본 연구는 쥐에서 심방 세동 (AF)의 효율적인 유도를위한 경식도 심방 파열 페이싱의 실험 프로토콜을 설명합니다. 이 프로토콜은 건강한 또는 리모델링 된 심장을 가진 쥐에서 사용될 수 있으므로 AF 병리 생리학 연구, 새로운 치료 목표 식별 및 새로운 치료 전략 평가가 가능합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
동물 연구는 심방 세동 (AF) 병리 생리학 및 치료 관리에 관한 우리의 이해에 중요한 통찰력을 가져 왔습니다. AF 병인에 관여하는 주요 메커니즘 중 하나 인 재진입은 발생하기 위해 특정 질량의 심근 조직을 필요로합니다. 심방의 크기가 작기 때문에 설치류는 오랫동안 AF에 '내성'이있는 것으로 간주되어 왔습니다. 자발적 AF가 쥐에서 발생하는 것으로 밝혀졌지만, 이러한 모델에서 부정맥이 발생하려면 장기간의 추적 관찰 (최대 50 주)이 필요합니다. 본 연구는 쥐에서 AF의 신속하고 효율적인 유도를 위한 경식도 심방 파열 페이싱의 실험 프로토콜을 기술한다. 이 프로토콜은 매우 다양한 위험 요인이있는 건강한 또는 리모델링 된 심장을 가진 쥐에서 성공적으로 사용될 수 있으므로 AF 병리 생리학 연구, 새로운 치료 표적 식별 및 새로운 예방 및 / 또는 치료 전략의 평가를 가능하게합니다.
서론
심방 세동 (AF)은 임상 실습에서 발생하는 가장 흔한 지속적인 심장 부정맥이며 그 발생률과 유병률은 전 세계적으로 극적으로 계속 증가하고 있습니다1. 이 부정맥은 최근 연구2에 따르면 세계 인구의 4 %까지 영향을 미칩니다. 그러나 발작성 AF가 무증상 일 수 있으므로 탐지를 피할 수 있다는 점을 감안할 때 AF의 진정한 유병률은 문헌에 제시된 것보다 훨씬 높을 것입니다.
AF의 병태생리학은 치열하게 연구되어 왔다. 그럼에도 불구하고,이 복잡한 부정맥의 근본적인 메커니즘은 불완전하게 해명되어 있으며, 이것은 제한된 치료 옵션에 반영되며 의심스러운 효능이 있습니다. 동물 연구는 AF 병리 생리학 및 치료 관리에 관한 우리의 이해에 중요한 통찰력을 가져 왔습니다. AF 병인3에 관여하는 주요 기작 중 하나인 재진입은 발생하기 위해 특정 질량의 심근 조직을 필요로 한다. 따라서 AF 연구에서 큰 동물이 일반적으로 선호되는 반면, 심방의 크기가 작기 때문에 설치류는 오랫동안 AF에 '내성'이있는 것으로 간주되어 왔습니다. 그러나 큰 동물의 사용은 주로 어려움을 다루어서 방해받습니다. 한편, 자발적 AF가 래트
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
동물 과목과 관련된 절차는 루마니아 국립 위생 수의학 및 식품 안전 당국에 의해 Târgu Mureř의 의학, 약학, 과학 기술 대학 "George Emil Palade"의 윤리위원회에 의해 승인되었으며 국제 실험실 동물 과학 협의회 지침 (지침 2010 / 63 / EU)을 준수했습니다.
1. 경식도 심방 버스트 페이싱 프로토콜
- 성인 남성 Wistar 쥐 (체중 200-400g)를 STIM과 SHAM의 두 그룹으로 무작위 추출하십시오.
- 동물을 마취하십시오.
- 유도를 위해 2.5% 이소플루란, 4L/분, 99.5%O2를 사용하십시오.
- 유지를 위해 복강내 투여된 케타민/메데토미딘(75.0/0.5mg/kg)의 혼합물을 사용하십시오.
- 각막 반사 (5 % 포도당 용액)와 nociceptive withdrawal reflex (발가락 꼬집음)를 테스트하여 마취의 깊이를 확인하십시오. 직장 온도계를 사용하여 호흡률 (마취 중 50 %의 낙하가 허용되며 정상 속도는 70-120 호흡 / 분 사이)과 체온 (정상 온도는 96.5 - 99.5 ° F 또는 35.9 - 37.5 ° C 사이)을 모니터링하십시오.
참고 :....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
개념 증명 연구에서, 22마리의 성인 수컷 Wistar 래트(200-400 g)를 무작위로 STIM(n=15)과 SHAM(n=7)의 두 그룹으로 배정하였다. 모든 동물은 기후 조절 실 (21-22 °C)에서 폴리 카보네이트 케이지에 개별적으로 수용되었으며, 연구 전반에 걸쳐 물과 건조 식품에 자유롭게 접근 할 수있었습니다. 상기 기술된 경식도 자극 프로토콜은 주당 10일, 5일 동안 모든 동물에 적용되었다. SHAM 그룹의 래트가 활성 전기 자극을 받지 않았다는 점을 제외하고는 모든 동물이 동일한 프로토콜을 겪었다.
예상대로, AF의 에피소드는 프로토콜 전반에 걸쳐 SHAM 동물에서 유도되지 않았다. 따라서, 다른 파라미터들(즉, AF 에피소드의 지속 시간 및 '지속적인' AF 에피소드의 존재)은 이 그룹에서 평가될 수 없다.
자극 첫날, 15마리의 STIM 동물 중 12마리(80%)가 AF 에피소드를 제시했다(상대적 위험 = 3.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
본 논문은 급성 및 장기 AF 연구 모두에 적합한 래트에서 AF의 신속하고 효율적인 유도를 위한 장기 경식도 심방 파열 페이싱의 실험 프로토콜을 기술한다. 본원에 기재된 10-일 자극 프로토콜은 '이차 자발적 AF 모델'(즉, 전기 자극에 의한 AF 유도의 기간에 따라, AF가 자발적으로 발전하는 모델)10을 개발하는데 성공적으로 사용되었다. 그러나 프로토콜의 지속 기간은 연구의 정확한 목적에 따라 달라질 수 있습니다.
자극 카테터의 크기와 같은 다른 파라미터들이 또한 동물의 크기에 따라 조정될 수 있다. 그러나 지나치게 큰 카테터는 기관에 압력을 가하고 정상적인 호흡을 방해 할 수 있으므로 피하도록주의해야합니다. 200-400 g 쥐의 경우, 5-6 F 카테터는 기관지에 무시할 수있는 압력을 유발하고 기관 내 삽관없이 프로토콜을 구현할 수 있습니다.
프로토콜의 핵심 단계는 심방의 수준에.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
이 작업은 루마니아 교육 연구부, CNCS - UEFISCDI, PNCDI III 내의 프로젝트 번호 PN-III-P1-1.1-TE-2019-0370의 보조금으로 지원되었습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 안티 세단 (Atipamezole Hydrochloride) 5mg / mL, 주사용 | 용액 Orion Corporation | 06043/4004 | 쥐 용 1 mg / kg |
| 기숙사 (Medetomidine Hydrochloride) 1 mg / mL, 주사용 | 용액 Orion Corporation | 06043/4003 | 쥐 용 0.5 mg / kg |
| E-Z 마취 단일 동물 시스템 | E-Z Systems Inc | EZ-SA800 | 한 번에 |
| Isoflurane 99.9 %, 100 mL | Rompharm Company | N01AB06 | |
| Ketamine 10 %, 25 mL | 쥐 용 75 mg / kg | ||
| 소형 동물 용 마이크로 컨트롤러 기반 심장 박동기 | 사용 본 연구실에서 개발 (원고의 참조 번호 10 참조) | ||
| 표면 ECG 기록 시스템 | 본 실험실에서 개발 (원고의 참조 번호 10 참조) |
참고문헌
- Kornej, J., Börschel, C. S., Benjamin, E. J., Schnabel, R. B. Epidemiology of atrial fibrillation in the 21st century: Novel methods and new insights. Circulation Research. 127 (1), 4-20 (2020).
- Hindricks, G., et al.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
