복잡한 해부학으로 인해 심장 샘플에 대한 일관되게 재현 가능한 해부 및 수확 프로토콜을 구현하기가 어려울 수 있습니다. 이 원고는 일부 표준 심장 해부 프로토콜의 핵심 요소를 제시하여 전체 검사 접근 방식과 조직 병리학 검사에 일반적으로 사용되는 샘플링 부위를 강조합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
표준 총 검사 및 샘플링은 대형 동물에서 수행 된 심혈관 질환에 대한 실험적 연구의 재현성과 성공의 핵심 요소입니다. 심장의 복잡한 해부학, 종간 차이, 보상 및 병리학 적 반응의 유형을 고려할 때 일관된 프로토콜을 구현하기가 어렵습니다. 다중 해부 프로토콜의 활용은 일반적으로 프로 섹터의 경험에 맞게 조정되며 개인 선호도는 계속해서 실험 및 관찰자 간 변동성의 원천이됩니다. 여기에서 목표는 심혈관 질환의 모델로 일반적으로 사용되는 일부 종(개, 돼지, 반추동물 및 고양이 포함)에서 심장의 주요 해부학적 특징과 랜드마크, 해부 프로토콜 및 조직학적 샘플링 표준을 제시하는 것입니다.
여기에는 두 가지 표준 총 시험 프로토콜이 제시됩니다. 첫째, 심장과 큰 혈관을 통한 생리적 혈류 방향을 따르는 유입-유출 방법(개, 반추동물, 돼지에서 자주 사용됨), 둘째, 4챔버 해부 기술(고양이에서 예시됨)입니다. 두 기술 모두 특정 실험 상황에서 모든 종에 적용 할 수 있습니다. 샘플링 프로토콜에는 모든 관심 영역 (동방 결절, 심실, 심실 중격, 심방, 밸브 및 대동맥)이 포함되며 적절하게 수행되면 실험 연구의 재현성과 신뢰성을 모두 향상시킵니다.
서론
심장벽 두께 평가를 방해할 수 있는 복잡한 해부학과 초기 엄격함으로 인해 심장의 전체 검사는 까다롭고 여러 기술 관련 또는 해석 오류가 발생하기 쉽습니다. 이것은 종간 형태 학적 변이와 많은 임상 적 주요 심장 병리 (관상 동맥 심장 질환, 섬유증, 동맥염 및 아밀로이드증의 초기 사례 포함)가 본질적으로 조직 병리학 적 병리학 인 심한 변화와 관련이 없다는 사실에 의해 증폭됩니다. 표준화된 해부 및 조직학적 샘플 수집 프로토콜은 관찰자 간의 일관성을 가져오는 동시에 심혈관 질환에 대한 실험적 연구의 비교 가능성 및 재현성을 가져올 수 있습니다.
샘플은 두 마리의 개 (Canis lupus familiaris) (3 세, 수컷 프렌치 불독 및 8 세, 암컷 혼합 품종), 고양이 (Felis catus) (6 세, 수컷 유럽 쇼트 헤어), 국내 돼지 (Sus scrofa domesticus) (1 세, 수컷 큰 흰색) 및 소 (Bos taurus) (2 개월 된 암컷 홀스타인). 선택된 각 종은 다른 질병에 대한 심혈관 모델로 특히 사용됩니다. 예를 들어, 개는 부정맥 모델링에 선호되는 모델입니다. 고양이는 HCM의 유병률이 가장 높은 종이기 때문에 비대성 심근 병증 (HCM)에 선....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
실험 프로토콜은 생명 윤리 협약 (2022 년부터 311 호)을 받았으며 국가 (2014 년 법률 제 43 호) 및 유럽 (2010 년 EU 지침 제 63 호) 법률을 준수하여 농업 과학 및 수의학 대학 클루 지나포카 (Cluj-Napoca) 대학의 생명 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 이 프로토콜에 사용되는 모든 재료 및 도구에 대한 자세한 내용은 재료 표를 참조하십시오.
1. 부검 프로토콜
참고: 2,12를 수행할 때 더 쉽게 접근할 수 있으므로 제시된 모든 종에 대해 동일한 부검 프로토콜을 사용하는 것이 좋습니다. 다음 단계는 중형견에서 수행된 부검을 나타냅니다. 다른 주제에 대해 부검을 수행 할 때 단계를 조정하십시오.
- 피사체의 무게를 측정하고 왼쪽의 괴사 테이블에 놓습니다(그림 1A). 피험자의 외부 검사를 진행하십시오 (큐티스와 점막을 검사하고 촉진하여 색상, 일관성 및 부피의 모든 변화를 기록함으로써).
- 칼 (또는 메스)을 사용하....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
이 프로토콜은 해부학 적 특징을 시각화하고 4 가지 종 (개, 고양이, 돼지 및 소)에서 심장의 조직 학적 검사를위한 샘플을 수집하는 데 사용되었습니다. 부검 프로토콜은 위에서 언급 한 각 종에서 반복되었지만 개에서만 설명되었습니다. 부검 프로토콜은 신체(그림 1A)(피부, 탐색 가능한 림프절 및 외부 점막 포함)에 대한 광범위한 외부 검사, 전체 체중 측정 및 동물의 일반적인 상태 점수로 시작됩니다. 외부 검사 후, 부검은 신체의 부분 스킨 (피하 및 표면 근육을 철저히 검사하도록 지시 됨)과 본체 공동의 개방으로 계속됩니다 (그림 1B-D).
복강은 일반적으로 가장 먼저 검사하고(그림 1C), 복강과 복부 장기에 대한 광범위한 현장 검사, 횡격막 절개, 마지막으로 오른쪽 hemithorax 제거.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
현재 프로토콜을 수행할 때 일관된 결과를 위해 몇 가지 중요한 단계를 신중하게 고려해야 합니다. 어린 동물에서 심장 측정은 성인의 심장 측정 (심실 벽 두께 포함)과 다르며 일반적으로 심장은 체중11,12의 더 큰 비율을 나타냅니다. 심실 비대의 정도는 일반적인 체중 공식, 좌심실과 중격 사이의 비율을 자유 우심실 무게로 나눈 값, 정상적인 조건에서 성숙한 동물에서 2.8-4.0이어야합니다 (표 1)를 적용하여 정량화 할 수 있습니다. 이 비율이 4.0을 초과하면 좌심실 비대를 나타내고 2.8보다 작 으면 우심실 비대 4,11,12를 나타냅니다. 챔버의 값을 얻으려면 우심실 자유 벽과 우심방 분리 될.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 공개 할 이해 상충이 없습니다.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 0.9% 식염수 B | . BRAUN MELSUNGEN AG | 심장에서 모든 혈액과 혈전을 씻어냅니다. | |
| 10% 중성 완충 포르말린(NBF) | Q Path | 11699404 | 조직병리학 검체 수집을 위한 재료. |
| 뼈 절단 집게 | HELEN SRL | LS109HV | 뼈를 절단하기 위한 견고한 도구. |
| 도마 | Ambition | 86304 | 더 쉬운 조작을 위해 장기를 절단합니다. |
| 석회질 제거 용액 | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | 8% 포름산과 염산의 1:1 혼합물입니다. |
| 디지털 카메라 | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | 사진 및 비디오 문서화용. |
| 겸자 | MKD-Medicale | 15-430 | 해부 기구. |
| 조직학적 카세트 | Q Path | 720-2215 | 조직병리학 샘플 수집을 위한 재료. 치수: 3 > 2.5 × 0.4 cm |
| 칼 | TEHNO FOOD COM SERV | SRL D2006/15 | 연조직 절단을 위한 날카로운 칼날. |
| 라텍스 장갑 | MKD-Medicale | SANTEX-S | 보호 장비. |
| 마스크 | MKD-Medicale | 21221 | 보호 장비. |
| 페트리 접시 | MKD-Medicale | 0598-1V | 보조 테스트 샘플 수집용 재료. |
| 플라스틱 수취인 | Corning Gosselin | TP200-02 | 조직 병리학 샘플 수집용 재료. |
| Scale | ESPERANZA | MEEKS008 | 장기의 무게를 잰다. |
| Scale | White Deals | 72 | 주제의 무게를 잰다. |
| 메스 | MKD-Medicale | 10322E | 연조직 절단을 위한 날카로운 칼날. |
| 가위 | MKD-Medicale | 13-260 | 해부 기구. |
| 스크럽 | MKD-Medicale | 410100-52 | 보호 장비. |
| 주사기 | MKD-Medicale | 10573EU | 보조 테스트 샘플 수집용 재료. |
참고문헌
- Ashworth, M. Pathology of Heart Disease in the Fetus, Infant and Child: Autopsy, Surgical and Molecular Pathology. , Cambridge University Press. Cambridge. (2019).
- Barone, R. Anatomie Comparée des Mammifères Domestiques: Angiologie. Vigot, , Lyon. (2011).
- Basso,....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
