이 기사에서는 구강 누공이 있는 마우스 모델을 설정하는 단계별 절차를 간략하게 설명합니다. 구강 누공은 열화된 안과 소작을 사용하여 경구의 정중선 부분을 손상시켜 구강과 비강 사이에 구멍을 형성하여 만들어졌습니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
이 연구는 구강 누공을 조사하기 위한 실행 가능한 모델을 개발하기 위해 가열된 안과 소작을 활용하는 방법을 제시합니다. C57BL/6 마우스를 사용하여 구강 누공(ONF) 모델을 확립했습니다. ONF를 만들기 위해 쥐를 마취하고 고정시키고 딱딱한 입천장을 노출했습니다. 수술 과정에서 안과 소작을 사용하여 경구개 정중선에 2.0 x 1.5mm 전층 점막 손상을 유도했습니다. 실험의 성공을 보장하기 위해 ONF의 크기를 제어하고 출혈을 최소화하는 것이 중요했습니다. ONF 모델의 효과에 대한 검증은 수술 후 7일째에 해부학적 및 기능적 평가를 모두 포함하여 수행되었습니다. 구강 내 비중격의 존재와 구강 내 주입 시 콧구멍에서 멸균 수분이 유출됨으로써 ONF 모델의 성공적인 확립을 확인할 수 있었습니다. 이 모델은 낮은 사망률, 상당한 체중 변화 및 ONF 크기의 최소 변동을 특징으로 하는 실용적이고 성공적인 구강 누공을 보여주었습니다. 향후 연구에서는 구개 상처 치유 메커니즘을 밝히고 구강 누공에 대한 새로운 치료법을 탐색하기 위해 이 방법론을 채택하는 것을 고려할 수 있습니다.
서론
구강과 비강 사이의 비정상적인 개구부인 구강 누공(ONF)은 임상적으로 치조돌기에서 목젖까지의 구조적 부위의 결함으로 나타나며, 일반적으로 구개열 복구 후 합병증으로 발생한다1. ONF 환자는 음식 역류, 조음 장애 및 속도 인두 기능 장애를 경험하여 삶의 질에 상당한 영향을 미칩니다 2,3,4. 수술 후 ONF의 비율은 2.4%에서 55%까지 갈라진 틈, Veau 유형 및 수술 방법 5,6,7,8과 같은 요인으로 인해 다양합니다. 또한 ONF 수리 후 재발률은 0%에서 43%9 사이로 높습니다.
최근 ONF 분야에서 다양한 재료, 약물 및 새로운 기술 10,11,12,13,14,15,16,17을 포함한 몇 가지 새로운 치료법이 가능성을 보여주었습니다.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
이 연구의 모든 동물 시술은 쓰촨 대학교 중국 서부 구강 의학 학교 윤리 위원회의 검토 및 승인을 받았습니다. 본 연구에는 성체 C57BL/6 마우스(암컷)가 사용되었습니다.
1. 수술 준비
- 발아기, 안과 소작, 미세 수술 가위, 미세 수술 핀셋, 주사기 및 바늘(26g x 0.63인치)(그림 1A, B)과 같은 절차에 필요한 수술 기구를 수집합니다( 재료 표 참조).
알림: 수술 전에 안과 소작, 미세 수술 핀셋 및 미세 수술 가위를 포함한 수술 기구를 102.9kPa(1.05kg/cm2) 및 121°C에서 20분 동안 고압멸균합니다. - 수술용 커튼, 라텍스 장갑, 멸균 면, 멸균 시트, 멸균 금속 호일, 수술 플랫폼용 폼 보드, 고무 밴드(의료용 라텍스 장갑을 찢어 얻을 수 있음) 및 테이프(그림 1C)와 같은 필요한 수술 용품을 수집합니다( 재료 표 참조).
알림: 수술 현장용 주사기 및 멸균 시트를 포함하여 각 마우스에 대해 별도의 소모품 세트를 ....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
이 실험 방법의 타당성과 안정성을 평가하기 위해 10마리의 마우스에 대해 동일한 절차를 수행하고 사망률, 상처 크기의 변화, 체중 및 조직학적 분석에 대해 관찰했습니다. 생쥐들은 7일째에 안락사되었다.
이 시술은 사망률이 낮았다. 그림 1A-C에 묘사된 안과 소작 및 발아기는 이 실험에 사용된 핵심 기기였습니다. ONF 모델은 제공된 프로토콜에 따라 생성되었습니다. 수술을 받은 쥐 10마리 중 수술 후 7일째 되는 날 사망한 쥐는 단 한 마리뿐이었다. 실험 전체의 전체 사망률은 약 10%였습니다.
그 결과 설명된 방법을 사용하여 생성된 ONF의 크기에서 현저한 변동성이 나타났습니다. 수술 당일, 모든 쥐는 길이 2.0mm, 너비 1.5mm의 타원형 상처를 보였다. 수술 후 7일째에 ONF 형성을 평가했을 때 ONF 크.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
연구원들은 ONF 10,11,12,13,14,15,16,17을 치료하기 위한 다양한 재료, 약물 및 새로운 기술을 탐구했습니다. 수술 방법의 발전으로 ONF의 발생률과 재발이 줄어들었습니다. 그러나 질병의 고유한 특성으로 인해 클리닉의 ONF 환자 수가 제한되어 있어 잠재적인 치료법을 연구하기 위한 표준화된 모델이 필요합니다. ONF 모델을 만드는 몇 가지 방법이 설명되었지만18,19,20,21,22,23 종종 짧고 실험 방법에 대한 자세한 논의가 부족했습.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
이 연구는 연구 개발 프로그램, 쓰촨 대학교 중국 서부 구강학 병원(RD-02-202107), 쓰촨성 과학 기술 지원 프로그램(2022NSFSC0743) 및 쓰촨 박사후 과학 재단(TB2022005) 보조금의 지원을 받았습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Germinator | 전자 현미경 과학 | 66118-20 | 난방 및 소독 장비 |
| 라텍스 장갑 | Allmed | 또는 유사 | |
| 조명 | 올림푸스 | A1813 | |
| Meloxicam | MedChemExpress | HY-B0261 | 분쇄; 5 mg / kg |
| 미세 수술기구 (가위 및 핀셋) | Jiangsu Tonghui Medical Devices Co. | M-Y-0087 | 수술 기구 |
| 안과 소작 | Suqian Wenchong Medical Equipment Co. | 1.00234E + 13 | 수술 기구 |
| 멸균 면화, | Yancheng Begu Technology Co. | 또는 유사한 | |
| 멸균 금속 호일 | Biosharp | 또는 유사한 | |
| 멸균 시트 | 3M | XH003801129 | 또는 유사한 |
| 외과 커튼, | Yancheng Begu Technology Co. | 또는 유사한 | |
| 주사기 | Yancheng Begu Technology Co. | S-015301 | 또는 유사한 |
| 테이프 | Bkmamlab | 또는 유사한 | |
| 온도 유지 장치 | Harvard Apparatus | LE-13-2104 | |
| Zoletil50 | Virbac | 80 mg/kg |
참고문헌
- Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
- Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
