마우스의 스트레스를 줄이는 취급 기술

요약

이 논문은 불안과 같은 행동을 줄임으로써 일상적인 처리를 용이하게하고 두 가지 기존 관련 기술 (터널 및 꼬리 처리)에 대한 세부 사항을 제공하는 마우스의 처리 기술인 3D 처리 기술에 대해 설명합니다.

초록

실험실 동물은 과학자 또는 동물 관리 공급자에 의해 여러 조작을 받습니다. 이 원인은 스트레스는 동물의 복지에 지대한 영향을 미칠 수 있으며 불안 측정과 같은 실험 변수에 대한 혼란 요인이 될 수 있습니다. 수년에 걸쳐, 취급 관련 스트레스를 최소화 하는 취급 기술은 쥐에 특정 초점으로 개발 되었습니다., 쥐에 거의 관심. 그러나, 마우스는 취급 기술을 사용하여 조작에 습관화될 수 있다는 것을 보여주었습니다. 마우스를 취급하는 습관화는 스트레스를 줄이고, 일상적인 취급을 용이하게 하며, 동물 복지를 개선하고, 데이터 변동성을 감소시키며, 실험적 신뢰성을 향상시킵니다. 취급의 유익한 효력에도 불구하고, 특히 스트레스가 많은 꼬리 픽업 접근 방식은 여전히 널리 사용됩니다. 이 논문은 인간 상호 작용 중에 동물이 경험한 스트레스를 최소화하기 위한 새로 개발된 마우스 취급 기술에 대한 자세한 설명 및 데모를 제공합니다. 이 수동 기술은 3 일 이상 수행 (3D 처리 기술) 실험자습관 동물의 능력에 초점을 맞추고있다. 이 연구는 또한 이전에 확립 된 터널 처리 기술 (폴리 카보네이트 터널 사용)과 꼬리 픽업 기술의 효과를 보여줍니다. 구체적으로 연구된 것은 행동 테스트(고화플러스 미로 및 참신한 수유), 실험자와의 자발적상호작용 및 생리학적 측정(코르티코스테론 수준)을 사용하여 불안과 같은 행동에 미치는 영향입니다. 3D 핸들링 기술과 터널 처리 기술은 불안과 같은 표현형을 감소시켰습니다. 첫 번째 실험에서, 6 개월 된 남성 마우스를 사용 하 여, 3D 처리 기술 크게 실험자 상호 작용을 향상. 두 번째 실험에서는 2.5개월 된 암컷을 사용하여 코르티코스테론 수준을 감소시다. 따라서 3D 처리는 실험자와의 상호 작용이 요구되거나 선호되는 시나리오또는 실험 중에 터널 처리가 불가능할 수 있는 시나리오에서 유용한 접근 방식입니다.

서론

마우스와 쥐는 내분비, 생리학, 약리학적 또는 행동 연구를 포함한 여러 목적을 위해 전임상 연구^1,2에 필수적인 자산이다^2. 동물과 관련된 연구의 증가로부터, 인간의 상호 작용을 포함한 통제되지 않는 환경 변수가 생물 의학 연구^3,4,5에서다양한 결과에 영향을 미친다는 것이 발생했습니다. 이것은 실험 과 연구^{실험실4,5,}동물 연구에서 중요한 주의 사항을 포즈에 걸쳐 관찰 된 상당한 가변성에 대한 책임이 있습니다.

환경 스트레스의 영향을 제한하고 인간의 상호 작용에 대한 반응성을 줄이는 것을 목표로 다양한 접근 법이 구현되었습니다. 예를 들어, 환경 스트레스의 영향을 제한하기 위해 주택 조건의 표준화 및 자동화 된 주택 시스템^6,7이

프로토콜

동물 과목과 관련된 절차는 CAMH 동물 관리위원회에 의해 승인되었으며 캐나다 동물 관리 위원회에 따라 수행되었습니다.

참고: 본 명세서에 기재된 처리 방법은 비형질전환(C57/BL6, BalbC, CD1, SV129 등) 및 형질대사를 포함한 다양한 마우스 균주에서 사용될 수 있다. 그것은 또한 젊은 또는 오래 된 마우스와 함께 사용할 수 있습니다., 젊은 성인 지적 (4-6 주 오래 된) 마우스 성인 또는 오래 된 쥐 보다 약간 더 활동적인 경향이, 특히 날에 1.

1. 실험 준비

1. 연구 개시 전에, 도착 지침에 따라^21,무작위로 각 처리 그룹에 마우스를 할당 (3D 처리, 터널 처리 또는 꼬리 처리).
2. 취급을 수행할 룸을 식별합니다. 그것은 하우징 룸에서 수행 할 수 있습니다, 또는 별도의 방에서. 동물이 움직이는 수레에서 이동해야 하는 별도의 방에서 처리가 수행되는 경우, 동물이 처리 프로토콜을 개시하기 전에 20-30 분 동안 새 방으로 습관화 할 수 있습니다.
3. 그룹 보관 동물의 경우 임시 케이지를 사용하여 처리 후 마우스를 수용한 다음 초기 홈 케이지에 있는 마우스를 모두 다시 그룹화합니다....

결과

2개의 별도 연구 결과는 C57BL/6 마우스로 수행되었습니다. 연구 #1 잭슨 연구소 (고양이 #000664)에서 2.5 개월 된 여성 (N = 36 / 연구)을 포함 6 개월 된 남성과 연구 #2 포함. 마우스는 2 개월의 나이에 시설에 도착했다. 연구 #2 여성은 도착 후 2 주 동안 처리 및 테스트하는 동안, 연구 #1 남성은 6 개월의 나이에 만 처리 및 테스트 (글로벌 전염병 종료로 인한 지연). 이 기간 동안, 연구 #2 마우스 한 개가 실험을 처리하기 전에 사망했습니다. #1 연구 결과는 동물 시설 직원에 의해 보살었습니다. 모든 마우스는 음식과 물 광고 리비툼에대한 액세스를 주어진 12 시간 빛 / 어두운 주기 (7:00 ON, 19:00 OFF)에 유지되었다. 그들의 홈 케이지는 재활용 신문과 침구 재료로 채워졌으며 중첩 재료로 가득 찼습니다. 마우스는 개별적으로 보관되었다, 세션 을 처리하는 동안 또는 혈액 수집 또는 행동 테스트와 같은 절차 후 그룹 보관 남성에서 잠재적 인 작용 행동을 제한.......

토론

이 연구 와 방법 개발은 마우스의 취급 기술이 여전히 과학계에 의해 간과되고 있으며, 일부 실험실은 여전히 실험 전에 동물의 스트레스와 반응성을 줄이기 위해 습관또는 취급 기술을 구현하는 것을 꺼려한다는 관찰에 근거합니다. 시간 투입을 대표하는 동안, 동물 취급은 수행 될 실험의 성공에 기여할 수있는 동물에게 유익한 효과를 제공하고 데이터 가변성 또는 동물 과반응으로 인해 실험이 여러 번 수행될 필요가 없도록합니다. 3D 처리 기술의 사용은 마우스에서 탈출 시도를 감소. 그것은 또한 우리의 6 개월 된 남성 마우스에 실험자와 상호 작용을 증가 하 고 감소 불안 같은 표현형. 또한, 3D 취급은 처리의 단지 3 의 초기 일 후에 2.5 달 된 여자 마우스에 있는 데이터 가변성을 감소시키고 코티코스테론 수준을 감소시켰습니다. 이 방법은 부드러운 전송과 쉽게 개입을 용이하게 실험자가 처리하기 위해 마우스를 습관화하는 부드러운 조작에 의존한다.

3D 처리 기법에서 강조할 가치가 있는 것.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
23G x 1인치 BD PrecisionGlide 범용 멸균 피하 주사 바늘. 일반 벽 유형 및 일반 베벨.	BD	2546-CABD305145	혈액 수집용 바늘
BD Vacutainer® 정맥 혈액 수집 EDTA 튜브와 라벤더 BD 헤모가드&트레이드; 클로저, 2.0ml(13x75mm), 100/pk	BD	367841	채혈용 EDTA 코팅 튜브
침대 o 속대 ¼ ” 옥수수 속대 실험실 동물 침구	Bed-O-Cobs	BEDO1/4	참신함 억제 수유를 위한 새로운 침구
원심분리기	Eppendorf	Centrifuge 5424 R	혈액 원심분리용.
Corticosterone ELISA Kit	Arbor Assays	K003-H1W
디지털 카메라	Panasonic	HC-V770	EPM/실험자 상호 작용을 기록하는 카메라
Elevated Plus Maze	Home Made	n/a	사용자 정의 미로 4개의 검은색 플렉시글라스 팔(두 개의 열린 팔(길이 29cm, 너비 7cm, 높이 16cm의 벽))으로 만든 두 개의 열린 팔이 서로 마주보는 십자가 모양을 형성합니다. 바닥에서 55cm 위로 개최
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