중증 복막 섬유증이 있는 환자는 이환율과 사망률이 높습니다. 복막 섬유증의 기전은 불분명하다. 이 연구에서는 복막 투석액 주입에 의해 유발된 복막 섬유증의 간단한 실험적 쥐 모델을 설명합니다.
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중증 복막 섬유증이 있는 환자는 이환율과 사망률이 높습니다. 복막 섬유증의 기전은 불분명하다. 이 연구에서는 복막 투석액 주입에 의해 유발된 복막 섬유증의 간단한 실험적 쥐 모델을 설명합니다.
복막 섬유증은 복막 투석(PD)을 받는 환자에서 발생할 수 있으며, 중증 복막 섬유증 환자는 이환율과 사망률이 높습니다. 복막염, 고포도당 복막투석액, 장기간의 파킨슨병은 복막 섬유증의 발병을 촉진합니다. 복막 섬유증에 대한 동물 연구는 인간 및 체외 연구의 한계로 인해 필요합니다. 그러나 대부분의 동물 모델은 임상 상태를 모방하지 않습니다. 복막 섬유증을 연구하기 위해 복막 카테터를 이식하고 2.5% 고포도당 PD 수액과 20mM 메틸글리옥살(MGO)을 21일 동안 매일 복강에 주입하여 임상적으로 관련된 쥐 모델을 개발했습니다. 복막 카테터를 이식하면 바늘에 의한 복막 손상을 방지하고 임상 PD 환자를 모방합니다. 면역형광 염색은 근섬유아세포가 섬유성 복막에 축적되는 것을 보여주었습니다. 실험군은 한외여과량과 복막막 수송 기능이 더 낮았습니다(복막 평형 시험). 이 문서에서는 모델의 자세한 프로토콜을 제공합니다.
복막 투석(PD)은 말기 신장 질환(ESRD) 환자의 약 11%가 받는 신장 대체 요법의 한 종류이다1. 연구에 따르면 복막 섬유증은 PD2를 투여받은 환자에서 발생한다고 보고되었습니다. 심각한 형태의 복막 섬유증인 복막 경화증(EPS)은 높은 이환율과 사망률을 초래한다3. 복막 섬유증의 위험 요인으로는 복막염, 고포도당 복막 투석액, 장기간의 파킨슨병, 유전적 요인등이 있다 4. 복막 섬유증의 메커니즘은 복막 미세환경의 복잡한 변화와 서로 다른 세포 유형 간의 혼선을 포함합니다. 체외 실험 및 임상 관찰은 복막 섬유증에 대한 기계론적 통찰력을 제공하는 데 국한되며 동물 모델이 필요합니다. 인간질병연구에는 개, 토끼, 돼지, 쥐, 생쥐 등의 실험동물이 주로사용되며5, 그 중 생쥐는 크기가 작고, 비용이 저렴하며, 실험이 용이하다는 장점으로 인해 가장 일반적으로 사용된다. 또한, 계통 추적 기술을 사용하여 마우스의 질병 모델에서 특정 세포를 연구할 수 있습니다.
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이 실험은 국립 대만 대학교 의과 대학 및 공중 보건 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)에 따라 승인 및 수행되었습니다. 모든 마우스는 표준 보살핌 하에 수용되었습니다.
1. 동물 실험
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복막 조직의 조직학을 검사한 결과, PD 유체와 MGO(PDF) 그룹에서 복막 섬유화가 성공적으로 유도된 것으로 나타났습니다. 간 표면의 내장 복막의 면역형광 염색은 대조군보다 PDF군의 손상된 복막에서 더 많은 근섬유세포 축적을 보여주었습니다(그림 1). 그림 2A에서 볼 수 있듯이 PDF 그룹은 대조군보다 한외여과 부피가 낮았습니다. 그림 2B에서 볼 수 있듯이 PDF 그룹은 대조군에 비해 복막 평형 테스트가 더 낮았습니다. 이러한 결과는 21일 동안 2.5% PD 수액과 MGO를 매일 주입하면 복막 염증과 섬유증이 성공적으로 유발되었음을 보여줍니다.
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복막에는 내장 및 두정엽 복막이 있어 복부 장기와 복벽을 덮고 있습니다. 그것은 중피 세포의 단층, 중피 하 층, 혈청 세포, 섬유 아세포, 림프구 및 분비 단백질로 구성됩니다14. 복막 섬유증은 중피 세포의 손실 및 탈락, 중피하 비후화, 근섬유아세포 및 대식세포와 같은 많은 염증 세포의 축적입니다 4,14.
복막 섬유증의 동물 모델은 급성 및 만성 복막 염증을 유발하기 위해 복막 투석을 사용합니다. 이전의 급성 복막 염증 모델은 포도상구균 표피, 무세포 상층액, 세균성 복막염 및 지질다당류 6,15,16이 포함된 PD액에 의해 유발.......
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이 연구는 국립 대만 대학 병원(NTUH) 111-UN0026의 지원을 받았습니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
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| 안티 와이드 스펙트럼 사이토케라틴 항체 | abcam | ab9377 | |
| Beckman Coulter | Beckman Coulter | AU5800 | 생화학 분석기 |
| DAPI, 4′,6-diamidino-2-phenylindole 항체 | Sigma-Aldrich | 98718-90-3 | |
| 모든 | |||
| FITC 염소 안티 토끼 | 잭슨 면역 연구 보조 항체 | 111-095-144 | |
| 장갑 | 모든 | ||
| GraphPad Prizm | GraphPad 소프트웨어 | GraphPad 소프트웨어 9.0 | |
| 켈리스 | 모든 | ||
| 메틸 글리 옥살 (MGO) | Sigma-Aldrich | ||
| Mini-UTE 마우스 포트 | 액세스 기술 | MMP-4S 061108B | 마우스 4- 프렌치 실리콘 포트 |
| 단클론 항 작용제, α - 평활근 - Cy3 항체 | 시그마 - 알드리치 | C6198 | |
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