경골 내 골육종 세포 주사 동위원소 골육종 및 폐 전이 마우스 모델 생성

Junli Chang; Fulai Zhao; Xingyuan Sun; Xiaoping Ma; Wenlan Zhi; Yanping Yang

doi:10.3791/63072

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방법 논문

경골 내 골육종 세포 주사 동위원소 골육종 및 폐 전이 마우스 모델 생성

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DOI:

10.3791/63072

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2021년 10월 28일

Junli Chang^*¹^,² , Fulai Zhao^*¹^,² , Xingyuan Sun¹^,² , Xiaoping Ma¹^,² , Wenlan Zhi¹^,² , Yanping Yang¹^,²

¹Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, ²Key Laboratory of theory and therapy of muscles and bones, Ministry of Education

^* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

본 프로토콜은 동위원소 골육종 및 폐 전이 병변을 지닌 마우스 모델을 생성하기 위해 경막내 골육종 세포 주사를 기술한다.

초록

골육종은 어린이와 청소년에서 가장 흔한 원발성 골암으로, 폐가 가장 흔한 전이성 부위입니다. 폐 전이 골육종 환자의 5 년 생존율은 30 % 미만입니다. 따라서, 인간에서 골육종 발달을 모방한 마우스 모델의 활용은 골육종 발암 및 폐전이의 근본적인 기전을 이해하여 새로운 치료제를 개발하는 데 큰 의미가 있다. 여기서, 상세한 절차는 골육종 세포의 경골 내 주사를 통해 원발성 골육종 및 폐 전이 마우스 모델을 생성하는 것으로 보고된다. 생체 발광 또는 X 선 라이브 이미징 시스템과 결합된이 살아있는 마우스 모델은 골육종 성장 및 전이를 모니터링하고 정량화하는 데 사용됩니다. 이 모델을 확립하기 위해, 골육종 세포를 함유하는 기저막 매트릭스를 마이크로-부피 주사기에 로딩하고, 마취 후 각 흉선 마우스의 하나의 경골에 주입하였다. 원발성 골육종이 IACUC 승인 프로토콜에서 크기 제한에 도달했을 때 마우스를 희생시켰다. 골육종을 앓고있는 다리와 전이 병변이있는 폐가 분리되었습니다. 이들 모델은 짧은 잠복기, 빠른 성장, 중증 병변 및 원발성 및 폐 전이성 병변의 발달을 모니터링하는 데 있어서 민감성을 특징으로 한다. 따라서, 이들은 골육종 암화 및 폐 전이, 종양 미세환경에서 특정 인자의 기능 및 기작을 탐구하고, 생체 내에서 치료 효능을 평가하기 위한 이상적인 모델이다.

서론

골육종은 어린이와 청소년에서 가장 흔한 원발성 골암으로 ^1,2 주로 주변 조직에 침투하고 환자가 진단 될 때 폐로 전이됩니다. 폐 전이는 골육종 치료의 주요 과제이며, 폐 전이 환자의 5 년 생존율은 20 % -30 % ^3,4,5만큼 낮습니다. 그러나, 원발성 골육종의 5년 생존율은 화학요법⁶의 도입으로 인해 1970년대 이후 약 70%로 증가하였다. 따라서 새로운 치료법을 개발하기 위해서는 골육종 발암과 폐전이의 근본적인 메커니즘을 이해하는 것이 시급히 필요하다. 인간의 골육종 진행을 가장 잘 모방하는 마우스 모델의 적용은 매우 중요합니다⁷.

골육종 동물 모델은 자발적이고 유도 된 유전 공학, 이식 및 기타 기술에 의해 생성됩니다. 자발적인 골육종 모델은 긴 종양 형성 시간, 일관성 없는 종양 발생률, 낮은 이환률 및 불량한 안정성 ^8,....