현재 프로토콜은 전체 마우스 갑상선을 시각화하고 역형성 갑상선 암종의 성장을 모니터링하기 위한 고주파 초음파를 설명합니다.
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이 논문에서
요약
초록
역형성 갑상선암(ATC)은 예후가 좋지 않고 생존 기간 중앙값이 짧지만 효과적인 치료법이 결과를 크게 개선하지 않습니다. ATC의 진행을 모방하는 유전자 조작 쥐 모델은 연구자들이 이 질병에 대한 치료법을 연구하는 데 도움이 될 수 있습니다. 마우스의 세 가지 다른 유전자형을 횡단하는 TPO-cre/ERT2; 브라프CA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 형질전환 ATC 모델이 개발되었습니다. ATC 뮤린 모델은 BrafV600E 의 과발현 및 Trp53의 결실과 함께 타목시펜의 복강내 주사에 의해 유도되었고, 종양은 약 1개월 이내에 생성되었다. 고해상도 초음파를 적용하여 종양 개시 및 진행을 조사하고 종양 크기를 측정하여 동적 성장 곡선을 얻었습니다. 자기 공명 영상 (MRI) 및 컴퓨터 단층 촬영 스캐닝과 비교할 때, 초음파는 비 침습적이고, 휴대가 가능하며, 실시간이며, 방사선 노출없이 ATC 쥐 모델을 관찰하는 데 이점이 있습니다. 고분해능 초음파는 동적 및 다중 측정에 적합합니다. 그러나 생쥐의 갑상선에 대한 초음파 검사에는 관련 해부학 적 지식과 경험이 필요합니다. 이 기사는 형질전환 ATC 모델에서 종양을 스캔하기 위해 고해상도 초음파를 활용하는 자세한 절차를 제공합니다. 한편, 초음파 매개 변수 조정, 초음파 스캐닝 기술, 동물의 마취 및 회복, 그리고 그 과정에서 주의가 필요한 기타 요소가 나열됩니다.
서론
역형성 갑상선암(ATC)은 갑상선암의 2% 미만을 차지하지만 매년 갑상선암 관련 사망의 50% 이상을 유발합니다. ATC 진단 후 평균 생존 기간은 약 6개월에 불과하며, 생존율을 유의하게 향상시키는 치료법은 없다 1,2.
ATC의 희귀성은 질병이 어떻게 시작되고 공격적으로 진행되는지를 연구하는 연구를 방해했습니다. 질병을 모방한 유전자 조작 마우스 모델이 최근에 이용 가능해졌으며, 이는 질병과 가능한 치료법에 대한 반응에 대한 통찰력을 제공합니다 3,4,5. 이러한 연구는 측정 및 모니터링을 위한 정확한 종양 영상화를 필요로 하며, 이는 전형적으로 자기 공명 영상, 컴퓨터 단층 촬영 또는 고해상도 초음파를 사용하여 수행된다 6,7. 초음파 검사는 마우스 기관에서 널리 사용되었습니다. 실시간으로 수행 할 수 있고 피사체를 방사선에 노출시키지 않기 때문에 자기 공명 영상 ....
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프로토콜
본 연구는 쓰촨대학교 동물관리이용위원회의 승인을 받아 수행되었다. TPO-cre/ERT2; 브라프CA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 형질전환 마우스10 마리가 본 연구에 사용되었다( 재료 표 참조). 프로토콜 단계는 필요한 경우 다른 동물 종에 대해 수정할 수 있습니다. 평균 연령이 93 일 인 암컷 6 마리와 수컷 6 마리를 포함한 12 마리의 마우스가 여기에 사용되었습니다.
1. 실험 준비
- 초음파 시스템을 켜고( 재료 표 참조) 이미지를 캡처하고 데이터를 수집하기 위한 새 폴더를 만듭니다. 40MHz 라인 프로브를 선택하고 표면 조직 패턴을 클릭하여 표면 조직 변환기를 활성화합니다. 갑상선 영상에 "B-모드"를 사용합니다(그림 1A).
알림: B 모드는 기본 초음파 영상 모드입니다. 초음파 이미지의 모양은 소리와 신체 조직의 물리적 상호 작용에 의존합니다. B-모드 이미지들은 회색 이미지들(11
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결과
연구 시작 시 평균 우측 ATC 크기는 4.867mm2였고, 평균 좌측 ATC 크기는 5.189mm2였다. 네 번째 측정에서, 평균 우측 ATC 크기는 11.844 mm2로 증가한 반면, 좌엽의 종양 크기는 9.280mm2로 증가하였다. 총 ATC 크기가 10.057 mm 2에서 15.843 mm2로 변경 연구의 후반 단계에서 ATC는 빠르게 성장했습니다. "P92"로 표지된 마우스(표 1)의 경우, 네 번째 측정에서의 종양 크기는 초기 측정에서의 크기보다 거의 4배 더 크게 증가하였다. 4마리의 마우스의 대표적인 측정치와 성장 곡선을 도 5에 나타내었다.
고주파 초음파는 인간의 갑상선을 검사하는 데 가장 자주 사용되는 영상 방식이며 이 기술은 생쥐에게도 적합한 것으로 보입니다. .......
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토론
이 프로토콜은 고해상도 초음파 검사를 사용하여 유전자 조작 마우스 모델에서 동소 ATC 종양을 분석합니다. TPO-cre/ERT2의 유전자형을 가진 형질전환 모델; 브라프CA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10은 당사 실험실에서 개발되었습니다. 동물들은 BrafV600E 를 과발현하고 Trp53이 부족합니다. 동물에게 타목시펜을 복강 주사하면 약 1개월 후에 종양 성장이 일어난다10. 종양은 빠르게 성장하여 50일 이내에 측정 가능한 크기에 도달합니다. 이 프로토콜은 4개월 동안 종양 성장을 모니터링하는 데 사용되었습니다.
초음파는 간, 갑상선 및 태아를 포함하여 인간 조직과 유사한 신체 위치를 차지하는 조직을 이미징하기 위해 마우스에서 신뢰할 수 있음이 입증되었습니다9. 인간과 마찬가지로 마.......
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공개 사항
저자는 선언할 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
이 연구는 공공, 상업 또는 비영리 자금 지원 기관으로부터 특정 보조금을 받지 못했습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 접착 테이프 | 수상자 | ||
| 마취 시스템 | RWDlifescience | ||
| Brafflox/wt 마우스 | 중국 청두 | ||
| RWDlifescience | |||
| 면봉 | 위너 | ||
| 탈모 크림 | Veet | ||
| 전기 가열 담요 | Petbee | ||
| Isoflurane 기화기 | RWDlifescience | ||
| 의료 장갑 | 위너 | ||
| 종이 타월 | 브리즈 | B914JY | |
| TPO-cre/ERT2 마우스 | Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Trp53flox/wt mice | 중국 청두 | ||
| 초음파 젤 | Keppler | KL-250 | |
| 초음파 기계 | VisualSonics | Vevo 3100 |
참고문헌
- Maniakas, A., et al. Evaluation of overall survival in patients with anaplastic thyroid carcinoma, 2000-2019. JAMA Oncology. 6 (9), 1397-1404 (2020).
- Molinaro, E., et al. Anaplastic thyroid carcinoma: From....
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재인쇄 및 허가
