체외 충격파 요법 유도 연조직 재생의 표준화된 쥐 모델

요약

이 논문은 충격파 치료를 통한 조직 재생의 표준화된 쥐 모델에 대해 설명합니다.

초록

충격파 요법(SWT)은 여러 조직에서 유망한 재생 효과를 보여줍니다. 그러나 근본적인 분자 메커니즘은 잘 이해되지 않았습니다. 새로운 혈관 형성 과정인 혈관 신생은 최근에 발견된 SWT의 효과뿐만 아니라 부드러운 조직에서 재생의 주요 동인입니다. SWT의 기계적 자극이 어떻게 혈관신생과 재생을 유도하는지, 그리고 어떤 경로가 관련되는지는 완전히 이해되지 않았습니다. SWT의 임상적 사용을 더욱 개선하고 기계적 자극이 조직 및 조직 재생에 어떤 영향을 미칠 수 있는지에 대한 귀중한 정보를 얻으려면 SWT의 표준화된 모델이 필요합니다. 이로써 우리는 뒷다리 허혈 모델을 활용하여 충격파 요법 유도 재생의 표준화되고 구현하기 쉬운 쥐 모델을 설명합니다.

서론

충격파 요법(SWT)은 체외 적용을 통해 신장 결석을 분해하는 수단으로 임상 실습에 처음 도입되었습니다. 1990년대에, 반복적인 쇄석술에 따른 X-선 기록에서 장골능이 두꺼워지는 것이 우연히 발견되어 SWT¹의 뼈 형태 형성 효과가 밝혀졌습니다. 이로 인해 정형외과 분야에서 새로운 응용 분야가 급증했습니다. SWT는 장골 불유합, 외측 상과염 및 아킬레스건염 ^2,3,4,5에 대한 인정된 치료 옵션으로 발전했습니다. 최근의 증거는 이제 정형외과를 넘어 더 부드러운 조직과 상처 치유 장애로 기구의 스펙트럼을 다시 넓히고 있습니다 ^6,7. 여기서, 연구는 예를 들어 뇌졸중 후 발기 부전 또는 경련을 포함한 이질적인 조건 집합체에서 SWT의 효과를 보여줄 수 있습니다 ^8,....

프로토콜

이 실험은 인스부르크 의과대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회와 오스트리아 과학부(BMWF-66.011/0110-V/3B/2019)의 승인을 받았습니다.

1. 마취 유도 및 운영 설정

1. 동물 시술을 위한 적절한 환경을 준비하십시오: 장비 살균, 표면 소독, 일회용 마스크, 격리 가운 및 장갑 사용.
2. 18-12주 된 생쥐(실험 환경에 따라 균주 및 성별)를 이소플루란 기화기에 부착된 챔버에서 4%로 진정시킵니다.
3. 깊은 통증 인식을 위한 지표로 페달 또는 귓바퀴 반사를 통해 충분한 진정 효과를 확인하십시오.
4. 동물이 충분히 진정되면 이소플루란 흐름을 끄고 승인된 동물 관리 및 사용 프로토콜에 따라 진통제 및 마취제를 투여합니다(예: 마취제로 케타민 염산염(체중 80mg/kg), 복강 내 진통제로 자일라진 염산염(체중 5mg/kg).
   참고: 동물을 마취실에 넣기 전에 복강내 약물로 주사기를 준비하십시오.
5. 페달 철수 반사를 평가하여 주입 5분 후 마취 깊이를 검사합니다.
6. 각막 손상을 방지하기 위해 안연고(예: 레티놀팔미탓 0.5g)를 바르십시오.
7. 수술 부위 안....

결과

이 프로토콜을 사용하면 SWT 중재 후 뒷다리 관류의 상당한 차이를 관찰하고 모니터링할 수 있습니다. 대표적인 이미지는 SWT로 치료한 사지(그림 1B)와 치료되지 않은 대조군(그림 1A)의 현저한 차이를 보여줍니다. 여기서 관류는 낮은 관류를 나타내는 차가운 색상과 높은 관류를 나타내는 따뜻한 색상으로 열 플레어링을 통해 묘사됩니다. 레이저 도플러 판독값의 정량화는 수술 후 4주 동안 관류가 크게 증가한 것을 보여줍니다. (그림 1C), SWT 처리 동물에서 동시에 더 적은 괴사가 관찰될 수 있습니다(그림 1D). 괴사는 앞서 설명한 바와 같이 평가되었다¹⁶

토론

충격파 치료는 여러 연조직 재생 환경에서 유망한 결과를 보여줍니다. 그러나 이러한 재생 능력을 더욱 강화, 개선 또는 격리하기 위해서는 먼저 분자 수준에서 SWT 유도 재생의 기초를 밝혀야 합니다. 조직 재생은 복잡하며 선천성 및 후천성 면역, 염증, 세포주기 진행, 세포사멸, 세포 분화, 혈관 신생 등을 포함한 많은 생물학적 과정을 포함합니다^17,18. SWT의 분리된 메커니즘은 수조 응용 프로그램을 활용하여 in vitro에서 연구할 수 있지만 in vivo 재생을 종합적으로 에뮬레이트하기에는 부족합니다. 따라서 SWT에 의해 활성화된 경로에 대한 올바른 조사는 생체 내에서만 달성할 수 있습니다.

뒷다리 허혈 마우스 모델은 잘 정립되어 있으며 구현하기 쉽습니다. 또.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
10% 포비돈
5-0 나일론 봉합사	Ethicon Inc.
7-0 실크 봉합	Ethicon Inc.
Cautery	Martin	ME-102
탈모 크림	Nivea
Gauze	Gazin
가열판
케타민 염산염			마취
레이저 도플러	무어 기구
수술 도구	미세 과학 도구
Xylazine hydrochloride			마취

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