 (BE65/16)의 동물 복지위원회에 의해 검토되고 승인되었습니다. 모든 동물은 음식과 물에 무료로 접근 할 수있는 표준 실험실 식단에서 유지되었습니다. 모든 동물 실험은 3Rs(교체, 감소 및 정제)를 신중하게 고려하여 수행하였다. 10마리의 암컷 뉴질랜드 흰 토끼와 48마리의 수컷 위스타 쥐가 포함되었다. 도착 지침은 엄격하게8을 따랐다.

참고: 20개의 측벽 동맥류는 기증자 토끼의 경동맥에 탈세포화된 동맥 혈관 주머니를 봉합하여 10마리의 토끼에서 만들어졌습니다. 또한, 48마리의 미세수술측벽 동맥류가^4,9전에 기재된 바와 같이 48마리의 쥐에서 생성되었다. 이미징 절차 및 거시적 분석은 동맥류 생성 후 4주 후에 수행되었습니다.

1. 플루오레세인 비디오 혈관 조영술에 필요한 재료의 준비

1. 여기 필터로 작동하는 파란색 밴드패스 필터(재료 표참조)를 눌러 손전등을 수정합니다. 그러면 토치는 청색광만 방출해야 합니다....

결과

수술 중 심박수와 혈압을 모니터링했습니다. 평균 심박수는 토끼에서 193/min, 쥐의 경우 196/min이었습니다. 토끼의 체중은 3.05-4.18 kg이고 쥐의 무게는 335-690g이었습니다.

우리는 10 마리의 토끼 중 8 개에서 FVA를 수행 할 수있었습니다(그림1). 두 마리 토끼의 동맥류 검사 4회는 기술적인 문제로 인해 카메라로 기록되지 않았습니다. 쥐에 있는 FVA를 관련시키는 아무 기술적인 어려움도 보고되지 않았습니다. 그러나, FVA는 대퇴 정맥을 천공하는 어려움 때문에 1개의 쥐에서 수행될 수 없었다.

8마리의 토끼에서 16개의 동맥류 중, 2개의 동맥류는 부모 동맥의 지속적인 관류를 보였다(거시적으로 확인됨) (표 1참조) FVA는 잔류 관류를 가진 5개의 케이스를 확인했습니다. 14 마리의 토끼 동맥류는 거시적으로 잔류 관.......

토론

FVA는 설치류의 혈관을 검사하는 유망하고 단순한 방법이며 상용 장치 및 기성 장비로 수행 할 수 있습니다. FVA는 혈관이 먼저 적절한 해부를 필요로하기 때문에 혈관 무결성의 수술 중 평가가 필요한 수술 중에 구현 될 수 있습니다.

저자는 감염, 허혈 및 구획 증후군^12와같은 부주의한 사건의 더 낮은 리스크 때문에 동맥 주입에 정맥 주입을 선호했습니다. 정맥 주사는 신뢰할 수있는, 공간 제한, 고농축 염색, 작은 염료 투여량13,^14가필요합니다. 또한 정맥 주사는 플루오레세인^14,15의빠른 클리어런스를 허용합니다. 다른 방법은 선택한 동맥에 직접 조영제를 주입하는 것입니다. 이 방법은 조사자가 혈액과 플루오레세인으로 수술 분야를.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
토끼용
알루미늄 호일
동물 면도기
블랙 테이프
블루 필터	Thorlabs MF475-35
바디 웜 플레이트
카메라	Sony NEX-5R
카테터	22G Vasofix 안전
Disinfictant
Fluorescein 나트륨	Fluorescein Faure 10%
Glas 플레이트
녹색 필터	Thorlabs MF539-43
요실금 패드
주입 펌프	Perfusor Secura
케타민 염산염			모든 일반 제품
바늘	25G
산소
링거 용액
멸균 시트
수술			마이크로 집게, 마이크로 가위, 무딘 수술 가위
외과 현미경	OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany
주사기 2ml, 5ml, 50ml
테이프
3 방향 스톱 콕
토치 라이트
Xylazin			모든 일반 제품
< strong> 쥐 < / strong>
알루미늄 호일
동물 면도기
블랙 테이프
블루 필터	Thorlabs MF475-35
바디 웜 플레이트
카메라	Sony NEX-5R
Disinfictant
플루오레세인 나트륨	플루오레세인 포레 10%
그린 필터	Thorlabs MF539-43
요실금 패드
이소플루란
케타민 염산염			모든 일반 제품
메데토미딘 염산염			모든 일반 제품
바늘	25G
산소
판
Ringer's Solution
멸균 시트
수술 기구			마이크로 집게, 마이크로 가위, 무딘 수술 가위
수술 현미경	OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, 독일
주사기 2ml, 5ml
테이프
토치 라이트