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방법 논문

연구 및 교육 응용 프로그램을 위한 맞춤형 미세 유체 장치의 신속한 제조

8.4K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/60307

⸱

2019년 11월 20일

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

여기에서 우리는 최소한의 재정적 및 시간 적 투자로 맞춤형 미세 유체 장치를 설계하고 제작하는 프로토콜을 제시합니다. 목표는 생물 의학 연구 실험실 및 교육 환경에서 미세 유체 기술의 채택을 용이하게하는 것입니다.

초록

미세 유체 장치는 나노에서 서브 밀리미터 저울에 이르기까지 채널에서 유체, 입자, 세포, 마이크로 크기의 장기 또는 유기체의 조작을 허용합니다. 생물 과학에서이 기술의 사용의 급속 한 증가 연구 그룹의 광범위 한 범위에 액세스할 수 있는 방법에 대 한 필요성을 자극 했다. PDMS 본딩과 같은 현재 의 제조 표준에는 비용이 많이 들고 시간이 많이 소요되는 리소그래피 및 본딩 기술이 필요합니다. 가능한 대안은 쉽게 저렴하고 최소한의 전문 지식이 필요하며 설계의 신속한 반복을 허용하는 장비 및 재료의 사용입니다. 이 작품에서 우리는 저렴하고 제작하기 쉽고 미세 유체 공학 기술에 대한 다른 접근 법보다 생성 시간이 훨씬 적은 PET 라미네이트 (PETL)를 설계하고 생산하기위한 프로토콜을 설명합니다. 그들은 수로 및 기타 피처가 공예 커터를 사용하여 정의되는 열 결합 필름 시트로 구성되어 있습니다. PETL은 현장별 기술적 과제를 해결하는 동시에 채택에 대한 장애물을 획기적으로 줄입니다. 이 접근 법은 연구 및 교육 설정 모두에서 미세 유체 장치의 접근성을 용이하게하여 새로운 조사 방법에 대한 신뢰할 수있는 플랫폼을 제공합니다.

서론

미세 유체학적 은 마이크로 리터 (1 x 10-6 L)에서 피콜리터 (1 x 10-12 L)에 이르는 부피를 가진 작은 규모로 유체 제어를 가능하게합니다. 이러한 제어는 마이크로프로세서 산업에서 차용한 마이크로 제조 기술의 적용으로 인해 부분적으로 가능해졌습니다1. 채널 과 챔버의 마이크로 크기의 네트워크의 사용은 사용자가 작은 차원의 독특한 물리적 현상특성을 활용할 수 있습니다. 예를 들어 마이크로미터 눈금에서 점성력이 관성력을 지배하는 층류를 사용하여 유체를 조작할 수 있습니다. 그 결과, 확산 수송은 미세 유체학의 두드러진 특징이 되고, 정량적이고 실험적으로 연구될 수 있다. 이러한 시스템은 Fick의 법칙, 브라운 운동 이론, 열 방정식 및/또는 유체 역학 및 운송 현상 분야에서 중요한 파생되는 Navier-Stokes 방정식을 사용하여 적절하게 이해할 수 있습니다2.

생물과학의 많은 그룹이 현미경 수준에서 복잡한 시스템을 연구하기 때문에, 원래 미세 유체 장치가 생물학2,3의연구 응용 프로그램에 즉각적이고 ....

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프로토콜

1. 디자인

  1. 장치에 대한 응용 프로그램을 식별하고 필요한 채널/챔버 구성 요소를 나열합니다.
    참고: 모든 장치에는 입력 및 출력 채널이 필요합니다. 현미경 검사법에 사용되는 장치는 이미징 챔버가 필요합니다. 더 복잡한 장치는 여러 층으로 배치 된 채널과 챔버가 필요합니다.
  2. 먼저 각 레이어를 직접 그리면서 장치의 기능이 레이어의 중첩에 의해 영향을 받는 방식을 고려합니다.
  3. 선과 모양을 그릴 수 있는 소프트웨어를 사용하여 컴퓨터에서 최종 디자인을 그립니다.
    1. 음영이 없는 검은색, 실선 및 모양을 사용하여 각 레이어를 개별적으로 그립니다. 6점 이상의 선 두께를 권장합니다. 이 단계에서 채널 및 챔버 피처의 치수는 전체 비율보다 덜 중요합니다.
    2. 피처를 작성하고 레이어를 중첩할 때 복사 및 붙여넣기 기능을 사용합니다. 도면도면의 예는 그림 1B를 참조하십시오.
  4. 각 레이어를 크래프트 커터 소프트웨어로가져옵니다(그림 1C). 그려진 디자인의 화면 캡처를 만들고 드래그 앤 드롭 접근 방식을 사용하여 이 작업을 ....

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결과

저렴한 비용과 신속한 반복 외에도 PETL 기술을 쉽게 사용자 지정하여 특정 문제를 해결할 수 있습니다. 먼저, 유리 커버슬립, 챔버 층, 채널 층 및 입구/출구 층으로 구성된 간단한 장치를 설명합니다(그림2). 이 장치는 일정한 흐름하에서 세포와 마이크로 장기의 이미징을 용이하게하도록 설계되었습니다. 배양 배지는 영양분과 가스 교환을 장려하기 위해 낮은 유량으로 보충됩니다. 둥근 챔버는 반전 된 현미경을 사용하여 이미징을 할 수있는 유리 바닥을 갖추고 있습니다. 이 장치에 유리를 사용하는 데는 적어도 두 가지 이유가 있습니다. 첫 번째는 광학입니다. PET 및 EVA는 광학 투명성과 유연성에 사용되는 열가소성 수지이며 이미징용 인터페이스로사용할 수 있습니다(특히 낮은 배율 9에서). 가시 스펙트럼에서 PET의 광 투과범위는 87에서 90%12까지입니다. 유리는, 그러나, 더 나은 광학 특성.......

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토론

미세 유체는 전 세계 실험실의 도구 상자에 점점 더 존재하지만, 채택의 속도는 긍정적 인 영향에 대한 잠재력을 감안할 때 실망하고있다16. 미세 유체 장치 제조의 저렴한 비용과 높은 효율성은 평균 연구 실험실에서이 기술의 채택을 가속화하는 데 필수적입니다. 여기서 설명하는 방법은 여러 필름 레이어를 사용하여 석판화 방법에 필요한 시간과 비용의 일부만으로 2차원 및 3차원 장치를 만듭니다. 표준 리소그래피는 스타트업에 수천 달러(USD)의 비용이 들며, 제작에 며칠이 소요되며 PETL 제작 시동 비용은 350달러 미만이며 장치는 몇 분 만에 제작할 수 있습니다. 이를 통해 연구 실험실뿐만 아니라 빠른 반복이 유리한 설정(예: 표준 PDMS 장치의 프로토타이핑) 또는 저렴한 일회용 장치의 산업 생산이 필요한 환경에서도 채택이 용이합니다. 예를 들어, PETL은 생분해성 재료를 사용하여 제조될 수 있으며, 의료 분야에서 사용하기 위해 조정될 수 있으므로 진단 도구로 이상적입니다. 미리 제작된.......

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공개 사항

페르난도 온티베로스는 이 기술에 대한 컨설팅 서비스를 상용화하고 제공할 회사인 PETL FLUIDICS(LLC)를 출시하는 중입니다. 공동 저자는 공개 할 것이 없습니다.

감사의 글

이 원고의 작품은 국립 과학 재단 (NSF)에 의해 부분적으로 지원되었다 (그랜트 번호. CBET-1553826) (및 관련 ROA 보충) 및 건강의 국가 학회 (NIH) (그랜트 번호. R35GM124935) J.Z.에, 그리고 F.O에 노틀담 멜코르 방문 학부 기금. 포유류 세포와 배양 프로토콜을 제공한 제나 Sjoerdsma와 바사르 빌기세르에게 감사드리며, 파비오 사코는 보조 수치를 지원해 주실 수 있습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
생검 펀치 (1mm)Miltex33-31AA옵션, 회전 도구 세트
런트 니들Janel, Inc.를 대체합니다.JEN JG18-0.5X-90플라스틱을 제거하고 Tygon 튜빙에 부착
Coverslips24 x 60mm모두
커팅 매트 및 블레이드Silhouette America 또는 Nicapa www.silhouetteamerica.com/shop/blades-and-mats재사용 / 일회용품
양면 테이프Scotch / 3M667소량, 모든 너비 또는 브랜드
PEEK 튜빙IDEX / any1581L다양한 구성을 사용할 수 있습니다. 이미 PEEK
PET / EVA 열 라미네이트 필름Scotch / 3M & TranscendiaTP3854-200, TP5854-100 & transcendia.com/products/trans-kote-pet3 - 6 mil (mil = 1/1000 inch) 라미네이팅 파우치 또는 롤.
PVC 필름 - 클링 랩글래드 / 모든식품 포장
로터리 도구 드릴Dremel / 모든200-121 또는 기타1/32 및 3/64 "드릴 비트 Dremel 권장
고무 롤러스피드 볼4126접착을 용이하게하기 위해 모든 브랜드는
가위 및 핀셋모든Fiskars-inch-Titanium-Softgrip-Scissors에서 작동합니다.콜-파머  –# UX-07387-12고품질 브랜드 권장
Silhouette CAMEO 공예 절단기Silhouette Americawww.silhouetteamerica.com/shop/cameo/SILHOUETTE-CAMEO-3-4T선호 공예 절단기
Silhouette Studio 소프트웨어Silhouette Americawww.silhouetteamerica.com/software공예 절단기 제어 및 도면 도구 제공 (무료 다운로드 MAC 및 PC)
주사기 펌프Harvard Apparatus 또는 New Era70-4504 또는 NE-300펌프가 이상적이며 피펫 또는 뷰렛을 사용할 수 있습니다.
주사기모든1-3mL
열 라미네이터스카치/3MTL906표준 가정/사무실 모델
Tygon 튜빙(E-3603)Cole-ParmerEW-06407-70무딘 바늘 끝과 함께 사용
비닐 가구 범퍼DerBlue/3M/ Everbilt투명, 자체 접착식(6 x 2mm 및 8 x 3mm)원형 범퍼 권장
블 선호

참고문헌

  1. Xia, Y., Whitesides, G. M. SOFT LITHOGRAPHY. Annual Review of Materials Science. 28 (1), 153-184 (1998).
  2. Beebe, D. J., Mensing, G. A., Walker, G. M. Physics and Applications of Microfluidics in Biology. Annual Review of Biomedical Engineering. 4 (1), 261-286 (2002).

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