이 작품은 일반적인 마모셋에서 마이크로 전극 어레이의 입체적, 신경외과 적 이식을 수행하는 프로토콜을 제시한다. 이 방법은 구체적으로 자유롭게 행동하는 동물의 전기 생리학적 기록을 가능하게 하지만 이 종의 다른 유사한 신경 외과 적 개입에 쉽게 적응할 수 있습니다 (예를 들어, 약물 투여를위한 캐뉼라 또는 뇌 자극을위한 전극).
방법 논문
* These authors contributed equally
이 작품은 일반적인 마모셋에서 마이크로 전극 어레이의 입체적, 신경외과 적 이식을 수행하는 프로토콜을 제시한다. 이 방법은 구체적으로 자유롭게 행동하는 동물의 전기 생리학적 기록을 가능하게 하지만 이 종의 다른 유사한 신경 외과 적 개입에 쉽게 적응할 수 있습니다 (예를 들어, 약물 투여를위한 캐뉼라 또는 뇌 자극을위한 전극).
Marmosets(Callithrix jacchus)는신경 과학을 포함한 생물 의학 및 전임상 연구에서 인기를 얻고있는 작은 비 인간 영장류입니다. 계통학적으로, 이 동물은 설치류보다는 인간에게 훨씬 더 가깝습니다. 그(것)들은 또한 음성및 사회적인 상호 작용의 넓은 범위를 포함하여 복잡한 행동을 표시합니다. 여기서, 일반적인 마모셋에서 기록 전극 어레이의 이식에 대한 효과적인 입체신경외과적 수술이 기재되어 있다. 이 프로토콜은 또한 성공적으로 수술을 수행하는 데 필요한 동물 관리의 수술 전 및 사후 단계를 자세히 설명합니다. 마지막으로, 이 프로토콜은 수술 후 1주일 후에 자유롭게 행동하는 마모셋에서 국부적인 필드 전위 및 스파이크 활성 기록의 예를 보여줍니다. 전반적으로,이 방법은 깨어 자유롭게 마모셋을 행동에서 뇌 기능을 연구 할 수있는 기회를 제공합니다. 동일한 프로토콜은 다른 작은 영장류와 함께 일하는 연구원에 의해 쉽게 사용될 수 있습니다. 또한, 자극 전극, 미세 주사, 옵트로로드 또는 가이드 캐뉼라의 이식 또는 이산 조직 영역의 절제와 같은 임플란트를 필요로 하는 다른 연구를 허용하도록 용이하게 변형될 수 있습니다.
일반적인마모셋(Callithrix jacchus)은신경과학을 포함한 많은 연구 분야에서 중요한 모델 유기체로 인정받고 있습니다. 이 신세계 영장류는 설치류와 다른 비인간 영장류(NHP)에 대한 중요한 상호 보완적인 동물 모델을 나타내며, 이러한 rhesus macaque. 설치류와 마찬가지로, 이 동물들은 작고 조작하기 쉬우며, 큰 NHP와 비교하여1,2,3,4를돌보고 번식하는 데 비교적 경제적이다. 더욱이, 이들 동물들은 다른 NHP1,2,3에비해 트위닝 및 높은 fecundity에 대한 성향을 가지고 있다. 마모셋이 다른 많은 영장류에 비해 또 다른 장점은 현대 분자 생물학 도구3,4,5,6,
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
동물 실험은 실험실 동물의 관리 및 사용을 위한 건강 가이드의 국가 학회에 따라 수행되고 산토스 Dumont 연구소 윤리위원회 (프로토콜 02/2015AAS)에 의해 승인되었습니다.
1. 수술 준비
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
본 연구의 목적은 일반적인 마모셋에서 전기 생리학적 기록을 위한 미세 전극 어레이의 이식에 대한 입체신경외과적 수술을 설명하는 것이었다. 일반적인 수술 (마취 유도에서 마취 회복까지)은 이식 된 배열의 수에 따라 약 5-7 시간 동안 지속됩니다. 여기서, 두 개의 배열은 각 뇌 반구에 하나씩 대칭적으로 이식되었다. 각 어레이에는 기저 중추골-코르티코탈라믹 회로의 여러 구조를 대상으로 7개의 번들에 배열된 32개의 스테인리스 스틸 마이크로와이어가 포함되어있지만(그림 1),전극 설계 및 표적 뇌 영역은 실험. 성공적인 수술과 수술 후 수술 후, 동물은 3-5 일 이내에 완전히 회복되어야합니다. 어레이가 제대로 접지되고 이식된 경우 성숙한 신경교암흉터가 확립되기 전에 몇 주 또는 몇 달에 걸쳐 자유롭게 행동하는 동물에서 스파이크(그림 2A) 및.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
이 작품은 마모셋 뇌에서 마이크로 전극 기록 어레이의 이식에 관여하는 절차에 대한 자세한 설명을 제공합니다. 이 동일한 프로토콜은 다른 작은 영장류에서 수제 또는 시판 여부에 관계없이 전극을 이식 할 때 쉽게 사용할 수 있습니다. 또한, 그것은 쉽게 뇌 구조의 정확한 타겟팅을 필요로 하는 다른 실험 적인 끝에 대 한 적응 될 수 있다. 따라서 이 프로토콜은 가장 다양할 수 있는 측면이기 때문에 입체 좌표 및 두개골 드릴링 기법에 대해 의도적으로 모호합니다. 예를 들어, 이 수술에 사용된 어레이를 이식하기 위해 각개두개는 각 반구에 두 개의 적절한 크기의 창을 열기 위해 수행되었습니다. 그러나, 튼튼한 이식 할 때, 가이드 캐뉼라와 같은 개별 구조는이 또는 durectomy가 필요하지 않습니다. 오히려, 경막의 수준에 간단한 버 구멍은 충분합니다. 마찬가지로, 비전기 임플란트가 관련될 때 나사를 접지할 필요가 없습니다. 따라서, 외과 적 프로토콜에서 3.9 단계는 생략 될 수 있다. 대신, 치과 아크릴은 단순히 노출 된 두개골, .......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
저자는 공개 할 것이 없다.
저자는 촬영 및 편집에 대한 기술 적 지원에 대한 베르나르도 루이스에게 감사드립니다. 이 작품은 산토스 두몬트 연구소 (ISD), 브라질 교육부 (MEC) 및 쿠르데나카오 드 아페르페이소아멘토 드 페소알 드 니벨 슈페리어 (CAPES)에 의해 지원되었다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Equipments | |||
| 683 소형 동물 인공 호흡기 | Harvard Apparatus, Inc. | 55-0000 | |
| 마취 어셈블리 | BRASMED | COLIBRI | |
| 이발사 이발기 | Mundial | HC-SERIES | |
| 치과 드릴 | Norgen | B07-201-M1KG | |
| 동종 가열 패드 및 모니터 | Harvard Apparatus, Inc. | 50-7212 | |
| 마모셋 입체 프레임 | 나리시게 과학 기기 연구실 | SR-6C-HT | |
| 환자 모니터 및 맥박 산소 농도계 | Bionet Co., Ltd | BM3 | |
| 입체 미세 조작기 | 나리시게 과학 기기 연구소 | SM-15R | |
| 수술 현미경 | Opto | SM PLUS IBZ | |
| Instruments | |||
| Allis 조직 집게 Sklar | 36-2275 | ||
| Alm Retractor, 둥근 점, 4x4 이빨 | Rhosse | RH11078 | |
| 각진 McPherson 집게 | Oftalmologiabr | 11301A | |
| 곡선 외과 용 가위 | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8422 | |
| 곡선 조직 집게 | Sklar | 47-1186 | |
| 섬세한 해부 집게 | WPI | WP5015 | |
| 치과 드릴 비트 | Microdont | ISO.806.314.001.524.010 | |
| Essring 조직 집게 | Sklar | 19-2460 | |
| FG 1/4 치과 드릴 비트 | Microdont | ISO.700.314.001.006.005 | |
| Halsey 바늘 홀더 | WPI | 15926-G | |
| Halstead 모기 집게 | WPI | 503724-12 | |
| 지혈 집게, 직선 | Sklar | 17-1260 | |
| Jewler 집게 | Sklar | 66-7436 | |
| McPherson-Vannas Optathalmic microscissor, 3 mm 포인트 | Argos Instrumental | ARGOS-4004 | |
| Pereosteal Raspatory | Golgran | 38-1 | |
| 두피칼 손잡이 | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8354 | |
| 스크루 드라이버 | Eurotool | SCR-830.00 | |
| Sodering Iron | Hikari | 21K006 | |
| 외과 가위 | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8400 | |
| 톱니집게 | WPI | 501266-G | |
| <강력한>일회용/일회용 | |||
| 1 ml 멸균 주사기 26 G 바늘 | Descarpack | 7898283812785 | |
| 130 cm x 140 cm 수술 필드, 사전 멸균된 | ProtDesc | 7898467276344 | |
| 24G 바늘, 사전 멸균 된 | Descarpack | 7898283812846 | |
| 50cm x 50cm 수술 분야, 사전 멸균 | Esterili-med | 110100236 | |
| Cotton Tipped Probes, 사전 멸균 된 | Jiangsu Suyun Medical Materials Co. LTD | 23007 | |
| Cotton tipped Qutips | Higie Topp | 7898095296063 | |
| Electrode Array | Home made | ||
| 커프가 없는 기관내관, 내경 2.0mm, 외경 2.9mm | 솔리도어 | 7898913077201 | |
| 주석 도금 구리선, 직경 | |||
| M1.4x3 스테인리스강 나사 | USMICROSCREW | M14-30M-SS-P | |
| 의료용 테이프 | Missner | 7896544910102 | |
| 나일론 수술용 봉합 | Shalon | N540CTI25 | |
| 스칼팔 블레이드, 사전 멸균 | AdvantiVe | 1037 | |
| 솔더 | Kester | SN63PB37 | |
| 멸균 식염수 0.9% | Isofarma | 7898361700041 | |
| 멸균 수술용 장갑 | Maxitex | 7898949349051 | |
| 멸균 수술 가운 | ProtDesc | 7898467281208 | |
| 수술용 거즈, 15cm x 26cm 사전 멸균 H | é ika | 7898488470315 | |
| Gelfoam | Pfizer | ||
| Drugs/Chemicals | |||
| 0.25mg/ml 아트로핀 | Isofarma | ||
| 10% 리도카인 스프레이 | Produtos Quí micos farmacê 주식회사 | ||
| 2.5% Enrofloxacino 수의학 항생제 | Chemitec | 0137-02 | |
| Dexametasona 수의학 항염증제 | MSD | R06177091A-00-15 | |
| 과산화수소 | Farmax | 7896902211537 | |
| Isoflourane | BioChimico | 7897406113068 | |
| Jet 아크릴 중합 용액 | Artigos Odontoló gicos Clá ssico | ||
| Jet 자동 중합 아크릴 | Artigos Odontoló gicos Clá ssico | ||
| 케타민 10% | Syntec | ||
| 리도카인 및 페닐에프린 1.8ml 국소 마취제 | SS 화이트 | 7892525041049 | |
| 포비돈-요오드 솔루티옴 | Farmax | 7896902234093 | |
| Riohex 2% 수술용 비누 | Rioquí 운모 | 7897780209418 | |
| 실버 페인트 | SPI 공급 | 05002-AB | |
| 트라마돌 클로라이드 50 mg/ml | Uniã o Quí 운모 | 7896006245452 | |
| 리프레시 젤 (폴리아크릴산) | 알레르간 |
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
이 JoVE 논문의 텍스트 또는 그림 재사용 허가 요청
허가 요청