투과, 편광 및 보상 광 현미경 하에서의 활액 분석은 간단한 단계를 통해 샘플의 염증성 또는 비염증성 특성을 평가하는 데 사용됩니다. 골관절염에서 칼슘 결정을 검출하고 골관절염의 더 심각한 하위 집합을 식별하는 데 특히 유용합니다.
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활액(SF) 분석은 골관절염(OA) 진단에 중요합니다. 총 및 미분 백혈구(WBC) 수를 포함한 거시적 및 미시적 특징은 OA의 특징인 SF의 비염증성 특성을 정의하는 데 도움이 됩니다. OA 환자에서 SF 샘플의 WBC는 일반적으로 마이크로 리터당 2000 세포를 초과하지 않으며 호중구와 같은 염증 세포의 비율은 매우 낮거나 없습니다. 칼슘 결정은 OA 환자로부터 수집된 SF에서 빈번합니다. OA의 발병기전에서 그들의 역할은 불분명하지만 경미한 염증 과정 및 더 심각한 질병 진행과 관련이 있습니다. 최근에, 칼슘 결정은 OA의 초기 및 후기 단계 모두에서 설명되었으며, 이는 OA 및 약리학적 치료의 다양한 임상 하위 집합을 진단하는 데 중요한 역할을 할 수 있음을 나타냅니다. OA에서 SF 분석의 전반적인 목표는 SF의 비염증성 정도를 확인하고 칼슘 결정의 존재를 강조하는 두 가지입니다.
골관절염(OA)은 복잡하고 다인성인 만성 관절 질환으로, 전 세계적으로 15세 이상 피험자의 유병률이 16%, 40세 이상 피험자의 경우 23%로 추정됩니다. 골관절염 발병률은 인구 고령화와 비만, 대사증후군 등의 위험인자의 증가로 인해 증가할 것으로 예상된다2.
OA와 관련된 주요 문제 중에는 초기 단계에서 질병을 진단하는 데 어려움이 있으며 현재 사용 가능한 치료법은 통증 관리 및 글리코사미노글리칸과 같은 증상이 있는 느린 작용 약물(SYSADOA)로 제한됩니다. OA의 진단은 임상 증상과 영상 소견을 기반으로 합니다. 그러나 두 평가 사이의 상관관계가 부족하면 OA 진단 및 치료 시작이 수년간 지연될 수 있다2. OA는 퇴행성 과정과 낮은 등급의 염증이 특징이며, 이는 활액(SF) 분석을 통해 쉽게 조사할 수 있습니다. SF는 히알루론산이 풍부한 점성 혈장 투석액으로 관절 공간을 윤활하고 연골에 영양분과 산소를 공급하며 대사 노폐물을 제거합니다. SF는 또한 충격 흡수 장치 역할을 하여 응력과 변형이 발생하는 동안 관절을 보호합니다3.
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본 프로토콜은 파도바 대학 병원 윤리위원회의 지침을 준수합니다. SF는 클리닉에 처음 내원할 때 또는 관절염 발적에 대한 반응으로 관절 삼출에 대한 치료적 관절 천자를 받는 환자의 무릎 관절에서 환자의 동의를 얻어 수집되었습니다. 절차에 대한 금기 사항은 응고 병증, 항응고제, 피부 병변, 피부염 또는 관절 위의 봉와직염이었습니다. 모든 SF 샘플은 비식별화되었습니다.
1. 활액 준비
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골관절염의 영향을 받는 큰 관절은 종종 부어오르고 상당한 양의 SF를 생성하며, 이는 관절 천자를 통해 배출된다15. 관절 천자 직후에 평가되는 SF의 거시적 특성은 본질적으로 양, 색, 투명도 및 점도를 포함한다17. 낮은 특이성에도 불구하고 염증 정도에 대한 예비 데이터를 제공합니다. 색상은 SF 세포성과 세포외 기질 거대분자의 단편화 정도에 따라 다릅니다. OA 환자로부터 채취한 SF는 옅은 노란색으로 일반적으로 비염증성 샘플과 관련된 음영인 반면 짙은 노란색은 염증성 삼출액과 관련이 있습니다(그림 2). 예를 들어, 모세혈관 파열로 인해 샘플에 소량의 혈액이 존재하면 약간 주황색을 띠게 됩니다. 혈구 삼출액은 잠재적인 혈통을 나타낼 수 있으므로 신중하게 고려해야 합니다. 선명도는 OA 환자로부터 수집한 SF의 특징입니다. 사실, 비염증성 SF는 염증성 SF의 탁한 외관.......
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OA에서 SF 분석은 총 및 차등 백혈구 수와 CPP 및 BCP를 포함한 결정 검색과 같은 간단한 단계를 통해 질병 특성을 정의하는 데 도움이 됩니다. 또한, MSU 결정의 검출은 중요한 동반 질환을 강조할 수 있습니다.
저렴한 비용과 간단한 실행에도 불구하고 테스트의 민감도와 결과의 신뢰성은 주로 결정 식별과 관련된 경험이 없는 분석가로 인해 영향을 받을 수 있습니다. 분석가의 교육과 경험은 CPP 및 MSU 결정의 모양과 복굴절을 구별하고 그 모양을 복굴절 정도와 일치시키는 데 중요합니다. 일부 연구에서는 서로 다른 실험실 간의 결정 식별 불일치를 보고했습니다. 따라서 신뢰할 수 있고 일관된 결과를 얻기 위해서는 실험실 기술자를 교육하는 것이 필수적이다14. 결정 식별은 또한 병원성 결정과 혼동될 수 있는 복굴절 입자의 잘못된 해석에 의해 영향을 받습니다. 이들은 외부 소스(즉, 먼지 또는 섬유)에서 파생되거나 관절강 내부(즉, 코르.......
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모든 저자는 이해 상충을 공개하지 않습니다.
저자는 활액 분석 분야에서 귀중한 멘토링을 해준 Leonardo Punzi 교수와 Padova University Hospital의 지원에 감사드립니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Alizarin red S | Merck | A5533 | BCP 크리스탈 검색 |
| Burker 챔버 | Merck | BR718905 | 총 백혈구 수를 위해 |
| 커버 안경 | Merck | C7931 | 현미경 검사용 |
| EDTA 튜브 | BD | 368861 | SF 컬렉션 |
| 유리 슬라이드 | Merck | S8902 | 수정 검색용 |
| 람다 필터(보정기) | 임의 | 현미경 회사를 참조하십시오 | |
| Malassez-Potain 피펫 | Artiglass | 54830000 | 코노비엘 액체의 희석용 |
| 메틸렌 블루 용액 | Merck | 3978 | 총 백혈구 수를 위해 |
| 편광 현미경 | Leica, Nikon, 기타 | 모델 및 회사에 따라 완전한 | 활막 유체 분석을 위해 |
| 편광 렌즈 | Any | 현미경 회사를 참조하십시오 | |
| 테스트심플 | Waldeck | 14386 | 세포 분화를 위한 Supravital 염색 |
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