본 프로토콜은 단핵세포, 마이크로글리아, 대식세포 및 수지상 세포를 포함하는 특정 안구 단핵 교핵 세포집단을 식별하기 위해 다중 파라미터 유동 세포측정 분석을 목적으로 전체 눈을 단일 세포 현탁액으로 소화하는 방법을 제공한다.
방법 논문
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 0.6ml 마이크로 원심분리기 튜브 | Fisher Scientific | 05-408-120 | |
| 1.7ml 마이크로 원심분리기 튜브 | Costar | 3620 | |
| 10ml 피펫 | Fisher Scientific | 431031 | |
| 15ml 원추형 | ThermoFisher | 339650 | |
| 1x HBSS, 500ml | Gibco | 14025-092 | |
| 2.5ml 주사기 | Henke Sass Wolf | 7886-1 | |
| 20% 파라포름알데히드 용액 | 전자 현미경 과학 | 15713-S | |
| 25ml 피펫 | Fisher Scientific | 431032 | |
| 30G 바늘 | Exel | 26437 | |
| 3ml 루어 잠금 주사기 | Fisher Scientific | 14955457 | |
| 41 x 41 x 8mm 폴리스티렌 무게 접시 | Fisher Scientific | 08-732-112 | |
| 50ml 원뿔 | Falcon | 352070 | |
| 96-well, 뚜껑이 없는 U-하단 분석 플레이트 | Falcon | 353910 | |
| 아민 반응성 비드 | ThermoFisher | A10628 | |
| 분석 소프트웨어 | FlowJo | v 10 | |
| 안티 랫 및 안티 햄스터 Ig 카파 비드 세트 | BD Biosciences | 552845 | |
| C57BL/6J 마우스 | Jackson Laboratory | 664 | |
| 세포 계수기 | Invitrogen | AMQAX1000 | |
| 세포 계수기 슬라이드 | Invitrogen | C10283 | |
| 보상 비드 | ThermoFisher | 01-1111-42 | |
| 카운트 비드 | ThermoFisher | 01-1234-42 | |
| 곡선 겸자 | Fisher Scientific | 16-100-123 | |
| 소화 효소 | Sigma Aldrich | 5401020001 | |
| 해부 현미경 | National Optical and Scientific Instruments, Inc. | DC3-420T | |
| 해리 튜브 | Miltenyi Biotec | 130-096-334 | |
| DNase | Roche | 10104159001 | |
| 전자 해리기 | Miltenyi Biotec | 130-095-937 | |
| FACS Diva 소프트웨어 | BD Biosciences | ||
| Fc 블록, 쥐 안티 마우스 CD16 / CD32 | BD Biosciences | 553142 | |
| 미세 집게 | Integra Miltex | 17035X | |
| 플로우 버퍼 | Miltenyi Biotec | 130-091-221 | |
| 유세포 분석기 | BD Biosciences | ||
| 플로우 튜브 | Falcon | 352008 | |
| Hamster 안티 마우스 CD11c BV421 | BD Biosciences | 562782 | |
| Ice | bucket Fisher Scientific | 07-210-123 | |
| Live/Dead dye | ThermoFisher | 65-0866-14 | |
| 용해 용액, 10x 용액 | BD Biosciences | 555899 | |
| Micro titer tube and rack | Fisher Scientific | 02-681-380 | |
| 마우스 안티 마우스 CD64 PE | BioLegend | 139304 | |
| 마우스 안티 NK1.1 PECF594 | BD Biosciences | 562864 | |
| P1000 피펫 팁 | Denville Scientific | P2404 | |
| P1000 피펫 | Gilson | FA10006M | |
| P2 피펫 팁 | eppendorf | 22491806 | |
| P2 피펫 | Gilson | FA10001M | |
| P20 피펫 Gilson | FA10003M | ||
| P200 피펫 팁 | Denville Scientific | P2401 | |
| P200 피펫터 | Gilson | FA10005M | |
| Pipet man | Fisher Scientific | FB14955202 | |
| 쥐 안티 마우스 B220 PECF594 | BD Biosciences | 562313 | |
| 쥐 안티 마우스 CD11b APC-Cy7 | BD Biosciences | 557657 | |
| 쥐 안티 마우스 CD19 AlexaFluor 700 | BD Biosciences | 557958 | |
| 쥐 안티 마우스 CD19 PE | BD Biosciences | 553786 | |
| 쥐 안티 마우스 CD4 PECF594 | BD Biosciences | 562314 | |
| 쥐 안티 마우스 CD45 FITC | ThermoFisher | 11-0451-82 | |
| 쥐 안티 마우스 CD45 PE-Cy7 | BD Biosciences | 552848 | |
| 쥐 안티 마우스 CD8 PECF594 | BD Biosciences | 562315 | |
| 쥐 안티 마우스 Ly6C | BD Biosciences | ||
| 쥐 안티 마우스 Ly6G PECF594 | BD Biosciences | 562700 | |
| 쥐 안티 마우스 MHC II AlexaFluor 700 | BioLegend | 107622 | |
| 쥐 안티 마우스 Siglec F PECF594 | BD Biosciences | 562757 | |
| 쥐 안티 마우스 Tim4 AlexaFluor647 | BD Biosciences | 564178 | |
| 쉐이킹 인큐베이터 | Labnet | 311DS | |
| 스프링 가위 | Fine Science Tools | 15024-10 | |
| 멸균 세포 여과기, 40mm 나일론 메쉬, | Fisher Scientific | 22363547 | |
| 멸균수, 500ml, | Gibco | A12873-01 | |
| 스윙 버킷, 원심분리기 | eppendorf | 5910 R | |
| , Trypan blue, 0.4% 용액 | Gibco | 15250061 |
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