이 문서는 마우스에서 심근 극저온 손상 후 심장 리모델링을 연구하는 모델을 보여줍니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
방법 논문
마우스에서 심근 경색을 연구하는 극저온 손상 모델
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
동물 모델의 사용은 급성 관상 동맥 증후군과 그 합병증에 대한 새로운 치료 전략을 개발하는 데 필수적입니다. 이 문서에서는 높은 재현성과 복제성을 가진 정확한 경색 크기를 생성하는 뮤린 저온 상해 경색 모델을 보여줍니다. 간단히 말해서, 동물의 삽관과 흉기 절제술 후 심장이 흉부에서 들어 올려지습니다. 핸드헬드 액체 질소 전달 시스템의 프로브가 심근 벽에 적용되어 저온 손상을 유발합니다. 심실 기능 및 전기 전도 가 손상된 심초음파 또는 광학 매핑으로 모니터링할 수 있습니다. 경색 된 영역의 경막 심근 리모델링은 콜라겐 증착 및 심근 세포의 손실을 특징으로합니다. 다른 모델(예: LAD-결찰)과 비교하여, 이 모델은 핸드헬드 액체 질소 전달 시스템을 활용하여 보다 균일한 경색 크기를 생성합니다.
서론
급성 관상 동맥 증후군 (ACS)은 서방 세계1,2에서사망의 주요 원인입니다. 관상 동맥의 급성 폐색은 영향을받는 심장 조직의 허혈성 캐스케이드 및 괴사의 활성화로 이어진다3. 손상된 심근은 점차 적으로 비 수축성 흉터 조직으로 대체되며, 이는 임상적으로 심부전으로 매니페스트4,5. ACS의 처리에 있는 최근 어드밴스에도 불구하고, ACS 와 ACS 관련 심부전의 보급은 상승하고, 치료 선택권은 제한됩니다6,7. 따라서 ACS와 그 합병증을 연구하기 위한 동물 모델을 개발하는 것은 엄청난 관심사입니다.
현재까지 ACS 및 ACS 유도 심근 리모델링을 연구하기 위해 가장 널리 사용되는 동물 모델은 좌측 내림차순 관상 동맥(LAD)의 결찰이다. LAD의 결찰은 ACS 동안 인간의 심근 조직과 유사한 심근의 급성 허혈을 유도합니다. 그러나, 일치하지 않는 경색 크기는 LAD 결찰의 아킬레스건 ....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
동물은 실험실 동물 자원 연구소에 의해 준비, 실험실 동물의 원칙에 대한 가이드를 준수인도적 치료를받았다, 건강의 국립 연구소에 의해 출판. 모든 동물 프로토콜은 책임있는 지역 당국 (캘리포니아 샌프란시스코 대학 (UCSF) 기관 동물 관리 및 사용위원회)에 의해 승인되었습니다.
1. 동물 관리
- 약 27g의 체중14주(예: 실험실 동물 연구소)에서 생쥐를 구하십시오.
참고: BALB/c 마우스는 이 문서에 사용됩니다. - 통풍이 잘되는 캐비닛에 마우스를 보관하고 표준 마우스 차우와 오토클레이브 워터 광고 리비텀을 공급하십시오.
2. 마우스 준비
- 유도 챔버를 사용하여 이소플루란 (3.5 %)으로 마우스를 마취하십시오.
- 헤어 트리머를 사용하여 가슴과 목 의 머리카락을 제거합니다.
- 가열 된 패드에 supine 위치에 마우스를 놓고 마우스의 입과 코를 덮는 얼굴 마스크와 마취를 유지합니다.
- 뒷발과 꼬리를 꼬집어 반사 신경이 없는지 확인하여 마취의 깊이를 충분히 확인하십시오.
- 피하 부프레노르핀을 주입 (0.03 mg/kg) 진통에 대한.
- 뒷다리와 앞....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
극저온 상해 경색 모델은 ACS 및 그 합병증을 연구하기에 적합합니다. 낮은 사망률과 효율적인 수술 후 회복이 이 모델에서 볼 수 있습니다. 극저온 손상은 심근 손상을 유발하여 심장 기능 감소, 전기 분리 및 교란 리모델링으로 이어집니다.
심초음파는 생체 내에서 비침습적으로 심장 기능을 모니터링하는 데 사용할 수 있습니다. 극저온 손상 된 심장에서, 심초음파는 크게 감소 된 배출 분획 및 분수 영역 변화를 보여줍니다(그림 1a-c). 기능장애는 수술 후 7일째부터 56일간의 관찰종점까지 이어진다.
상세한 심장 기능은 압력 체적 루프 (PV 루프) 분석을 통해 침략적으로 평가될 수 있습니다. 1.2 Fr 전도도 카테터가 좌심실로 도입되고 좌심실 압력이 좌심실 부피에 대해 플롯됩니다. 스트로크 볼륨, 스트로크 작업, 심장 출력 및 예부하 조정 된 최대.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
이 문서에서는 ACS 및 관련 약리학 및 치료 선택권을 조사하기 위하여 마우스 극저온 상해 모형을 기술합니다.
가장 중요한 단계는 심장 조직에 저온 프로브를 적용하는 것입니다. 최적의 경색 크기를 얻고 재현 가능한 결과를 보장하기 위해 접촉 기간을 엄격하게 제어해야 합니다. 심근의 장기간 냉각은 대형 경색 또는 심실 천반으로 이어질 것입니다. 대조적으로, 단축된 냉각 시간은 제한된 epicardial 병변을 생성하고 모든 상주 세포를 제거하지 않습니다. 따라서, 이것은 재생 세포 이식을 공부할 때 혼란스러울 수 있습니다.
다른 극저온 절색방법(20)에비해, 본 문서에 설명된 개방흉도 접근법은 경색이 심장의 상이한 위치에 자유롭게 유도될 수 있다는 장점이 있다. 더욱이, 이 접근법은 경색 경계가 보이고, 세포 이식 부위가 그에 따라 선택될 수 있기 때문에 치료 세포 주입 또는 패치 적용을 .......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 공개 할 것이 없다.
감사의 글
크리스티안 파르만이 기술적인 도움을 주신 것에 대해 감사드립니다. D.W.는 맥스 케이드 재단의 지원을 받았습니다. T.D.는 엘스 크뢰너 기념회(2012_EKES.04)와 도이치 포르충스게마인샤프트(DE2133/2-1_)로부터 보조금을 받았다. S. S. 도이치 포르충제마인샤프트(DFG; SCHR992/3- 1, SCHR992/4-1).
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 10 ml 주사기 | Thermo Scientific | 03-377-23 | |
| 5-0 프롤렌 봉합 | Ethicon | EH7229H | |
| 6-0 프롤렌 봉합사 | Ethicon | 8706H | |
| 8-0 Ethilon 봉합사 | Ethicon | 2808G | |
| Absorption Spears | Fine Science Tools | 18105-01 | |
| BALB/c | The Jackson Laboratory | 재고 번호 000651 | |
| Bepanthen 눈과 코 연고 | Bayer | 1578675 | 눈 연고 |
| Betadine Solution Betadine | Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| 둔기 펜치 | 파인 사이언스 도구 | 18025-10 | |
| Buprenex | Reckitt Benckiser | NDC 코드: 12496-0757-1, 12496-0757-5 | 부프레노르핀 |
| 극저온 시스템 3mm | Brymill 극저온 시스템 | Cry-AC-3 B-800 | |
| 에탄올 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| 집게 곡선 | S& T | 00284 | |
| 집게 미세 | 과학 도구 | 11251-20 | |
| 집게 표준 | 미세 과학 도구 | 11023-10 | |
| 총 해부학 프로브 | 미세 과학 도구 | 10088-15 | |
| 이발기 | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| 고온 소작 키트 | Bovie | 18010-00 | |
| ISOFLURANE | Henry Schein 동물 건강 | 029405 | |
| IV 카테터 20G | B. Braun | 603028 | |
| Mini-Goldstein 견인 | 미세 과학 도구 | 17002-02 | |
| NaCl 0.9% | B.Braun | PZN 06063042 예술. 번호: 3570160 | 식염 |
| 바늘 홀더 | Fine Science Tools | 12075-14 | |
| 바늘 홀더, 곡선형 | 하버드 장치 | 72-0146 | |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| 운영 보드 | Braintree Scientific | 39OP | |
| 교체 가능한 세밀한 팁 | Bovie | H101 | |
| 가위 | 세밀한 과학 도구 | 14028-10 | |
| 작은 동물 인공호흡기 | Kent Scientific | RV-01 | |
| 스프링 가위 - 옆면에 각도 | 밀한 과학 도구 | 15006-09 | |
| 수술용 현미경 | Leica | M651 | |
| Transpore 수술 테이프 | 3M | 1527-1 | |
| Vannas 스프링 가위 | 미세 과학 도구 | 15400-12 | |
| 기화기 | 켄트 사이언티픽 | VetFlo-1205S |
참고문헌
- Writing Group. Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association. Circulation. 133 (4), 38-360 (2016).
- de Alencar Neto, J. N. Morphine, Oxygen, Nit....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
