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방법 논문

Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser 증후군 치료를위한 질 성형술 중 복강경 난 모세포 검색 및 냉동 보존

4.8K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/63634

⸱

2022년 5월 10일

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

전담 팀은 Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser 환자에게 복강경 질 성형술시 제어 된 난소 자극 및 난 모세포 동결 보존을 수행 할 수있는 옵션을 제공 할 수 있습니다.

초록

복강경 질 성형술이 예정되어 있고 생물학적 모성에 대한 욕구가있는 Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser 증후군 (MRKHS) 환자에서 냉동 보존을위한 복강경 난 모세포 회수를 병행할 것을 제안합니다. 난 모세포 검색은 복강경 검사 초기에 추구됩니다. 오른쪽 및 왼쪽 5mm 트로 카가 위치하며,이를 통해 17G 난자 흡인 바늘이 각각 오른쪽 및 왼쪽 난소의 천자에 사용됩니다. 모낭의 노출을 용이하게하기 위해, 난소는 동원되어 복강경 겸자로 유지됩니다.

서로 가까이있는 여러 개의 난포를 흡인 할 때 바늘 끝이 난소에 유지되어 난소 피질이 고정되는 횟수를 줄이고 출혈의 고유 한 위험으로 인해 발생합니다. 후속 단계는 질 성형술을위한 Davydov 복강경 수정 기술과 비교하여 변경되지 않습니다. 수술 전에 성선 자극 호르몬 방출 호르몬 (Gn-RH) 길항제 프로토콜로 조절 된 난소 자극을 수행하고, 난 모세포 회수 및 질 성형술의 수반되는 절차는 최종 난포 성숙 유발 인자 후 36 시간 후에 예정되어 있습니다. 난포액은 질식 난모세포 회수 중에 사용되는 것과 동일한 10mL 멸균 튜브에 수집되고 온난화 블록(37°C)에서 보조 생식 실험실로 옮겨져 성숙(중기 II) 난모세포가 유리화됩니다.

이 경우 MRKH, 난 모세포를 가진 일련의 23 명의 여성이 모든 환자에서 성공적으로 회수되고 동결 보존되었습니다. 이후 질성형술은 수정 없이 시행되었으며 입원 환자 및 외래 수술 후 치료(요도 카테터 제거 당일, 퇴원 당일, 확장기 사용 및 후속 조치 시 편안함)는 영향을 받지 않았습니다. 한 환자에서 수술 후 합병증 1건이 발생했고(수술 후 5일째에 발열이 발생하고 복부 초음파에서 복강 내 유체 검출) 보존적 치료 후 해결되었습니다. MRKH 환자에서 외과적 질 성형술을 수행하고 난모세포 회수를 지연시키는 대신 이 접근법은 단일 복강경 검사에서 두 절차를 결합하여 외과적 침습성과 마취 위험을 최소화합니다.

서론

4-10,000 명의 여성 중 약 1 명의 발병률로 MRKHS는 원발성 무월경 사례의 15 %의 원인입니다. MRKHS는 질과 자궁의 상부 부분이 선천적으로 부재 한 반면, 요로 및 골격 이상은 다양하게 연관되어 있습니다. 보다 구체적으로, 깊이 1-2cm의 질 금고가 일반적으로 존재하며, 두 개의 기초적인 자궁 뿔이 발견 될 수 있습니다1.

과거에 MRKHS의 주요 의학적 관심은 정상적인 성교를 가능하게하는 것이었으며, 일반적으로 비 외과 적 또는 외과 적 접근법2에 의한 신생 질의 구성이 필요합니다. 그러나 생식 의학의 발전은 현재 대리모 3,4 또는 최근에는 자궁 이식5에 의해 MRKHS 환자에서 유전 적 모성을 허용합니다. 자궁 이식은 여전히 실험적인 절차이지만, 대리모는 전 세계 많은 국가에서 이용 가능하며6, 보고된 산과 및 심리사회적 결과는 표준 체외 수정 및 난모세포 기증7과유사합니다.

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프로토콜

MRKHS (IRCCS San Raffaele University Hospital, Milan, Italy)의 3 차 위탁 센터의 지역 윤리위원회는 2017 년 7 월에 시행되기 전에 프로토콜을 통보하고 승인했습니다. 모든 환자 또는 보호자는 질 성형술 중 복강경 난모세포 검색 및 냉동 보존과 과학적 목적을 위한 익명화된 임상/실험실 데이터 사용에 대해 사전 동의서에 서명했습니다.

1. 팀 구성

  1. 경험이 풍부한 복강경 외과 의사, 숙련 된 질 외과 의사, 불임 전문가, 헌신적 인 심리학자 및 헌신적 인 간호사로 구성된 전담 팀을 지정하십시오.
  2. 절차의 전체 설정 및 수행 중에 환자를 팀으로 지원하십시오.

2. 진단 정밀 검사 및 상담

  1. 난소의 시각화 및 Antral Follicle Count (AFC)의 추정을 위해 환자에게 경복부 골반 및 복부 초음파 검사를 수행합니다. 항뮐러 호르몬(AMH)의 혈중 농도를 평가하여 조절된 난소 자극을 위한 성선 자극 호르몬 시작 용량을 최적화합니다. 조직/배우자의 동결보존을 위한 국가/지역 프로토콜에 따라 감염성 질환(HIV-AB, HV-....

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결과

표 2는 환자의 난소 자극 데이터를 포함하는 반면, 주요 수술 및 기능적 결과는 표 3에 설명되어 있습니다. 난 모세포 회수 및 질 성형술의 수반되는 복강경 절차는 모든 환자에서 성공적으로 결합되었습니다. 평균 11.4 ± 5.4 (평균 ± SD) 난 모세포가 회수되었고, 9.6 ± 4.3 MII 난 모세포가 동결 보존되었다 (표 3). ART를받는 환자에서 난 모세포 동결 보존에 대한 우리의 경험에서, 세포질 내 정자 주입시 형태 학적으로 손상되지 않은 난 모세포의 비율로 정의 된이 유리화 프로토콜에 따른 온난화 후 난 모세포 생존율은 84.5 ± 19.3이었다. 총 평균 수술 시간은 114 ± 17 분이었고, 모든 환자에서 수술 중 출혈은 미미했으며 (<50mL), 수술 중 부작용은 관찰되지 않았다. 요도 카테터와 질 거즈는 모든 환자에서 수술 후 2일째에 제거되었습니다. 수술 후 3일째에 환자들은 매일 확장기를 사용하기 시작했고.......

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토론

이 프로토콜은 질 성형술과 난 모세포 회수 절차를 결합하여 MRKHS 치료의 침습성을 감소시킵니다. 이를 위해서는 COS 타이밍, 수술 절차 및 난모세포 유리화 일정을 효율적으로 잡을 수 있도록 전담팀을 지정하는 것이 중요합니다.

이 결합 된 복강경 방법이 가장 유익 할 것으로 예상되는 MRKHS 환자는 골반 벽(14)을 따라 측면으로 위치한 골반 외 난소 또는 간 및 담낭9과 같은 기관의 근접성 또는 골반 신장의 존재로 인해 질식 검색이 기술적으로 어렵거나 실현 불가능한 것으로 간주되는 환자입니다. 이 환자들에서 경복부 접근법이 가설을 세울 수 있고 문헌에 보고되었다: 그럼에도 불구하고, 1.7개의 난모세포가 수집된15개± 평균 수는 4.92개였으며, 이는 기술적 한계로 인해 차선책의 회수를 시사한다. 또한, 복벽 두께가 현저하거나

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공개 사항

저자는 공개 할 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

이 작업에 대한 구체적인 자금은 접수되지 않았습니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
난자 회수 절차
Equipment
CO2 O2 인큐베이터Sanyo
인큐베이터Thermo Scientific
층류 후드쿠퍼 수술
휴대용 인큐베이터Cooper Surgical
StereomicroscopeNikon
Consumables
14 mL 폴리스티렌 둥근 바닥 튜브Falcon352057
4-well dishNunc144444
60 mm 페트리 디쉬NuncFA9150270
90 mm Petri 접시NuncFA9150360
인간 혈청 알부민 100 mg/ml 일반 식염수(5%)Origio3001
배아 배양 미네랄 오일Origio4008
One Well DishOosafeOOPW-CW05
Quinn' s 어드밴티지 비료 매체 SAGEOrigio1020
Quinn' HEPESOrigio1024
멸균 유리 파스퇴르 피펫
< 강> 난소 세포 탈< / 강>
< u> 장비 < / u>
CO2 < / sub> O2< / sub> 인큐베이터Sanyo
Flexipet 조절 식 핸들 세트 쿡G18674
인큐베이터Thermo Scientific
층류 후드쿠퍼 외과
실체 현미경니콘
소모품
4웰 디쉬Nunc144444
CSCM(Continuos 단일 배양) 배지Fujifilm irvine Scientific90165
인간 알부민 100mg/mL, 생리식염수(5%)Origio3001
히알루로니다아제, Fujifilm Irvine Scientific90101
IVF 배양 60mm 페트리 접시NuncFA9150270
배아 배양을 위한 미네랄 오일Origio4008
One WellDish OosafeOOPW-CW05
퀸 s Advantage 매체 with HEPESOrigio1024
Serum Substitute SupplementFujifilm irvine Scientific99193
멸균 유리 파스퇴르 피
스트리핑 피펫 팁 (140 μ m)CookK-FPIP-1140-10BS-5
스트리핑 피펫 팁(170 μ m)쿡K-FPIP-1170-10BS-5
난자 유리화
35 mm 페트리 접시NUNC150255
60 mm 페트리 접시NUNC150270
90 mm 페트리 접시NUNC150360
냉각 랙Kitazato
용 용기Cryodevice/cryotopKitazato81111
전자 타이머
FlexipetCOOKK- 1000
Gilson PipetmanGilsonF123601
Lab 프린터 LabXpertBradyXSL-86-461
팁 20-200 &마이크로; LThermo Scientific2160G
팁 2-20 &마이크로; LThermo Scientific2139-HR
VisotubesCryo Bio System20
유리화 동결 키트Fujifilm Irvine Scientific90133-SO
유리화 해동 키트Fujifilm Irvine Scientific90137-SO
, , , , 펫

참고문헌

  1. Committee on Adolescent Health Care. ACOG Committee Opinion No. 728: Müllerian Agenesis: Diagnosis, Management, And Treatment. Obstetrics and Gynecology. 131 (1), 35-42 (2018).
  2. Reichman, D. E., Laufer, M. R. Ma....

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