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방법 논문

납 II를 사용하여 마취 마우스의 심전도 기록

13.9K 조회수

DOI:

10.3791/61583

2020년 6월 20일

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

우리는 기술적으로 쉽게, 저렴, 빠르고, 작은 마우스에서 저렴하고 저렴한 ECG 프로토콜을 제시하고, 향상된 감도로 수행 할 수 있습니다. 우리는 마우스에 있는 약리학 에이전트, 유전 수정 및 질병 모형을 공부하기 위한 검열 접근으로 이 방법을 건의합니다.

초록

심전도는 심장 전도 시스템을 평가하기위한 귀중한 도구입니다. 동물 연구는 심전도에 관한 새로운 유전 및 약리학적 정보를 생성하는 데 도움이되었습니다. 그러나, 마우스와 같은 생체 내의 작은 동물에서 심전도 측정을 하는 것은 도전적이고 있습니다. 이를 위해, 우리는 많은 장점을 가진 마취 마우스에서 심전도 기록 방법을 사용했습니다 : 그것은 기술적으로 간단한 절차이며, 저렴하고, 짧은 측정 시간을 가지고 있으며, 어린 쥐에서도 저렴합니다. 마취를 사용하는 한계에도 불구하고 제어 그룹과 실험 그룹 간의 비교는 향상된 감도로 수행 될 수 있습니다. 우리는 이 프로토콜의 타당성을 결정하기 위하여 자율 신경계의 작용제 그리고 길항제를 가진 마우스를 취급하고 이전 보고와 우리의 결과를 비교했습니다. 우리의 심전도 프로토콜은 atropine를 가진 처리에 증가한 심박수 및 QTC 간격을 검출했습니다, carbachol 처리 후에 심박수 및 QTC 간격을 감소시키고, 이소프레네랄린을 가진 더 높은 심박수 및 QTC 간격그러나 propranolol의 관리에 ECG 매개변수에 있는 어떤 변경도 주의하지 않았습니다. 이러한 결과는 이전 보고서에서 지원되며 이 심전도 프로토콜의 신뢰성을 확인합니다. 따라서, 이 방법은 높은 비용 및 기술적 어려움으로 인해 시도되지 않을 심전도 측정을 만들기 위한 스크리닝 접근법으로 사용될 수 있다.

서론

심장 박동의 전기 적 활성을 측정하는 심전도 (ECG)는 심장 전도 시스템을 평가하는 귀중한 도구입니다. 심전도에 의해 측정되는 매개 변수에는 심박수, PR 간격, QRS 지속 시간 및 QT 간격이 포함됩니다. 간단히 말해서, PR 간격은 심방 부비동 노드에서 대상동맥 노드를 통해 Purkinje 섬유로 이동하는 데 필요한 시간에 해당합니다. QRS 지속 시간은 Purkinje 시스템 및 심실 심근을 통해 심실 탈극화가 발생하는 시간입니다. 및 QT 간격은 심실 재양극화의 지속 시간입니다.

마우스의 심전도 기록은 연구원이 심장 기능을 검토하고 부정맥, 심방 세동 및 심부전과 같은 심장 표현형의 생리적 및 병리학적 메커니즘을 결정하는 데 도움이 되었습니다. 대부분의 심혈관 연구는 유전자 조작 마우스 모형에 있는 연구 결과를 관련시켰습니다. 유전적으로 조작된 작은 쥐로부터 심전도 기록에 대한 의미 있는 데이터를 얻는 것은 종종 어려운 일입니다.

마우스1에서ECG를 수행하기 위한 몇 가지 방법이 있다. 연구 결과에 따르면 마취가 심장 기능에 미치는 영향이 잘확립되었기때문에 의식이 있는 동물의 심전도 기록이 마취 동....

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프로토콜

모든 동물 절차는 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 지역위원회에 의해 승인되었다, 경희대학 (라이센스 번호: KHUASP (SE)-18-108) 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 건강 가이드의 미국 국립 연구소에 부합.

1. 실험동물

  1. 실험실 동물의 치료 및 사용에 대한 지침에 따라 모든 마우스 (39 마우스, Balb /c, 남성, 7\u20129 주 이전)를 병원체없는 시설에 보관하십시오.
  2. 음식과 물에 무료로 액세스 할 수있는 일정한 온도에서 12 h 빛 / 어두운 주기에 마우스를 유지합니다.

2. 마취제 준비

참고: 트리브로모에탄올은 심박수의 안정성과 트리브로메탄올 마취 마우스1,5,6의 에코카르디그래피의 재현성을 기반으로 케타민 조합 및 이소플루란위에사용됩니다.,

  1. 1mL 고등 아밀 알코올 당 1 g의 농도에서 2,2,2-트리브로모에탄올의 재고 용액을 확인합니다. 40\u201245 °C에서 24 시간 동안 ....

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결과

약리학 실험

우리의 비침습적 심전도 측정이 심장 전도 시스템에 자율 변조의 영향을 반영하는지 여부를 결정하기 위해, 일반 Balb /c 마우스는 자율 신경계 (ANS)의 작용제 및 길항제와 도전했다. 아트로핀과 카르바콜은 각각 부교감 자율 봉쇄 및 자극을 위해 사용되었으며, 프로프라놀롤과 이소프레네랄린은 각각9개의동정적인 자율 봉쇄와 자극을 유도하도록 투여되었다.

심박수는 아트로핀-(p&0.05)와 이소프레네라인 처리마우스(p&0.05)에서 크게 증가하여 카바콜(p<; 0.005) 차량(차량, 391 ±13 bpm 대 아트로핀, 487 ±15 bpm 대 카르바콜, 158 ± 7 bpm; 차량, 382 ± 14 bpm 대 이솝레나라인, 548 ± 8 bpm; 차량, 404 ±25 bpm vs 프로프라노 롤, 303p bpm).......

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토론

프로토콜에는 몇 가지 중요한 단계가 있습니다. 주변 환경은 소음과 진동이 없어야 합니다. 심전도 전극은 연구원이 기술적으로 경험할 때까지 삽입 단계에 예비 실험이 필요한 피부 아래에 안정적으로 일관되게 삽입되어야 합니다. 또한, 마취제는 적절하게 준비및 저장하고 적절한 용량으로 사용되어야 한다. 마지막으로 PQRS 파동은 평균 보기 창의 개별 ECG 비트에 적절하게 위치해야 합니다.

우리의 연구는 약물의 테스트를 포함. 그러나 약리학 시험이 생략되면 마취제를 주입한 후 5분 동안 레코딩을 시작하여 4.7단계를 수정할 수 있으며, 심전도 데이터는 10 분에서 15분 이상 비교적 안정되어 있으며 첫 번째 측정동일한 마우스 6h로 복제되었다.

약물에 의한 자율 봉쇄 및 자극은 심박수에 관한 차동 반응을 유도합니다. 여러 프로토콜은 심전도 연구에 사용되었습니다. 마우스의 텔레미터 ECG 기록을.......

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공개 사항

이해 상충, 재정적 또는 기타 충돌은 저자에 의해 선언되지 않습니다.

감사의 글

이 연구는 한국국립연구재단(NRF)(2015R1C1A2AA01052419 및 2018R1D1A1B7042484)이 관리하는 기초과학 연구 프로그램에 의해 지원되었다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
2,2,2-트리브로모에탄올시그마-알드리치T48402-25G마취제, Avertin
AnimalJapan SLC, Inc., 시즈오카, 일본Balb/c 마우스, 수컷, 7-9
아트로핀시그마-알드리치A0123부교감 신경 길항제
BioAmpAD Instruments, Bella Vista, AustraliaML132바이오 증폭기
CarbacholSigma-AldrichC4382parasympathetic agonist
침술 바늘이 있는 전극DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, KoreaDB1060.20 x 15 mm
IsoprenalineSigma-AldrichI2760sympathetic agonist
LabChart 8AD Instruments, Bella Vista, Australia데이터 분석 소프트웨어
Mouse foodLabDiet, St. Louis, MO, USA5L79마우스 다이어트
PowerLab 2/28AD 기기, 벨라 비스타, 호주데이터 수집 시스템
프로프라놀롤시그마-알드리치P0884교감신경 길항제
SPSS 통계 프로그램SPSSSPSS 25.0통계 프로그램

참고문헌

  1. Ho, D., et al. Heart rate and electrocardiography monitoring in mice. Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).
  2. Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. Cardiovascular physiol....

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재인쇄 및 허가

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II