본 프로토콜은 우울증에 대한 몽골 전통 의학인 Zadi-5의 치료 효능에 대한 행동 테스트 검증 및 생물정보학적 예측을 위한 방법을 설명합니다.
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방법 논문
우울증의 쥐 모델에서 몽골 전통 의학 Zadi-5에 대한 행동 및 네트워크 약리학 기반 분석
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
Zadi-5는 우울증과 자극 증상 치료에 널리 사용되는 몽골 전통 의학입니다. 우울증에 대한 Zadi-5의 치료 효과는 이전에 보고된 임상 연구에서 나타났지만, 약물에 존재하는 활성 제약 화합물의 정체와 영향은 완전히 설명되지 않았습니다. 이 연구는 네트워크 약리학을 사용하여 약물 구성을 예측하고 Zadi-5 알약의 치료 활성 화합물을 식별했습니다. 여기에서 만성 예측되지 않은 경미한 스트레스(CUMS)의 쥐 모델을 확립하고 우울증에 대한 Zadi-5의 잠재적 치료 효능을 조사하기 위해 OFT(Open Field Test), MWM(Morris water maze) 분석 및 SCT(sucrose consumption test)를 수행했습니다. 이 연구는 우울증에 대한 Zadi-5의 치료 효과를 입증하고 장애에 대한 Zadi-5 작용의 중요한 경로를 예측하는 것을 목표로 했습니다. 플루옥세틴(양성 대조군)과 Zadi-5 투여군의 수직 및 수평 점수(OFT), SCT 및 구역 교차 횟수는 치료를 받지 않은 CUMS 그룹 쥐보다 유의하게 높았다(P < 0.05). 네트워크 약리학 분석 결과에 따르면 PI3K-AKT 경로는 Zadi-5의 항우울 효과에 필수적인 것으로 밝혀졌습니다.
서론
주요우울장애(MDD)라고도 하는 우울증은 심각한 신경정신질환으로 사회에 대한 의료적, 경제적 부담을 증가시킵니다. 관련 복잡성, 이환율 및 사망률로 인해 장애에 대한 치료법을 찾기 위해 상당한 양의 연구가 수행되었습니다 1,2. 세계보건기구(WHO)의 정신 건강 조사에 따르면 현재 전 세계적으로 약 3억 5천만 명이 우울증 및 관련 증상으로 고통받고 있습니다. 2030년에는 우울증이 암과 심혈관 질환을 제치고 전 세계 질병 부담의 주요 원인이 될 것으로 예상됩니다. 따라서 우울증의 예방과 치료는 가까운 장래에 전 세계적인 우선순위가 될 것이다3. MDD의 발병 기전은 아직 밝혀지지 않았습니다. 그럼에도 불구하고 일반적으로 유전적 소인, 시상하부-뇌하수체-부신 축의 기능 장애, 신경 전달 물질 분비 감소, 신경 면역 조절 장애로 인한 신경 염증, 세포 사멸 및 세포 증식 감소 4,5.
이러한 요인 중 신경면역 조절 장애로 인한 신경 염증과 신경 영양 인자의 분비 변화는 우울증 및 기타 많은 정신....
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프로토콜
모든 실험 프로토콜은 내몽골 의과대학 동물실험윤리위원회의 승인을 받았으며 국립보건원의 동물관리 및 윤리 지침을 따랐다. 생후 8주령(200g ± 20g)의 수컷 Sprague Dawley(SD) 쥐를 1주일 동안 12시간/12시간 조절된 빛/어둠 주기에서 온도(22°C ± 2°C) 및 습도(55% ± 15%)로 조절된 방에 수용했습니다. 네트워크 약리학 분석의 워크플로우에 대해서는 그림 1 을 참조하십시오.
1. 쥐의 행동 테스트
- CUMS 쥐 모델 설정
- 대조군을 제외한 모든 쥐에게 28일 동안 격리와 결합된 다음 자극을 적용합니다: 24시간 동안 빛/어둠 주기의 반전, 24시간 동안 음식 부족, 24시간 동안 물 부족, 15분 동안 고속 레벨 흔들기(1회/초), 꼬리 clamp 2분 동안, 5분 동안 냉수(4°C)에서 수영, 45°C 열 자극 및 24시간 동안 습식 패딩(표 1). 개별 우리에서 쥐를 키우십시오.
알림: 연속으로 같은 유형의 자극을 반복하지 마십시오. CUMS 쥐 모델을 확립하기 위한 위의 절차는 동물 윤리 위원회의 승인을 받았으며 앞서설명한 ....
- 대조군을 제외한 모든 쥐에게 28일 동안 격리와 결합된 다음 자극을 적용합니다: 24시간 동안 빛/어둠 주기의 반전, 24시간 동안 음식 부족, 24시간 동안 물 부족, 15분 동안 고속 레벨 흔들기(1회/초), 꼬리 clamp 2분 동안, 5분 동안 냉수(4°C)에서 수영, 45°C 열 자극 및 24시간 동안 습식 패딩(표 1). 개별 우리에서 쥐를 키우십시오.
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결과
동물행동시험
CUMS 유도 쥐 우울증 모델의 행동 테스트 결과
CUMS 자극 전 OFT 점수, 자당 소비량 및 MWM 분석에서 테스트 그룹 간에 유의한 차이가 발견되지 않았습니다. CUMS 모형 구축 후 MOD 그룹의 수직 및 수평 점수는 CON 그룹보다 낮았습니다(P < 0.05). MOD 그룹과 비교했을 때, POS 및 Zadi-5 그룹의 수직 및 수평 점수는 유의하게 높았습니다(P < 0.05)(그림 2A,B).
0일째에, 피실험군은 자당 소비량(%)에서 유의한 차이가 없었다. 28일째에 Zadi-5 및 POS 그룹의 자당 소비량(%)이 MOD 그룹보다 높았습니다(그림 2C).
CON 그룹과 .......
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토론
우울증은 우울한 기분, 무쾌감증, 에너지 부족을 특징으로 하는 정신 질환입니다. 이 장애는 산만함, 인지 기능 장애, 사회적 위축, 불면증, 성기능 장애 및 위장 질환을 동반합니다18,19. 우울증 연구에서 동물 모델을 확립하는 것은 신약의 병리학적 메커니즘과 효과를 이해하는 데 매우 중요합니다. 이 연구에서는 사회, 가족 및 일과 관련된 원인으로 인한 스트레스, 공격 및 좌절감을 시뮬레이션하기 위해 프로토콜 섹션 2 및 표 1에 설명된 자극을 통해 CUMS 유도 쥐 우울증 모델을 설정했습니다. 자극의 강도의 적절한 순서와 조정은 이 우울증 모델을 확립하는 데 매우 중요합니다. 또한 OFT의 각 쥐 테스트 후에는 다음 쥐의 발자국이 영향을 받지 않도록 상자를 즉시 청소해야 합니다. 분리와 결합된 CUMS는 인간 환자의 우울 증상 및 생화학적 징후의 발달을 시뮬레이션하는 신뢰할 수 있는 쥐 우울증.......
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공개 사항
저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
우리는 중국 내몽골 의과 대학의 몽골 의학 교수진이 제공한 장비와 실험실에 감사드립니다. 이 연구는 중국 국립자연과학재단(81760762)과 중국 내몽골 건강위원회 과학기술계획계획(202201300)의 지원을 받았다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 사이토스케이프 소프트웨어 | 버전 3.7.0 | ||
| Fluoxetine | Lilly Suzhou Pharmaceutical Co., Ltd | J20160029 | |
| Morris 물 미로 비디오 트레일 분석 시스템 | Tai Meng Tech Co., Ltd | WMT-200 | |
| Sprague Dawley 쥐 | Beijing Biotechnology Co., Ltd, 중국 | SCXK (JING) 2016-0002 | |
| 비디오 추적 시스템 | Tai Meng Tech Co., Ltd | ZH-ZFT | |
| Zadi-5 알약 | 준비 센터 국제 몽골 병원, 내몽골, 중국 | M1301006 |
참고문헌
- Jiang, N., et al. The antidepressant-like effects of Shen Yuan in a chronic unpredictable mild stress rat model. Frontiers in Psychiatry. 12, 622204(2021).
- Yang, L. F., et al. The effects of psychological stress on depression.
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재인쇄 및 허가
