이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

토끼의 동맥 파우치 미세 외과 분기 동맥류 모델

2.7K 조회수

DOI:

10.3791/61157

2020년 5월 14일

이 논문에서

요약

두개내 동맥류 치료를 위한 혈관 내 장치를 개발하고 테스트하는 것은 여전히 매우 중요합니다. 오늘날 사용되는 대부분의 동맥류 모델은 동맥 퇴화 벽의 중요한 특성이나 진정한 분기의 혈역학을 놓치고 있습니다. 따라서 우리는 토끼에서 새로운 동맥 파우치 분기 모델을 설계하는 것을 목표로했습니다.

초록

두개내 동맥류에 대한 혈관 내 치료는 지난 수십 년 동안 중요성을 얻었고, 결과적으로 혈관 내 장치를 검사해야 할 필요성이 증가하고 있습니다. 류학적, 혈역학적 및 동맥류 벽 조건을 존중하는 동물 모델은 매우 보증됩니다. 따라서, 본 연구의 목적은 토끼에서 변형되지 않고 변형되지 않은 벽 조건을 갖는 자가 동맥류 분기 동맥류를 만들기 위해 신규한 표준화되고 재현 가능한 수술 기술을 설계하는 것이었다.

Bifurcation 동맥류는 좌측 일반적인 경동맥의 우측 해부학에 의해 생성되었으며, 둘 다 미세 외과 적으로 봉제 된 동맥 파우치의 부모 동맥 역할을합니다. 이식편을 근위 우측 공통 경동맥으로부터 취하고, 대조군(n=7, 즉각적인 자가 재이식) 또는 변형(n=7, 자가 재이식 전에 20분 동안 100개의 국제 단위 엘라스타제와 함께 인큐베이션)하기 위해 취하였다. 파우치 및 모동맥 개통은 생성 직후 형광 혈관조영술에 의해 조절되었다. 추적 관찰 (28 일)에서 모든 토끼는 대조 강화 자기 공명 혈관 조영술 및 형광 혈관 조영술을 거친 다음 동맥류 수확, 거시적 및 조직 학적 평가를 받았다.

총 16 마리의 암컷 뉴질랜드 흰 토끼가 수술을 받았다. 두 마리의 동물이 조기에 사망했습니다. 후속 조치에서 모든 동맥류의 85.72 %가 특허를 유지했습니다. 두 그룹 모두 시간이 지남에 따라 동맥류 크기의 증가를 나타냈다. 이것은 대조군(생성 시의 6.48 ± 1.81 mm3 대 추적 관찰시 19.85 ± 6.40 mm3, p = 0.037)에서 변형된 그룹(생성 시 8.03 ± 1.08 mm3 대 후속± 6.16mm3, p = 0.054)에서 더 두드러졌다.

우리의 발견은 미세 외과 적 접근법에서 다른 벽 조건을 가진 분기 동맥류를 만들 수있는이 새로운 토끼 모델의 적절성을 보여줍니다. 시간이 지남에 따라 동맥류 성장의 우수한 장기 개통성과 특성을 감안할 때,이 모델은 새로운 혈관 내 요법의 전임상 평가를위한 중요한 도구로 작용할 수 있습니다.

서론

두개내 동맥류(IA) 파열로 인한 Subarachnoid 출혈은 혈관내 또는 미세외 과적 폐색 기술(1,2,3,4)에 의해 효과적으로 조절될 수 있다. 코일링 후 IA 재발의 주요 한계를 극복하기 위해 다른 혈관 내 치료법은 지난 수십 년 동안 혈관 내 장치 테스트의 필요성이 증가하면서 중요성을 얻었습니다. 이러한 새로운 치료 접근법을 테스트하기 위해 유변학 적 특성, 혈역학 및 동맥류 벽 상태를 존중하는 적절한 동물 모델은 5,6,7 개가 매우 보증됩니다. 이러한 맥락에서, 임상 및 전임상 연구는 이미 폐색 후 동맥류 파열 및 재발에 관한 동맥류 벽 조건의 중요한 역할을 밝혀 냈으며, 특히 벽화 세포 7,8,9의 손실에 초점을 맞추....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

모든 수의학 치료는 제도적 지침 (모든 실험은 스위스 광저우 베른 동물 관리위원회 (BE 108/16)의 승인을 받음)에 따라 수행되었으며 이사회 인증 수의사 마취 전문의의 감독하에 수행되었습니다. ARRIVE 지침과 3R 원칙은17,18을 엄격히 준수했습니다.

참고 : 모든 동물을 섭씨 22 \u201224 ° C (°C)의 실온에 보관하고 12 시간 (h) 밝고 어두운 사이클을 유지하십시오. 매번 물, 펠릿 및 광고 리비툼 건초 다이어트에 무료로 액세스 할 수 있습니다. 통계적 분석은 비모수 Wilcoxon-Mann-Whitney-U 검정을 사용하여 수행되었다. 0.05의 확률 값(p)≤ 유의한 것으로 간주되었다.

1. 수술 전 단계

  1. 23 ± 3 °C의 온도를 유지하는 조용하고 무균 수술실 바로 옆에 수술을 계획한 모든 토끼에 대한 상세한 수술 전 임상 검사를 수행하십시오.
    1. 각 동물의 무게를 기록하고, 점막, 모세관 리필 시간 및 펄스 품질을 거시적으로 평가하십시오.
    2. 청진기와 복부 촉진으로 심장 청진을 추가로 수행하십시오.
    3. ....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

일곱 마리의 동물로 구성된 파일럿 시리즈에 이어 완전히 16 마리의 동물이 실험 프로토콜에 포함되었습니다. 두 마리의 동물이 조기에 사망하여 최종 분석에서 제외되었습니다 (사망률 12.5 %). 14마리의 동물에 대해 계산하여, 형광 혈관조영술 동안 즉각적인 동맥류 개통률은 대조군 및 변형군 모두에서 71.43%였다. 네 개의 동맥류는 연속적인 혈전 대피로 다시 열어야했으며 반복적 인 형광 혈관 조영술 후에 모든 경우에 문서화 된 개통이 있었다 (100 %). MR- 및 형광-혈관조영술에서의 동맥류 개통률은 대조군에서 85.72%, 28일 후 추적에서 엘라스타제 변형군에서 85.72%였다(두 동물은 완전한 모동맥 및 동맥류 혈전증을 나타냈고, 따라서 추가 분석에서 제외되었다). 부분 혈전증은 나머지 12건 중 3건에서 MR 영상화(도 9)의 3차원 재구성을 분석하여 관찰하였다. 두 그룹 모두 시간이 지남에 따라 동맥류 크기의 증가를 보여주었습니다. 대조군: 생성시의 6.48 .......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

우리의 연구는 토끼의 벽 조건이 다른 진정한 분기 동맥류 모델을 만들 가능성을 보여줍니다. 전반적으로, 평균 체중이 3.7 ± 0.09kg이고 평균 연령이 112 ± 3 일인 14 마리의 암컷 뉴질랜드 흰 토끼가 연구에 포함되었습니다. 모든 동맥류의 85.72 %는 28 일 동안 추적 관찰 기간 동안 특허를 유지했습니다. 두 마리의 동물이 조기에 사망했습니다 (사망률 12.5 %).

이전의 연구는 혈관 내 동맥류 치료 25,26,27,28의 관리를 분석하기 위해 다양한 두개외 동맥류 모델을 제안했다. 그러나 이들 중 어느 것도 다른 벽 조건의 비교를 허용하지 않았습니다. 이전의 실험은 이미 동맥류 측벽 쥐 모델29

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

이 연구는 연구위원회, Kantonsspital Aarau, Aarau, Switzerland 및 스위스 국립 과학 재단 SNF (310030_182450)의 연구 기금에 의해 지원되었습니다. 저자는 제시된 연구의 설계 및 수행에 대한 전적인 책임이 있으며 경쟁 이익을 선언하지 않습니다.

감사의 글

저자들은 수술 전 단계에서 탁월한 지원과 기술 지원을 해준 Olgica Beslac과 Kay Nettelbeck과 장기적인 동물 건강에 대한 헌신적 인 감독을 위해 Alessandra Bergadano, DVM, PhD에게 감사드립니다.

....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
3-0 흡수성 봉합Ethicon Inc., 미국VCP428G
4-0 비흡수성 봉합B. Braun, 독일G0762563
6-0 비흡수성 봉합B. Braun, 독일C0766070
9-0 비흡수성 봉합사B. Braun, 독일G1111140
아드레날린아미노 AG1445419모든 제네릭
AmiodaroneHelvepharm AG5078567모든 일반
마취 기계Drä ger기타
아스피린Sanofi-Aventis (스위스) SA622693모든 일반
아트로핀Labatec Pharma SA6577083모든 일반
대역 통과 필터 파란색ThorlabsFD1B기타
모든 밴드 패스 필터 녹색ThorlabsFGV9기타
바이폴라 겸자기타
자전거 스포트라이트기타
Biemer 혈관 클립 (2 x)B. Braun Medical AG, Aesculap, SwitzerlandFD560R임시
이중 분광 지수 (신생아)기타
혈압 커프 (신생아)기타
ClamoxylGlaxoSmithKline AG758808일반
DexmedetomidineEver Pharma136740-1모든 일반
심전도 전극,기타
ElastaseSigma, Aldrich45125모든 일반
EphedrineAmino AG1435734모든 일반
EsmololOrPha Swiss GmbH3284044모든 일반
펜타닐 (정맥 사용)Janssen-Cilag AG98683모든 제네릭
펜타닐(경피)Mepha Pharma AG4008286모든 제네릭
FluoresceineCuratis AG5030376모든 일반
FragminPfizer PFE Switzerland GmbH1906725모든 일반
Glico모든 일반
가열 패드
아이소톤성 염화나트륨 용액(0.9%)Fresenius, KABI336769제네릭
케타민화이자342261, 제네릭
실험실용 셰이커스튜어트SRT6기타
리도카인Streuli, Pharma AG747466네릭
Longuettes,기타
MetacamBoehringer IngelheimP7626406모든 일반
MethadoneStreuli Pharma AG1084546모든 일반
Microtubes기타
모든 마이크로 니들 홀더
기타 MidazolamAccord Healthcare AG7752484모든 일반
니들 홀더
O2-페이스 마스크기타
작동 현미경Wild Heerbrugg기타
PapaverineBichsel일반
Prilocaine-lidocaine 크림Emla일반
PropofolB. Braun Medical AG, 스위스모든 일반
맥박 산소 측정기
직장 온도 프로브(신생아)기타
RopivacaineAspen Pharma, Schweiz GmbH1882249일반
ScalpellSwann-Morton210기타
소형 동물 면도기기타
스마트폰기타
연조직 겸자기타
연조직 스프레더기타
스테인레스 스틸 스폰지 그릇,기타
멸균 마이크로 면봉기타
청진기
기타 직선 및 곡선 마이크로 집게기타
기타
직선 및 곡선 겸자기타
수술 드레이프기타
수술 가위기타
주사기 1ml, 2ml 및 5ml기타
Tris-BufferSigma Aldrich93302일반
혈관 클립 어플리케이터B. Braun, 독일FT495T
정맥 및 동맥 카테터 22G모든 일반
VitarubinStreuli Pharma AG6847559모든 일반
Yasargil 타이탄 표준 클립 (2 x)B. Braun Medical AG, Aesculap, SwitzerlandFT242T임시
사 사 사 , , , , , , , , , , , , , , 제, , , , , , , , , , , 직선 및 곡선 마이크로 가,

참고문헌

  1. Wanderer, S., Mrosek, J., Gessler, F., Seifert, V., Konczalla, J. Vasomodulatory effects of the angiotensin II type 1 receptor antagonist losartan on experimentally induced cerebral vasospasm after subarachnoid haemorrhage. Acta Neurochirurgica (Wien). 160 (2), 277-284 (2018).
  2. Vatter, H., et al.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

태그