오보에서 닭 배아에 혈관 내 주사

Kai Jin; Jing Zhou; Gaoyuan Wu; Ziyi Lian; Zongyi Zhao; Shujian Zhou; Chen Chen; Hongyan Sun; Yingjie Niu; Qishenng Zuo; Yani Zhang; Jiuzhou Song; Guohong Chen; Bichun Li

doi:10.3791/63458

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방법 논문

오보에서 닭 배아에 혈관 내 주사

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DOI:

10.3791/63458

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2022년 6월 3일

Kai Jin¹^,² , Jing Zhou¹^,² , Gaoyuan Wu¹^,² , Ziyi Lian¹^,² , Zongyi Zhao¹^,² , Shujian Zhou¹^,² , Chen Chen¹^,² , Hongyan Sun¹^,² , Yingjie Niu¹^,² , Qishenng Zuo¹^,² , Yani Zhang¹^,² , Jiuzhou Song³ , Guohong Chen¹^,² , Bichun Li¹^,²^,⁴

¹Joint International Research Laboratory of Agriculture and Agri-Product Safety of Ministry of Education of China, Yangzhou University, ²Key Laboratory of Animal Breeding Reproduction and Molecular Design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, ³Animal & Avian Sciences, University of Maryland, College Park, ⁴College of Biotechnology, Jiangsu University of Science and Technology

이 논문에서

요약

이 논문의 전반적인 목표는 닭 배아에 외인성 물질의 난소 세포 내 주사를 수행하는 방법을 설명하는 것입니다. 이 접근법은 닭 배아의 발달 생물학을 연구하는 데 매우 유용합니다.

초록

배아 생물학의 고전적인 모델 시스템으로서, 닭 배아는 배아 발달과 분화를 조사하는 데 사용되었습니다. 외인성 물질을 닭 배아에 전달하는 것은 배아 발달 동안 유전자 기능, 형질전환 육종 및 키메라 준비를 연구하는 데 큰 이점이 있습니다. 여기서 우리는 플라스미드 벡터 또는 변형 된 원발성 생식 세포 (PGCs)와 같은 외인성 물질이 초기 발달 단계에서 공여체 닭 배아로 옮겨 질 수있는 난 소 혈관 내 주사의 방법을 보여줍니다. 결과는 등쪽 대동맥과 머리를 통한 혈관 내 주사가 주입 된 물질이 혈액 순환계를 통해 전체 배아로 확산 될 수 있음을 보여줍니다. 제시된 프로토콜에서, 외인성 플라스미드 및 렌티바이러스 벡터의 효능은 수용자 생식선에 주입된 외인성 PGCs의 도입, 및 콜로니화, 배아에서의 형광을 관찰함으로써 결정되었다. 이 기사는이 방법의 상세한 절차를 설명함으로써 유전자 기능, 배아 및 발달 생물학 및 생식선 키메라 닭 생산을 연구하는 데 탁월한 접근 방식을 제공합니다. 결론적으로,이 기사는 연구자가 큰 성공과 재현성으로 닭 배아에 외인성 물질의 난소 혈관 내 주사를 수행 할 수있게 해줄 것입니다.

서론

닭 배아는 발달, 면역학적, 병리학적 및 기타^{생물학적 응용}^1,2,3에서 수세기 동안 널리 사용되어 왔다. 그들은 독성학 및 세포 생물학 연구에서 다른 동물 모델에 비해 많은 고유 한 이점을 가지고^{있습니다 4}. 닭 배아는 쉽게 접근 할 수 있으며 시험관 내에서 조작 할 수 있으며 모든 발달 단계에서 직접 관찰 할 수있어 편리한 배아 연구 모델 시스템을 제공합니다.

일반적으로 전기 형질감염 및 아발아강 주입과 같은 현재의 닭 배아 전달 방법은 전문 장비 및 설계 프로그램의 요구 사항, 노른 자 및 알부민 5,6,7의 존재로 인한 비효율과 같은 한계를 가지고 있습니다. 여기서 우리는 외인성 물질을 닭 배아에 전달하기위한 간단하고 효율적인 처리 방법을 보여줍니다. 이것은 발달 생물학 연구에 사용되는 강력한 도구가 될 수 있습니다. 주입 된 물질은 혈액 순환을 ....