중증 급성 췌장염의 마우스 모델은 본원에 기재된다. 여기에 제시된 절차는 매우 빠르고 간단하며 접근 가능하므로 잠재적으로 분자 메커니즘및 급성 췌장염의 다른 치료 내정간섭에 대한 연구가 편리한 방법으로 허용됩니다.
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방법 논문
중증 급성 췌장염의 마우스 모델은 본원에 기재된다. 여기에 제시된 절차는 매우 빠르고 간단하며 접근 가능하므로 잠재적으로 분자 메커니즘및 급성 췌장염의 다른 치료 내정간섭에 대한 연구가 편리한 방법으로 허용됩니다.
급성 췌장염의 보급 (AP), 특히 심한 급성 췌장염 (SAP), 매년 젊은 연령 그룹에서 증가. 그러나, 현재 임상 실습에 효과적인 치료의 부족이 있다. 형질 전환 및 녹아웃 균주의 쉬운 접근성과 생체 내 평가에 필요한 약물의 최소 용량을 허용하는 작은 크기로, 마우스에서 잘 확립 된 실험 모델은 AP 연구에 선호됩니다. 더욱이, 타우로콜레이트 나트륨(TC)을 통해 유도된 SAP는 현재 가장 널리 사용되고 가장 잘 특징적인 모델 중 하나입니다. 이 모형은 AP의 프로세스 도중 새로운 치료 및 가능한 분자 사건을 위해 조사되었습니다. 여기서는 타우로콜레이트 나트륨과 간단한 수제 현미경을 이용한 AP 마우스 모델의 생성을 소개합니다. 또한, 우리는 또한 후속 조직학 및 세로가지 시험을 위한 방법론을 제공합니다.
급성 췌장염 (AP)은 비정상적으로 활성화 된 효소에 의해 후속 덕트 팽창 및 췌장 자가 소화를 가진 주요 췌장 덕트의 방해를 특징으로하는 췌장의 급성 염증입니다. 그것의 임상 표현은 현지 또는 전신 염증, 복통 및 혈청 아밀라세1,2의 고도를 포함합니다. 심각도 분류3에 따르면 AP는 경미하고, 온건하고, 심한 형태로 존재할 수 있으며, 그 중 심각한 급성 췌장염(SAP)은 30%4 이상의 높은 사망률로 인해 가장 심각한 급성 췌장염(SAP)이 가장 우려되는 상태입니다. 미국에서 AP는 200,000명 이상의 환자에 영향을 미치는 입원의 가장 흔한 이유 중 하나입니다5. 더욱이 AP, 특히 SAP는 매년 증가하고 젊은 연령집단에 영향을 미치고 있다6. 그러나, 현재 임상 실습에 효과적인 치료 옵션의 부족이있다6,7. 따라서 AP에 관련된 분자 메커니즘을 탐구하여 치료 개선을 촉진할 필요가 있습니다.
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동물과 관련된 모든 실험은 소오하우 대학의 동물 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 모든 수술 절차는 완전한 마취하에 수행되었습니다. 진통제는 이전 문학에 따라 질병의 자연적인 과정에 간섭을 피하기 위하여 이용되지 않았습니다28,29. 진통제의 부족에 대한 승인은 또한 소오하우 대학의 동물 윤리위원회에 의해 부여되었다.
1. 준비
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위의 지시에 따라 약 40분의 평균 수술 기간을 얻었습니다. 마우스는 약간 비활성 상태였으며 각각 24시간, 48h 및 72h에서 약 0.5-1.75g, 0.85-1.85g 및 0.5-4.73g의 무게를 잃었습니다(그림 2).
수술 이완 시점부터 수술 후 24시간까지, 질병이 발달함에 따라 마우스는 비활성 상태가 되어 반응이 느리고 행동하였다.
대조군과 SAP 마우스의 생존율은 각각 100%(8/8) 및 72.7%(8/11)였으며, 72h 수술 후(그림 3)이었다.
H&E 염색(그림 4) 및 병리학 점수(그림 5)에 따르면 췌장 섹션에서 발생하며, 명백한 부종 (.......
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TC 유도 SAP 모델은 우수한 연구 도구입니다. 이 연구에서 와 같이,이 모델은 특정 장치를 사용하지 않고 일반 실험실에서 매우 쉽게 실현됩니다. 조직학 및 생화학적 분석과 함께 사용될 경우 AP를 유도하고 평가하기 위한 비용-(저렴한 시약) 및 시간 절약(24h 시간 창) 접근법을 제공합니다. TC의 농도조정은 또한 SAP를 유도하기 위해 TC를 고용하여 마우스20에 SAP를 유도할 수 있는 가능성을 제공하며, 주요 차이점은 TC주입에 사용되었다. 더 정확한 주입 복용량을 제공할 수 있습니다.
우리의 경험에 따르면, 모델 설립의 수술 과정에서 가장 중요한 요인은 이중 성 덕트의 전체 노출, 마이크로 인젝터의 부드러운 천자, 비교적 일정한 속도로 biliopancreatic 덕트 및 췌장 덕트에 TC의 주입을 포함했다. 수술 중 다음 사항에주의를 기울여야 합니다. 첫째, 십이지장 괴사귀가 발생할 수있는 과도한 힘의 적용을 피하기 위해.......
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NCRCH [2020WSA01]의 번역 연구 보조금, 소주건강위원회(KJXW20200002)의 KJXW 과학교부금, 소주시 과학기술계획(SKY2021038 및 SKJY2021050), 장쑤고등교육기관(PAPD)의 우선학술프로그램 개발 보조금, 1차 연구사회개발계획(PAPD)을 지원한다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 0.5% 요오드포 | Shanghai Likang 소독제 | 310102 | 4mL/마우스 |
| 0.9% 염화나트륨 | Sinopharm Group Co., Ltd. | 10019318 | 0.8 mL / 마우스 |
| 1 % 펜토 바르비탈 나트륨 | 시그마 | P3761 | 0.2 -0.25 mL / 마우스 |
| 25 μ L 플랫 팁 마이크로 리터 주사기 | Gaoge, 상하이 | A124019 | |
| 4 % 파라 포름 알데히드 | Beyotime, Nantong, China | P0099-500ml | |
| 5 % 타우로 콜산 나트륨 (TC) | 알라딘 | S100834-5g | 10 μ L/SAP 마우스 |
| 6-0 나사산 바늘이 있는 멸균 나일론 미세 봉합사(1/2 원) | Cheng-He | 20093 | |
| 75% 알코올 | Sinopharm Group Co., Ltd. | 10009218 | 4 mL / 마우스 |
| 8-0 실 바늘이있는 멸균 나일론 미세 봉합사 (3/8 원) | Cheng-He | 19064 | |
| ALT Activity Assay Kit | EPNK, Anhui, China | ALT0012 | |
| Amylase Assay Kit | EPNK, Anhui, China | AMY0012 | |
| 12mm 턱 (3cm)이있는 각진 작은 불독 클램프 | Cheng-He | HC-X022 | |
| 아스펜 부스기 또는 마우스 침구용 파쇄 | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology | VR03015 | |
| AST Activity Assay Kit | EPNK, Anhui, China | AST0012 | |
| Blood Urea Nitrogen (BUN) Assay Kit | EPNK, Anhui, China | BUN0011 | |
| C57BL/6 마우스 | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology | 213 | |
| 크레아틴 분석 키트 | EPNK, 안후이, 중국 | ||
| 특징 마이크로톰 블레이드 | Beyotime, Nantong, China | E0994 | |
| 지혈 겸자(9.5cm, 곡선형) | JZ, Shanghai Medical Instruments Co. Ltd. | JC3901 | |
| 리파제 분석 키트 | Jiancheng, Nanjing, China | A054-2-1 | |
| Microtome | Leica biosystem, 독일 | RM2245 | |
| Mindray 생화학 분석기 | Mindray, Shenzhen, China | BS-420 | |
| MPO 분석 키트 | Jiancheng, Nanjing, China | A044-1-1 | |
| Normal mouse chow | Trophic, Nantong, China | LAD 1000 | |
| 인산염 완충 식염수 | Beyotime, 난퉁, 중국 | C0221A | |
| 5mm 턱(1.5cm)이 있는 스트레이트 마이크로 불독 클램프 | JZ, Shanghai Medical Instruments Co. Ltd. | W40130 | |
| 직선 또는 곡선 겸자(11.0cm) | Cheng-He | HC-X091A 또는 HC-X090A | |
| 스트레이트 가위(10.0cm) | Cheng-He, 닝보, 중국 | HC-J039102 | |
| Thermo Scientific 원심분리기 | Thermo Scientific, 미국 | Multifuge X1R |
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