방법 논문

표준화 된 쥐 관상 동맥 링 준비 및 용기 직경에 따른 동적 장력 변화의 실시간 기록

DOI:

10.3791/64121

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2022년 6월 16일

 ,  ,  ,  ,  , 
1Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Basic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Research Institute of Integrated TCM & Western Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

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본 프로토콜은 래트 관상동맥의 혈관 반응성을 측정하기 위한 와이어 근그래프 기술을 기술한다.

초록

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심혈관 시스템 질환의 주요 사건으로 관상 동맥 질환 (CAD)은 전 세계 사람들의 생명과 건강을 심각하게 위협하는 죽상 동맥 경화증, 심근 경색 및 협심증의 주요 원인으로 널리 알려져 있습니다. 그러나 고립 된 혈관의 역동적 인 생체 역학적 특성을 기록하는 방법은 오랫동안 사람들을 당황하게했습니다. 한편, 관상동맥의 정확한 위치 결정 및 분리는 체외 동적 혈관 긴장 변화를 측정하기 위해 CAD 약물 개발의 추세가 되고 있다. 본 프로토콜은 래트 관상동맥의 거시적 동정 및 현미경적 분리를 기술한다. 혈관 직경을 따라 관상동맥 고리의 수축 및 팽창 기능을 확립된 다중 근전도 시스템을 사용하여 모니터링하였다. 샘플링에서 데이터 수집에 이르기까지 관상 동맥 고리 긴장 측정의 표준화되고 프로그래밍 된 프로토콜은 실험 데이터의 반복성을 크게 향상시켜 생리적, 병리학 적 및 약물 개입 후 혈관 긴장 기록의 신뢰성을 보장합니다.

서론

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관상동맥 질환(CAD)은 전형적이고 대표적인 심혈관 질환으로 널리 인식되고 우려되고 있으며, 선진국과 개발도상국 모두에서 사망의 주요 원인이 되고 있다 1,2. 정상적인 심장 생리 기능을위한 혈액 및 산소 공급 경로로서, 순환 혈액은 심근 3,4의 표면에 두 가지 주요 관상 동맥과 혈액 혈관 네트워크를 통해 심장에 들어가고 영양을 공급합니다. 관상 동맥의 콜레스테롤과 지방 침착은 심장의 혈액 공급과 혈관 시스템의 폭력적인 염증 반응을 차단하여 죽상 동맥 경화증, 안정 협심증, 불안정 협심증, 심근 경색 또는 갑작스런 심장 사망을 유발합니다 5,6. 관상동맥의 병리학적 협착에 반응하여, 보상적 가속 생리적 심장 박동은 좌심실의 출력을 증가시킴으로써 심장 자체 또는 신체의 중요한 기관의 혈액 공급을 만족시킨다(7). 장기간의 관상 동맥 협착증이 제 시간에 완화되지 않으면 심장의 특정 영역에서 광범위한 새로운 혈관이 발생할 수 있습니다

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프로토콜

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동물 프로토콜은 청두 전통 중국 의학 대학 (기록 번호 2021-11)의 관리위원회에 의해 검토되고 승인되었습니다. 수컷 Sprague Dawley (SD) 래트 (260-300 g, 8-10주령)를 본 연구에 사용하였다. 래트를 동물 챔버에 보관하고 실험 중에 자유롭게 마시고 먹을 수 있었다.

1. 용액 준비

  1. 118 mM의 NaCl, 4.7 mM의 K+, 2.5 mM의 CaCl2, 1.2 mM의KH2PO4,1.2mM의 MgCl2∙6H2O,25mM의 NaHCO3, 11 mM의 D-글루코스, 및 5 mM의 HEPES를 용해시켜 생리적 염 용액 (PSS)을 제조하였다 (물질의 표 참조).
  2. 58 mM의 NaCl, 60 mM의 K+, 2.5 mM의 CaCl2, 1.2 mM의 KH2PO4, 1.2 mM의MgCl2∙6H2O,25 mM의 NaHCO3, 11 mM의 D-글루코스, 및 5 mM의 HEPES를 용해시켜 하이 K

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결과

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해부학적으로 위치된, 심근 조직 깊숙이 분포하고 숨겨져 있는 쥐 관상동맥은 쉽게 인식되지 않았다. 인간(도 1A)과 래트(도 1B)의 관상동맥을 비교함으로써, 도 2의 샘플링 과정에 따라 래트 관상동맥의 신속하고 정확한 분리가 진행되었다. 광학 현미경으로 전방에서 우측 귀, 폐동맥 및 정점을 정밀하게 위치시킨 후, 도 2A에 도시된 흑색 선을 따라 심근을 해부하였다. 관상 동맥의 심실 간 지점의 약 5mm가 우리의 견해에 명확하게 노출되었습니다. 심실 중격 동맥을 둘러싸고 있는 끈적끈적한 심근을 미세하게 분리한 후, 혈관 정렬 방향으로 관상동맥의 2mm 루프를 횡단하기 위해 2 cm 와이어를 사용하였다. 즉시, 분리된 2mm 관상동맥 링을 도 3에 도시된 바와 같이.......

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토론

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CAD를 앓고있는 광범위한 환자를 포함하는 관상 동맥 미세 순환의 교란은 점차적으로 인식되어 적절한 심근 관류의 기초를 염려하고 있습니다. 갑작스런 관상 동맥 심장 질환 및 심혈관 질환의 심각한 합병증을 고려할 때시기 적절한 약물 예방 및 치료는 CAD17을 가진 임상 개인에게 매우 중요합니다. 필연적으로, 관상 동맥 해부학의 비밀과 생리 구조의 복잡성은 CAD 18,19,20,21,22,23,24,25에 대한 약물 및 치료의 효과에 대한 합리적이고 과학적인 평가를 심각하게 제한했습니다.

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공개 사항

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저자는 공개 할 것이 없습니다.

감사의 글

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이 작업은 쓰촨성 과학 기술 계획 (2022YFS0438), 중국 국립 자연 과학 재단 (82104533), 중국 박사 후 과학 재단 (2020M683273) 및 쓰촨성 과학 기술부 (2021YJ0175)의 핵심 R & D 프로젝트가 지원했습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
ApigeninSangon Biotech Co., Ltd., 상하이, 중국150731
CaCl2Sangon Biotech Co., Ltd., 상하이, 중국A501330
D-glucoseSangon Biotech Co., Ltd., 상하이, 중국A610219
HEPESXiya Reagent Co., Ltd., 산동, 중국S3872
KClSangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA100395
KH2PO4Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA100781
LabChart Professional version 8.3 ADInstruments, 호주—
MgCl2· 6H2OSangon Biotech Co., Ltd., 상하이, 중국A100288
다중 근경 시스템 Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark620M
NaClSangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA100241
NaHCO3Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA100865
강선Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark400447
U46619Sigma, USAD8174

참고문헌

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Malakar, A. K., et al. A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics. Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).
  2. Murray, C., et al.

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재인쇄 및 허가

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