표적 항원 특이적 치료 항체의 종양 및 조직 분포 분석

Gururaj Shivange; Tanmoy Mondal; Evan Lyerly; Jeremy Gatesman; Jogender Tushir-Singh

doi:10.3791/60727

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방법 논문

표적 항원 특이적 치료 항체의 종양 및 조직 분포 분석

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DOI:

10.3791/60727

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2020년 5월 16일

Gururaj Shivange^*¹^,² , Tanmoy Mondal^*¹^,² , Evan Lyerly¹^,² , Jeremy Gatesman³ , Jogender Tushir-Singh¹^,²

¹Laboratory of Novel Biologics, University of Virginia School of Medicine, ²Department of Biochemistry and Molecular Genetics, UVA Cancer Center, University of Virginia School of Medicine, ³Center for Comparative Medicine, University of Virginia

^* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

여기서 우리는 마우스 종양 제노이식 모델에서 항체의 생체 내 국소화를 연구하는 프로토콜을 제시한다.

초록

단일 클론 항체는 암세포를 제거하기 위해 가변 독립적 인 메커니즘에 의해 작동하는 높은 친화성 다기능 약물이다. 지난 수십 년 동안 항체-약물 접합, 이중 특이적 항체, 키메라 항원 수용체(CAR) 및 암 면역 요법 분야는 기본 및 치료 조사의 가장 유망한 영역으로 부상했습니다. 백혈병과 흑색종에 있는 면역 체크포인트 수용체 및 CAR-T 세포를 획기적인 속도로 표적으로 하는 수많은 성공적인 인간 적인 예심으로, 항체 공학의 변이에서 파생된 종양학 치료에 대한 매우 흥미로운 시간입니다. 유감스럽게도, 상당히 많은 수의 항체와 CAR 기반 치료법은 종양 침대에서 면역 효과기 세포의 제한된 가용성으로 인해 고형 암의 인체 실험에서 실망스러운 것으로 입증되었습니다. 중요한 것은, 종양 이외의 조직에서 치료 항체의 비특이적 분포는 또한 임상 효능의 부족, 관련 독성 및 임상 실패에 기여한다. 인간 임상 적 흔적으로 전임상 연구의 충실한 번역이 마우스 종양 xenograft 효능 및 안전 연구에 크게 의존하기 때문에, 여기에서 우리는 치료 항체의 종양 및 일반 조직 분포를 테스트하는 방법을 강조한다. 이것은 종양 베어링 마우스의 살아있는 화상 진찰에 선행된 근적외선 형광염염으로 단백질-A 정제항체를 표지하여 달성됩니다.

서론

FDA는 1986년^1,^2에서CD3(OKT3, 무로모나브)를 대상으로 한 최초의 단일클론^항체를승인했다. 그 이후 20년 동안 면역 체크포인트 억제제^3에대한 항체의 압도적인 성공으로 인해 항체 공학 분야에서 급속한 폭발이 있었습니다. 면역 계통의 간접적인 활성화 외에, 항체는 면역 효과기 세포를 정확하게 관여하기 위하여 암세포를 직접 플래그화하고, 죽음 수용체 작용제를 통해 세포 독성을, 종양 세포 생존 신호를 막고, 혈관 신생 (혈관의 성장), 면역 체크포인트 조절을 제한하고, 방사성 동위 원소를 전달하고, 화학 요법 약물 및 siRNA를 공자에이전트로^2. 또한, 환자 유래 T세포 및 NK 세포(CAR-T 및 CAR-NK)의 표면에 다양한 항체의 단일 사슬 가변 단편(scFv)을 연구하는 것은 세포 기반 치료법에 대한 임상 조사의 급속한 성장 영역이다^4.

종양 세포를 발현하는 항원에게 선택성을 제공하는 항체 기반 약물의 초고친화성은 매력적인 제대리인입니다. 마찬가지로, 치료 항체(또는 화학약물)의 표적 전달 및 종....