이 프로토콜은 농약이 꿀벌(아피스 멜라이프라)재생에 미치는 이해를 향상시키기 위해 개발되었으며, 꿀벌 여왕과 그 노동자 관리인을 통제 된 실험실 환경에서 농약에 노출시키는 방법을 확립하고 관련 반응을 주의 깊게 모니터링합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
꿀벌에 대한 현재 위험 평가 전략은 성인 또는 미숙한 작업자 꿀벌에 수행 실험실 테스트에 크게 의존하지만, 이러한 방법은 정확하게 꿀벌 여왕에 농약 노출의 효과를 캡처하지 않을 수 있습니다. 꿀벌 식민지 안에 수정 계란의 유일한 생산자로, 여왕은 틀림없이 기능 식민지 단위의 가장 중요한 단일 멤버입니다. 따라서 농약이 여왕의 건강과 생산성에 미치는 영향을 이해하는 것은 농약 위험 평가의 중요한 측면으로 간주되어야 합니다. 여기에, 적응 방법은 꿀벌 여왕과 노동자 여왕을 작업자 다이어트를 통해 투여 농약 스트레스에 노출, 실험실에서 계란 생산을 추적하고 전문 케이지를 사용하여 첫 번째 인스타 백과를 평가, 여왕 모니터링 케이지로 언급. 이 방법의 의도된 사용을 설명하기 위해, 노동자 여왕 승무원이 imidacloprid의 치사 복용량을 포함하는 규정식을 공급하고 여왕에 대한 효력을 감시한 실험의 결과가 기술되었습니다.
서론
농산물에 대한 글로벌 수요 증가로 인해 현대 농업 관행은 종종 농약의 사용을 요구하여 작물 수확량을 줄이거나 해칠 것으로 알려진 수많은 해충을 통제해야합니다1. 동시에, 많은 과일, 야채, 견과류 작물의 재배자는 풍부한 작물 수확량을 보장하기 위해 상업 꿀벌 식민지에서 제공하는 수분 서비스에의존2. 이러한 관행은 꿀벌(아피스 멜라이프라)을포함한 수분 공급원이 발생할 수 있으며, 살충제 잔류물의 유해한 수준에 노출될 수 있습니다3. 동시에, 꿀벌 식민지에서 기생 바르로아 파괴기 mite 감염의 광범위한 존재는 자주 거브키퍼가 미티시드로 자신의 두드러기를 치료하도록 요구, 이는 또한식민지4의건강과 장수에 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다4,5,6. 농약 제품의 유해한 영향을 줄이고 완화하기 위해, 그들의 사용에 대한 권장 사항이 유익한 곤충을 보호하기 위해 만들 수 있도록 구현 하기 전에 꿀벌에 그들의 안전을 완전히 평가 할 필요가있다.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
1. QMC 어셈블리
- 도 1B에도시된 바와 같이 삽입된 단일 계란 누워 판(ELP)을 부품(도1A)에서QMC를 조립한다. 작업자가 케이지에 추가될 때까지 피더 튜브를 추가하지 마십시오. 실험실 급 테이프로 4 개의 피더 구멍을 일시적으로 덮습니다.
- 여왕 제외기와 먹이 챔버 문을 먹이실 위에 삽입하여 여왕이 먹이실에 들어가고 치료된 식단에 연락하지 못하게 합니다. 자세한 어셈블리 세부 정보는 Fine et al.32를 참조하십시오.
- 성인 백과 사전 24시간 전에 꿀벌 식민지에서 덮인 작업자 무리를 포함하는 왁스 빗 프레임을 수집하고 무리 상자 안에 인큐베이터(34.5°C)에 넣습니다. 24시간 후, 밀폐된 꿀벌을 프레임에서 털어내고 곤충 장벽 페인트(예: 플루온)가 늘어선 열린 용기에 붓고 꿀벌이 기어나가는 것을 방지합니다.
- 각 QMC의 알 누워 챔버에 체중50 개 이상의 꿀벌 (5 g ≈ 50 꿀벌44,45)를추가합니다. 실험에서 다양한 유전 적 풀이 표현되도록, 적어도....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
계란의 생산은 계란 생산의 한 번 매일 관찰과 치료 그룹 당 15 케이지와 위에서 설명 한 대로 조립 및 유지 QMC에서 모니터링되었다. 주로 카니올란 주식의 새로 짝을 이린 여왕은 여왕 사육자로부터 하룻밤 사이에 구입하여 출하했으며, 일리노이 어바나 샴페인 대학의 꿀벌 연구 시설에서 표준 상업 방법에 따라 유지된 3개의 식민지에서 꿀벌 노동자를 얻었습니다. 여기서, 4개의 규정식 처리 단은 이용되었습니다: 1) 50 ppb (g/g) 자당 용액 및 꽃가루 보충교재 (50 ppb - p +s), 2) 10 ppb imidacloprid 자당 용액 및 설문 조사 엔 보충 (10 ppb -p+s), 3) 10 ppb imidacloprid 꽃가루 보충 단독으로 (10 ppb - p), 및 4) 치료 그룹과 같은 아세톤의 동등한 볼륨을 포함하는 다이어트 주어진 대조군 (CTRL).
매일 계란 수의 치료 관련 변화는 경미한 수정과 함께 Fine et al.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
여성 독방 곤충뿐만 아니라 안락 사회 곤충 식민지의 여왕은 농약25,28,29,30,33과같은 생물학적 스트레스에 의해 영향을 받을 수 있습니다. 꿀벌에서, 그들은 그들의 배려와 노동자 꿀벌에 의해 먹이의 변경을 통해 발생할 수 있기 때문에 여왕에 농약의 효력은 간접적일 지도 모릅니다. 현장 기반 연구29에서보고된 것과 유사한 대표적인 결과는 CMC를 사용하여 실험실 환경에서 암화학 물질이 퀸 성능에 미치는 영향을 효율적으로 측정하여 현장 기반 접근법에 유사한 결과를 생성할 수 있음을 보여줍니다. 또한, 이러한 결과 노동자 다이어트 소비와 계란 생존에 imidacloprid의 영향에 빛을 발산.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 선언할 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
에이미 캐시 아메드 박사, 나다니엘 J. 비치, 앨리슨 엘 산키 박사님이 이 사업을 수행해 주셔서 감사합니다. 이 출판물에서 무역 이름이나 상업용 제품에 대한 언급은 특정 정보를 제공하기 위한 목적으로만 사용되며 미국 농무부의 추천이나 보증을 의미하지는 않습니다. USDA는 동등한 기회 제공 자 및 고용주입니다. 이 연구는 국방 고급 연구 프로젝트 기관 # HR0011-16-2-0019에서 진 E. 로빈슨과 후이민 자오, USDA 프로젝트 2030-21000-001-00-D, 일리노이 시내 샹치에 있는 커뮤니티 칼리지 학생들을 위한 페노티픽 가소성 연구 경험의 보조금에 의해 지원되었습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Fluon | BioQuip, Rancho Dominguez, CA | 2871A | |
| 꿀벌 여왕 | Olivarez Honey Bees, Orland, CA | ||
| Imidacloprid | Sigma-Aldritch, St. Louis, MO | 37894 | |
| MegaBee Powder | MegaBee, San Dieago, CA | ||
| 마이크로 원심분리기 튜브 2mL | ThermoFisher Scientific, Waltham, MA | 02-682-004 | |
| 바늘 20 게이지 | W. W. Grainger, Lake Forest, IL | 5FVK4 | |
| 황산칼 | Sigma-Aldritch, St. Louis, MO | P0772 | |
| 퀸 모니터링 케이지 | University of Illinois Urbana-Champaign | 특허 출원 번호: | |
| 20190350175 Sucrose | Sigma-Aldritch, St. Louis, MO | S8501 | |
| 범용 마이크로플레이트 뚜껑 | ThermoFisher Scientific, 매사추세츠주 월섬 | 5500 |
참고문헌
- Hedlund, J., Longo, S. B., York, R. Agriculture, pesticide use, and economic development: A global examination (1990-2014). Rural Sociology. 85 (2), 519-544 (2020).
- Calderone, N. W. Insect pollinat....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
