이 원고는 복부 대동맥류의 마우스 모델에 발광 직경, 펄스 전파 속도, dtensibility 및 방사형 변형을 측정하기 위해 고주파 초음파 이미징을 사용하기위한 상세한 프로토콜을 설명합니다.
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방법 논문
복부 대동맥류 마우스 모델에서 맥박 전파 속도, 감도 및 변형률 측정
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
복부 대동맥류 (AAA)는 원래 크기의 1.5 배까지 최대 내발 경도 (MILD)를 초과하는 복부 대동맥의 국부적 인 팽창으로 정의됩니다. 임상 및 실험 연구는 작은 동맥류가 파열 될 수 있음을 보여 주었다, 큰 동맥류의 하위 인구는 안정적으로 남아있을 수 있지만. 따라서, 대공의 내발경 측정 외에도, 용기 벽의 구조적 특성에 대한 지식은 AAA의 안정성을 평가하는 중요한 정보를 제공할 수 있다. 대동맥 경화는 최근 혈관 벽의 초기 변화를 결정하는 신뢰할 수있는 도구로 부상했습니다. 맥박 전파 속도(PPV)와 방사형 스트레인은 대동맥 강성을 평가하는 데 매우 유용한 초음파 기반 방법입니다. 이 프로토콜의 주요 목적은 온화한, PPV, 분산성 및 방사형 변형에 의해 결정된 대로 대류의 구조적 및 기능적 특성을 분석하고 이미지를 획득하고 분석하기 위해 초음파 이미징 시스템을 사용하는 포괄적 인 기술을 제공하는 것입니다.
서론
복부 대동맥류(AAA)는 원래 혈관 직경을 1.5배 인 대동맥의 영구적인 국부화 팽창을 특징으로 하는 중요한심혈관 질환을 나타낸다. AAA는 미국에서 사망의 상위 13 원인 중 순위2. AAA의 진행은 대동맥 벽과 엘라스틴 단편화의 변성에 기인하며 궁극적으로 대동맥 파열로 이어집니다. 대동맥벽의 이러한 변화는 최대 내발경(MILD)의 유의한 증가 없이 발생할 수 있으며, 따라서 MILD 만으로는 질병의 중증도를 예측하기에 충분하지 않다는 것을 시사한다3. 따라서 대동맥 벽의 초기 변화를 감지하기 위해 추가 요인을 식별해야하며, 이는 조기 치료 옵션을 안내 할 수 있습니다. 이 프로토콜의 전반적인 목표는 펄스 전파 속도 (PPV), 감도 및 방사형 변형의 측정을 특징으로초음파 이미징을 사용하여 대동맥 기능 적 특성을 평가하기위한 실용적인 가이드를 제공하는 것입니다.
AAA를 연구하는 잘 특징지어진 실험 모형은, 먼저 Daugherty와 동료에 의해 기술된, Apoe-/- 마우스4에있는 삼투성 펌프를 통해 안지오텐신 II (AngII)의 피....
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프로토콜
마우스와 초음파 화상 진찰의 취급을 위한 프로토콜은 미주리 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (동물 프로토콜 번호 8799)에 의해 승인되고 AAALAC 국제에 따라 실시되었습니다.
1. 쥐의 장비 설치 및 준비
- 장비 설정
- 초음파 기기, 초음파 젤 워머 및 가열 패드를 켭니다.
- 초음파 프로그램을 열고 각 마우스에 대한 연구 이름과 설명 정보를 입력합니다.
- 응용 프로그램을 일반 이미징으로선택합니다.
- 복부 이미징에 적합한 트랜스듀서를 선택합니다(그림1B,C). 이 실험에서는 MS400 트랜스듀서가 사용됩니다.
- 마취 이소플루란과 산소 수준이 각 실험 세션에 적합한지 확인하십시오.
- 초음파 동물 이미징 플랫폼을 청소하십시오.
- 마우스 준비
- 가열 패드(36.5 ~ 38.5°C)의 상단에 마우스 케이지를 놓습니다.
- 마우스를 꼬리 밑면으로 가볍게 잡고 산소가 채워진 이소플루란 챔버에 놓습니다.
- 이소플루란과 산소 흐름을 유....
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결과
마우스로부터의 정상 및 동맥류 복부 대동맥의 대표적인 M모드 이미지는 각각 도 2A 및 도 2B에나타내고 있다. 상복부 대동맥은 오른쪽 신장 동맥 과 우수한 장간막 동맥 옆에 있는 그것의 위치에 의해 확인됩니다(그림 2A). 수축기 심장 주기의 세 가지 상이한 심장 박동에서, 정상 및 동맥류 대동맥의 계산에 사용되는 대표적인 이미지는 각각 도 2C,D에 나타내고 있다. 대동맥류가 발달한 상황에서, 발광 직경은 최대 팽창 의 영역에서 루멘의 두 안쪽 가장자리 사이에 수직 노란색 선을 그려서 결정된다(그림 2B). 정확.......
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토론
초음파 이미징은 PPV, distensibility 및 방사형 변형의 측정을 통해 대강의 기능적 특성을 결정하는 강력한 기술을 제공합니다. 이 측정은 AAA의 마우스 모형을 공부하기 위한 특히 유익하고 생체 내 접근은 대동맥 병리학의 시간적 발달을 이해하는 것이 잠재적으로 중요한 세로 데이터의 수집을 허용합니다. 구체적으로, 생체내 대동맥강성의 측정은 EKV 데이터를 분석하여 PPV, 난성 및 방사형 변형에 의해 복부 대동맥에서 국소적으로 결정되며 AAA 불안정성16에대한 독립적인 위험 인자로 간주된다. 이러한 프로토콜에 설명된 기술은 비교적 간단하며 한 마우스에서 이미지 세트를 가져오는 데 8-10분밖에 걸리지 않습니다. 모든 이미지는 잘 정의되고 일관된 랜드마크를 사용하여 재현 가능하고 정밀한 데이터를 생성하는 단일 작업자가 수집하는 것이 바람직합니다.
이러한 도구의 적용에 대한 기술 전문 지식이 필요한 잠재적인 요인이 있습니다. 예.......
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없다.
감사의 글
이 작품은 R01HL124155 (CPH)와 미주리 대학의 연구소에서 CPH에 자금을 지원했다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Angiotensin II | Sigma | A9525 | |
| Apoe-/- 마우스 | The Jackon lab |  | |
| Clippers | WAHL | 1854 | |
| 면봉 | Q-tips | ||
| DAPT | Sigma | D5942 | |
| 제모 크림 | Nair | LL9038 | |
| 전극 크림 | Sigma | 17-05 | |
| 젤 워머 | Thermasonic (Parker) | 82-03 (LED) | |
| 가열 패드 | Stryker | T / pump Professional | |
| Isoflurane | VetOne | Fluriso TM | |
| Isoflurane 기화기 | Visualsonics | VS4244 | |
| 안과 연고 | Lacri-lube | ||
| 삼투 펌프 | Alzet | 모델 2004 | |
| 산소 탱크, | 공기 가스 | ||
| 트랜스듀서 | Visualsonics, | MS-400 또는 MS550D | |
| 초음파 젤 | Parker | Aquasonic, 투명 | |
| 초음파 이미징 시스템, | Visualsonics, | Vevo 2100 | |
| Vevo Vasc, 소프트웨어 | 비주얼소닉 |
참고문헌
- Wanhainen, A. How to Define an Abdominal Aortic Aneurysm — Influence on Epidemiology and Clinical Practice. Scandinavian Journal of Surgery. 97, 105-109 (2008).
- Benjamin, E. J., et al. He....
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재인쇄 및 허가
