Method Article

Box-Behnken Response Surface Method와 결합된 CRITIC 기반 Tiebangchui with Zanba의 처리 기술 최적화

DOI:

10.3791/65139

⸱

May 12th, 2023

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1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

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본 프로토콜은 Box-Behnken 반응 표면 방법과 결합된 CRITIC을 사용하여 잔바 볶음 Tiebangchui에 대한 효율적이고 표준적인 해독 처리 방법을 설명합니다.

Abstract

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중국어로 Tiebangchui(TBC)라고 불리는 Aconitum pendulum Busch.의 말린 뿌리는 가장 유명한 티베트 의약품 중 하나입니다. 중국 북서부에서 널리 사용되는 허브입니다. 그러나 TBC의 강렬한 독성과 치료 및 독성 용량이 유사하기 때문에 많은 중독 사례가 발생했습니다. 따라서 독성을 줄이기위한 안전하고 효과적인 방법을 찾는 것이 시급한 과제입니다. 티베트 의학 고전을 검색하면 잔바 볶음 TBC의 가공 방법이 "칭하이 성 티베트 의학 가공 사양 (2010)"에 기록되어 있음을 알 수 있습니다. 그러나 특정 처리 매개 변수는 아직 명확하지 않습니다. 따라서 본 연구는 잔바 볶음 TBC의 가공 기술을 최적화하고 표준화하는 것을 목표로 한다.

먼저, TBC의 슬라이스 두께, 잔바의 양, 가공 온도 및 시간의 4가지 요인에 대해 단일 요인 실험을 수행했습니다. 잔바 볶음 TBC의 모노에스테르 및 디에스테르 알칼로이드 함량을 지표로 하여 Box-Behnken 반응 표면 방법과 결합된 CRITIC을 사용하여 잔바 볶음 TBC의 가공 기술을 최적화했습니다. 잔바 볶음 TBC의 최적화된 가공 조건은 TBC 슬라이스 두께 2cm, TBC보다 3배 더 많은 잔바, 처리 온도 125°C, 볶음 60분이었다. 본 연구는 잔바 볶음 TBC의 사용을 위한 최적화된 표준 처리 조건을 결정하여 잔바 볶음 TBC의 안전한 임상 사용 및 산업 생산을 위한 실험 기반을 제공했습니다.

Introduction

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가장 유명한 티베트 의약품 중 하나인 Aconitum pendulum Busch와 A. flavum Hand.-Mazz.의 말린 뿌리는 중국어 1,2로 Tiebangchui(TBC)라고 합니다. TBC의 말린 뿌리는 추위와 바람을 쫓아내고 통증을 줄이며 충격을 진정시키는 데 도움이 됩니다. TBC의 말린 뿌리가 류마티스 관절염, 타박상 및 기타 감기 질환 치료에 일반적으로 사용된다는 내용의 "중화 인민 공화국 보건부 의약품 기준 (티베트 의학)"의 첫 번째 권에 기록되어 있습니다3. 그러나 TBC의 임상적 치료 용량은 독성 용량과 유사하며, 부적절한 사용으로 인한 중독 또는 사망 사고가 빈번하게 보고되고 있다4. 따라서 TBC의 독성을 줄이고 효능을 보존하는 것은 수년에 걸쳐 연구 핫스팟이 되었습니다.

티베트 의학에서 가공은 TBC의 독성을 약화시키는 가장 효과적인 방법 중 하나입니다. "칭하이 성 티베트 의학의 가공 사양 (2010)"에 따르면, 원래 허브 (TBC)는 철 냄비에 넣고 잔바가 노랗게 변할 때까지 잔바와 함....

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Protocol

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잔바 볶음 TBC 처리 방법은 Box-Behnken 응답 표면 방법과 결합된 CRITIC에 의해 최적화되고 표준화되었습니다. 벤조일라코니틴, 아코니틴 및 3-데옥시아코니틴을 이 과정에서 평가 지표로 사용했습니다.

1. 시료 용액 준비

  1. 표준물질 원액을 준비한다. 전자 분석 저울에서 벤조일라코니틴 9.94mg, 아코니틴 8.49mg 및 3-데옥시아코니틴 6.25mg(재료 표)의 무게를 정확히 측정하여 10mL 용량 플라스크에 넣습니다. 그런 다음 0.05% 염산 메탄올 용액을 첨가하여 고형물을 용해시키고 부피를 10mL로 구성합니다. 마지막으로 혼합물을 잘 흔들어 질량 농도가 0.9940mg/mL 벤조일아코니틴, 0.8490mg/mL 아코니틴 및 0.6250mg/mL의 3-데옥시아코니틴인 표준물질 원액을 얻습니다.
    주의: 염산은 부식성이 강한 물질입니다11. 장갑, 실험복, 고글 및 흄 후드와 같은 적절한 보호 장치를 사용하십시오.
  2. 테스트 샘플 용액을 준비합니다.
    1. 원뿔형 플라스크에 잔바 볶음 TBC 분말 2g의 무게를 잰다.
      1. TBC 30g(2cm)과 잔바 90g의 무게를 달아 예....

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Results

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이 연구에서 사용된 용출 그래디언트는 반복 디버깅 후 결정된 바와 같이 잔바 볶음 TBC의 세 가지 인덱스 성분에 대해 우수한 분해능을 보였습니다(그림 1). 잔바 볶음 TBC의 세 가지 지표 성분은 특정 농도 범위 내에서 양호한 선형 관계를 가졌다(표 2). 잔바 볶음 TBC의 정밀도(표 5), 안정성(표 6), 반복성(표 7) 및 시료 회수율(표 8)은 모두 중국 약전(Volume 4, 2020)22에 명시된 방법론적 범위 내에 있었으며, 이는 이 방법이 실현 가능함을 나타냅니다. 따라서, HPLC 방법은 잔바 볶음 TBC의 분석을 실시하여 신뢰성이 있었다.

처리 기술에 대한 각 요인의 영향은 단일 요인 테스트를 사용하여 설명되었으.......

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Discussion

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TBC는 감기를 쫓아내고 통증을 완화시키는 효과가 있는 중요한 티베트 약입니다. 그것은 주로 수천 년 동안 중국에서 외상성 부상과 류마티스 관절염을 치료하는 데 사용되었습니다24,25,26. 디테르페노이드 알칼로이드는 TBC27,28,29의 활성 및 독성 성분입니다. TBC의 아코 니툼 알칼로이드의 주요 독성 효과는 신경 독성, 심장 독성 및 위장 독성입니다30,31. TBC는 일반적으로 독성 위험을 완화하기 위해 경구 사용 전에 처리됩니다. 찜, 달인, 모래 튀김과 같은 다양한 가공 방법과 H.......

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Disclosures

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저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (No. 82130113), 중국 박사후 과학 재단 (No. 2021MD703800), 쓰촨성 과학 기술부 청소년 과학 재단 (No. 2022NSFSC1449) 및 청두 중국 전통 의학 대학의 "Xinglin Scholars"연구 진흥 프로그램 (No. BSH2021009).

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
3-DeoxyaconitineChengdu Desite 생물공학 Co., 주식 회사.DST221109-033
AconitineChengdu Desite 생명공학 Co., Ltd.
암모늄 아세테이트Tianjin Kermel 화학 시약 Co., Ltd크로마토그래피 등급
BenzoylaconitineChengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.
Design-Expert 소프트웨어Stat-Ease, Inc., Minneapolis, MN, USA버전 13.0
전자 분석 저울Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd.FA1004
고성능 액체 크로마토그래SHIMADZU Co., Ltd.LC-20A
고속 스매싱 머신베이징 Zhongxing Weiye 악기 Co., Ltd.FW-100
Millipore 필터Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltdφ 13 0.22 Nylon66
볶음 기계Changzhou Maisi Machinery Co., LtdType 5
TiebangchuiGannan Baicao Biotechnology Development Co., Ltd20211012
초순수 전신RephiLe Bioscience, Ltd.Genie G
초음파 세척 기계Ningbo Xinyi 초음파 장비 Co., LtdSB2200
Zanba27 Chuanzang Road, Ganzi County-
DSTDW000602DSTDB005502피

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Li, C. Y., et al. Aconitum pendulum and Aconitum flavum: A narrative review on traditional uses, phytochemistry, bioactivities and processing methods. Journal of Ethnopharmacology. 292, 115216(2022).
  2. Wang, J., Meng, X. H., Chai, T., Yang, J. L., Shi, Y. P.

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Tiebangchui ProcessingZanba Stir FryBox Behnken MethodCRITIC MethodResponse SurfaceHigh Performance Liquid ChromatographyAlkaloid ContentProcessing OptimizationToxicity ReductionQuality Control

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